一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法
技术领域
1.本发明涉及分析化学技术领域，具体涉及一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法。
背景技术：2.抗氧化剂bht化学名称二丁基羟基甲苯，它的抗氧化作用是因其自身发生自动氧化而实现的，是我国目前生产量最大的抗氧化剂之一。抗氧化剂bht在抗氧剂的类别上属于主抗-空间受阻酚类抗氧剂，通过捕获有机物降解过程中产生的自由基而长期持续性发挥抗氧作用。
3.抗氧化剂bht为无嗅、无味，无毒的白色晶体。熔点71℃，沸点265℃，不溶于水和稀碱，溶于苯、甲苯、乙醇、汽油及食物油中，其溶解度为：乙醇25chemicalbook％，豆油30％，棉籽油20％，猪油40％。主要用于食品的食用油领域，通过抗氧化剂的还原反应，降低食品内部及其周围的氧含量，有些抗氧化剂如抗坏血酸与异抗坏血酸本身极易被氧化，能使食品中的氧首先与其反应，从而避免了食用油的氧化，以来增加食用油的货架期。
4.但是有研究表明，抗氧化剂的不适当补充会诱发疾病和增加人的死亡几率。目前，已经开发了多种检测分析抗氧化剂bht浓度的方法，包括液相色谱和气相色谱法。但上述方法通常存在样品前处理繁琐、需要价格昂贵仪器设备等不足，迫切需要发展准确、高效测定抗氧化剂bht浓度的新方法。
5.因此，我们提出一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法。
技术实现要素：6.本发明的目的是针对背景技术中检测方案不足之处的改进，提出一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法。
7.本发明通过以下技术方案来实现所述目的：
8.本发明提供了一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法，以甲醇溶液作为抗氧化剂bht检测试剂，加入到待测大豆油中混匀，离心后吸取上清液经滤膜过滤获得滤液；利用紫外分光光度计检测所述滤液在278nm处的吸光度，以实现对待测大豆油中抗氧化剂bht浓度的测定。
9.进一步地，具体包括以下步骤：
10.(1)配制浓度溶液：取0.02gbht标准品倒入30ml玻璃瓶中，再向玻璃瓶中加入20ml甲醇，配制成1mg/ml的标准溶液；
11.(2)绘制标准工作曲线：以1mg/ml的标准溶液和甲醇配合，配制不同浓度的抗氧化剂bht标准溶液，离心后吸取上清液经滤膜过滤获得滤液，利用紫外分光光度计检测滤液在278nm处的吸光度，利用不同浓度的抗氧化剂bht标准溶液的滤液和对应滤液的吸光度绘制工作曲线并获得两者的相关关系；
12.(3)待测样品抗氧化剂bht测定：在待测大豆油中加入甲醇，混匀，离心后吸取上清
液经滤膜过滤获得滤液，利用紫外分光光度计检测滤液的吸光度，根据得到的吸光度和所述工作曲线，获得待测大豆油中抗氧化剂bht浓度。
13.进一步地，所述步骤(2)中抗氧化剂bht标准溶液的浓度范围为10-100mg/l，具体为100mg/l、80mg/l、40mg/l、20mg/l、10mg/l。
14.进一步地，所述步骤(2)具体步骤为：
15.(1)配制浓度范围在10-100mg/l之间的不同浓度的抗氧化剂bht溶液，分别取不同浓度的抗氧化剂bht标准溶液，充分震荡混匀，离心后吸取上清液经0.22um滤膜过滤获得滤液；
16.(2)利用紫外分光光度计检测滤液的吸光度，测定不同滤液在278nm处的吸收度，记为ai，记不含抗氧化剂bht样品的吸光度为a0；
17.(3)计算吸光度δa＝a
i-a0，根据抗氧化剂bht和δa数据，绘制标准工作曲线-，获得两者的相关关系。
18.进一步地，所述相关关系拟合为y＝8.33
×
10-3
x+0.00957，x表示抗氧化剂bht，单位为mg/l，y为278nm处吸光度。
19.进一步地，所述步骤(3)具体步骤为：
20.(1)准确称量2g大豆油于10ml塑料离心管中，分三次加入总量为10ml的甲醇，分别在旋涡混合器上快速混匀，充分震荡混匀，离心后吸取上清液经0.22um滤膜过滤获得滤液；
21.(2)利用紫外分光光度计检测滤液的吸光度，测定滤液在278nm处的吸收度，记为a
样品
，记不含抗氧化剂bht样品的吸光度为a0；
22.(3)计算δa
样品
＝a
样品-a0，代入所述相关关系中计算得出抗氧化剂bht浓度。
23.本发明还提供了一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法在食用油抗氧化剂bht机理研究中的方法。
24.本发明的有益效果在于：本发明提供了一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法，以甲醇溶液作为抗氧化剂bht检测试剂，加入到待测大豆油中快速混匀，离心后吸取上清液经滤膜过滤获得滤液；利用紫外分光光度计检测所述滤液在278nm处的吸光度，以实现对待测大豆油中抗氧化剂bht的测定。本发明操作简便、检测限较低、灵敏度较高、抗干扰能力较强，在食用油抗氧化剂bht分析等领域，有着广泛的方法前景。
附图说明
25.图1为10mg/l-100mg/l的bht标准溶液紫外光谱图；
26.图2为本发明中所述的线性拟合工作曲线；
27.图3为不同氙灯照射时间在紫外分光光度计下峰值与吸光度的变化；
28.图4为不同光照时间的吸光度对其大豆油中bht的影响柱状图；
29.图5为不同紫外灯照射时间在紫外分光光度计下峰值与吸光度的变化；
30.图6为不同温度条件对大豆油中bht的影响。
具体实施方式
31.下面结合附图对本技术作进一步详细描述，有必要在此指出的是，以下具体实施方式只用于对本技术进行进一步的说明，不能理解为对本技术保护范围的限制，该领域的
技术人员可以根据所述申请内容对本技术做出一些非本质的改进和调整。
32.1、材料
33.本实施例所用方法如无特别说明均为本领域的技术人员所知晓的常规方法，所用的试剂等材料，如无特别说明，均为市售购买产品。
34.2、方法
35.2.1利用紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht浓度
36.2.1.1绘制bht标准曲线
37.准确称取0.02gbht标准品，倒入30ml玻璃瓶中，再向里面加入20ml甲醇，配置成bht浓度为1mg/ml的标准溶液，也称为母液。
38.吸取母液2ml，加入18ml甲醇，获得浓度为100mg/l的bht标准溶液；
39.取8ml浓度为100mg/l的bht标准溶液，加入2ml甲醇，获得浓度为80mg/l的bht标准溶液；
40.取5ml浓度为80mg/l的bht标准溶液，加入5ml甲醇，获得浓度为40mg/l的bht标准溶液；
41.取5ml浓度为40mg/l的bht标准溶液，加入5ml甲醇，获得浓度为20mg/l的bht标准溶液；
42.取5ml浓度为20mg/l的bht标准溶液，加入5ml甲醇，获得浓度为10mg/l的bht标准溶液；
43.具体如表1所示：
44.表1配制不同浓度bht的标准溶液的用量
[0045][0046][0047]
将10mg/l-100mg/l的bht标准溶液在加入甲醇后在漩涡混合器上快速混匀1min，离心7000r/min，转5分钟，吸取上清液合并于10ml离心管中，可得6ml左右的上清液，摇匀后经0.22um滤膜过滤，获得滤液；
[0048]
利用紫外分光光度计检测滤液的吸光度，测定不同滤液在278nm处的吸收度，记为ai，记不含抗氧化剂bht样品的吸光度为a0；
[0049]
计算吸光度δa＝a
i-a0，根据抗氧化剂bht和δa数据，绘制标准工作曲线-，获得两者的相关关系。
[0050]
表2 10mg/l-100mg/l的bht标准溶液的吸光度
[0051]
bht溶液浓度0mg/l10mg/l20mg/l40mg/l80mg/l100mg/l吸光度00.0930.1840.3480.6750.839
[0052]
bht标准曲线如图1所示，由图可知，在峰值为278nm时，浓度为横坐标，各浓度的吸光度为纵坐标制成标准拟合曲线，bht标准品线性拟合曲线如图2所示，由上表可知，r的平方为0.99965大于0.9，说明线性拟合的很好。故bht的线性拟合曲线为y＝8.33
×
10-3
x+0.00957，x表示抗氧化剂bht，单位为mg/l，y为278nm处吸光度。
[0053]
2.1.2验证
[0054]
大豆油样品处理：准确称量2g大豆油于10ml塑料离心管中，用甲醇分三次(3ml+3ml+4ml)分别在漩涡混合器上快速混匀1min，离心7000r/min，转5分钟。吸取上清液合并于10ml离心管中，可得6ml左右的上清液，摇匀后经0.22um滤膜过滤。
[0055]
上清液的吸光度为a
样品
＝0.948(a0＝0)，将a
样品
其带入bht线性回归方程中，可得大豆油中bht的浓度为112mg/l。
[0056]
2.2方法
[0057]
2.2.1不同光照对bht的影响
[0058]
2.2.2.1氙灯光照对bht的影响
[0059]
准确称量4g大豆油，将其放置于5ml塑料离心管中，开启短弧氙灯，设备参数设置一致，将配置的样品均匀放于仪器的转盘上，调节顺时针转向，保证能完全照到。将样品分别照射2h、4h、6h、8h、10h、12h、14h。
[0060]
在照射后的4g样品中分别取2g大豆油于10ml塑料离心管中，用甲醇分三次(3ml+3ml+4ml)分别在漩涡混合器上快速混匀1min，离心7000r/min，转5分钟。吸取上清液合并于10ml离心管中，可得6ml左右的上清液，摇匀后经0.22um滤膜过滤。上清液的吸光度为0.948，吸取原溶液2ml，甲醇2ml，制成浓度为56mg/l的溶液。保持大豆油中bht的溶液浓度不变，为56mg/l。观察不同照射时间在紫外分光光度计下峰值与吸光度的变化，如图3所示。
[0061]
经过观察紫外吸收峰可知，在峰值为278nm的时候，不同光照时间的吸光度对其大豆油中bht的影响。由图4可知，随着照射时间的延长，吸光度也在随着变小，说明大豆油中的bht在减少，抗氧化效果在增强。
[0062]
2.2.2.2紫外灯对大豆油中bht的影响
[0063]
紫外光法试验为保证每份试验大豆油的光照时间和强度一致，所以设计光照装置为在一个仪器台上均匀放置。盛有大豆油的试管中上方放置254nm波长，灯管到烧杯底部距离约为12cm，开始光照时灯管与样品表面距离为5cm。照射一定时间后取样检测，每间隔约2h取样一次检测。将照射后的样品经过甲醇萃取，经过之前一样的处理方式，配置56mg/l的浓度，再在紫外分光光度计下检测。
[0064]
由图5可知，在紫外灯254nm条件下，光照时间不同，吸光度基本不变，可以说明，大豆油中的bht在光照2-10h的情形下，比较稳定。
[0065]
2.2.3不同温度条件对大豆油中bht的影响
[0066]
2.2.3.1 4％bht大豆油的配制
[0067]
以配制20g食用油样品为例，准确称取(精确到0.001g)0.8g bht样品于20ml玻璃瓶中，再加入20g大豆油，摇匀30min备用。
[0068]
2.2.3.2烘箱加热实验
[0069]
分别称取大豆原油、含4％bht油样各10g于20ml玻璃瓶中。然后放置到已调好温度的烘箱内，(温度分别设置为65℃、95℃、125℃、155℃)2个玻璃瓶均匀放置于烘箱正中央，各加热2小时，取出后从每个玻璃瓶中均匀称量2g样品于10ml塑料离心管中，用10ml甲醇分三次(3ml+3ml+4ml)，分别在旋涡混合器上快速混匀1min，离心机转速调至7000r/min，离心5min。吸取上清液合并于10ml离心管中，可得6ml左右上清液，摇匀后经0.22um滤膜过滤，上清液的吸光度为0.948，再取2ml过滤后的溶液，加2ml甲醇。吸取稀释后的溶液在紫外分光光度计下分析。
[0070]
结果如图6所示，在278nm处，随着温度的升高，加热时间相同的情况下，bht在空气中的转化速率越高。
[0071]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。
技术特征：1.根据权利要求1所述的一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法，其特征在于：以甲醇溶液作为抗氧化剂bht检测试剂，加入到待测大豆油中混匀，离心后吸取上清液经滤膜过滤获得滤液；利用紫外分光光度计检测所述滤液在278nm处的吸光度，以实现对待测大豆油中抗氧化剂bht浓度的测定。2.根据权利要求2所述的一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)配制浓度溶液：取0.02gbht标准品倒入30ml玻璃瓶中，再向玻璃瓶中加入20ml甲醇，配制成1mg/ml的标准溶液；(2)绘制标准工作曲线：以1mg/ml的标准溶液和甲醇配合，配制不同浓度的抗氧化剂bht标准溶液，离心后吸取上清液经滤膜过滤获得滤液，利用紫外分光光度计检测滤液在278nm处的吸光度，利用不同浓度的抗氧化剂bht标准溶液的滤液和对应滤液的吸光度绘制工作曲线并获得两者的相关关系；(3)待测样品抗氧化剂bht测定：在待测大豆油中加入甲醇，混匀，离心后吸取上清液经滤膜过滤获得滤液，利用紫外分光光度计检测滤液的吸光度，根据得到的吸光度和所述工作曲线，获得待测大豆油中抗氧化剂bht浓度。3.根据权利要求2所述的一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法，其特征在于：所述步骤(2)中抗氧化剂bht标准溶液的浓度范围为10-100mg/l，具体为100mg/l、80mg/l、40mg/l、20mg/l、10mg/l。4.根据权利要求3所述的一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法，其特征在于，所述步骤(2)具体步骤为：(1)配制浓度范围在10-100mg/l之间的不同浓度的抗氧化剂bht溶液，分别取不同浓度的抗氧化剂bht标准溶液，充分震荡混匀，离心后吸取上清液经0.22um滤膜过滤获得滤液；(2)利用紫外分光光度计检测滤液的吸光度，测定不同滤液在278nm处的吸收度，记为a
i
，记不含抗氧化剂bht样品的吸光度为a0；(3)计算吸光度δa＝a
i-a0，根据抗氧化剂bht和δa数据，绘制标准工作曲线-，获得两者的相关关系。5.根据权利要求4所述的一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法，其特征在于：所述相关关系拟合为y＝8.33
×
10-3
x+0.00957，x表示抗氧化剂bht，单位为mg/l，y为278nm处吸光度。6.根据权利要求5所述的一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂bht中的方法，其特征在于，所述步骤(3)具体步骤为：(1)准确称量2g大豆油于10ml塑料离心管中，分三次加入总量为10ml的甲醇，分别在旋涡混合器上快速混匀，充分震荡混匀，离心后吸取上清液经0.22um滤膜过滤获得滤液；(2)利用紫外分光光度计检测滤液的吸光度，测定滤液在278nm处的吸收度，记为a
样品
，记不含抗氧化剂bht样品的吸光度为a0；(3)计算δa
样品
＝a
样品-a0，代入所述相关关系中计算得出抗氧化剂bht浓度。
技术总结本发明公开了一种紫外分光光度计检测食用油中抗氧化剂BHT中的方法，以甲醇溶液作为抗氧化剂BHT检测试剂，加入到待测大豆油中快速混匀，离心后吸取上清液经滤膜过滤获得滤液；利用紫外分光光度计检测所述滤液在278nm处的吸光度，以实现对待测大豆油中抗氧化剂BHT的测定。本发明操作简便、检测限较低、灵敏度较高、抗干扰能力较强，在食用油抗氧化剂BHT分析等领域，有着广泛的方法前景。有着广泛的方法前景。有着广泛的方法前景。
技术研发人员：陈霞 徐芳
受保护的技术使用者：合肥工业大学
技术研发日：2022.03.29
技术公布日：2022/7/5
