1.本发明属于食品保鲜技术领域，涉及一种可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液用于冷鲜猪肉的保鲜方法。
背景技术：2.林蛙皮是林蛙躯体的表皮，它常被当作提取林蛙油后的废弃物而丢弃，沦为垃圾。事实上，有研究表明林蛙皮含有丰富的胶原蛋白和透明质酸，胶原蛋白含量可达48％，多肽类含量在10％以上，是非常好的胶原蛋白的生产原料。常见的胶原蛋白的原材料主要有牛的皮骨和鱼鳞、鱼皮，但是疯牛病让人们对从牛源胶原蛋白的安全顾虑重重，而现在水资源污染严重，可能会导致从鱼类中提取的胶原蛋白氰化物超标。而林蛙作为两栖动物，它的皮肤可以防御外界感染，所以林蛙皮源胶原蛋白可以说是很安全的胶原蛋白。
3.胶原蛋白是是动物结缔组织的最重要的一种生物大分子。它作为医用生物材料和食品领域中最有研究价值一种生物大分子，胶原蛋白由于其生物相容性、可生物降解性、极佳的保湿型以及安全无毒性等特征，常被应用于医药、化妆品、食品和组织工程等领域。
4.壳聚糖是甲壳素n-脱乙酰基的产物，为类白色粉末，无味、无臭、无毒，分子式为(c6h
11
no4)n。壳聚糖不溶于水和乙醇，通常使用各种稀的无机酸或有机酸溶解，如盐酸、甲酸、乙酸、乳酸和抗坏血酸等。壳聚糖具有生物可降解性、生物相容性、抑菌、抗癌、降脂、增强免疫等多种生理功能。
5.可食性涂膜液是粘附于食品表面上的一层可食用的薄膜，它常以蛋白质、脂肪、多糖和淀粉等为成膜载体。可食性涂膜液满足绿色安全的理念和要求，可以完美解决食品保鲜与健康环保的矛盾。
6.冷鲜肉营养丰富，水分活度高，感官品质好，但是其货架期短，容易腐败变质等问题比较严重，所以保证冷鲜肉货架期及质量是企业需要解决的紧急问题。肉制品的保存方式有热处理、低温、气调包装、真空包装及添加化学防腐剂等，但热处理和低温保鲜保存方式会使肉的品质下降；气调包装难以有效地控制食品中的混合气体，如果比例不合理，将会对冷鲜肉的颜色产生不利的影响；利用真空包装方式会使肉的汁液损失率增大；而化学防腐剂多数含有致癌成分，会对人体造成极大的危害。所以，如何确保冷鲜肉的质量并且研发绿色安全的保鲜材料是急需解决的问题。
技术实现要素：7.本发明的目的在于提供一种可食性胶原蛋白-壳聚糖涂膜液用于冷鲜猪肉的保鲜方法，以解决冷鲜猪肉贮藏过程中品质问题和达到延长保质期的要求。本发明要解决的技术问题是提供上述林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，还要解决的技术问题是提供上述林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的应用。
8.本发明为解决技术方案采取如下技术方案：
9.一种可食性胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，它包括如下步骤：
10.(1)采用胃蛋白酶法提取林蛙皮胶原蛋白；
11.(2)将步骤(1)提取的胶原蛋白溶于100ml蒸馏水中，配置成质量浓度为0.4～0.6％的林蛙皮胶原蛋白溶液；将壳聚糖溶于100ml的1％乙酸溶液，配置成质量浓度为1.5～2.5％的壳聚糖溶液；
12.(3)将步骤(2)所获得胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液按照1～5:3的比例混合，置于磁力搅拌器搅拌均匀即得。
13.本发明所述的胃蛋白酶法提取林蛙皮胶原蛋白可以按照以下方法进行提取：
14.(1)粉碎林蛙皮制得林蛙皮粉；
15.(2)用0.02m naoh溶液在37℃下按照1:20(w:v)的料液比对林蛙皮粉进行脱色，脱色时间为12h；
16.(3)脱色结束，用10％正丁醇溶液在37℃下按照1:45(w:v)的料液比对林蛙皮粉进行脱脂，脱脂时间为6h；
17.(4)将步骤(3)制得的脱脂粉以1:60(w:v)的料液比置于5％胃蛋白酶乙酸溶液中，50℃磁力搅拌5h提取林蛙皮胶原蛋白；
18.(5)将步骤(4)获得的溶液在4℃条件下离心，10000rpm/20min，离心结束后取上清液，用0.2m naoh调上清液ph至7.5；
19.(6)用0.9m nacl溶液对粗提液在4℃环境下进行盐析24h，盐析结束后4℃离心10000rpm/20min，取沉淀；
20.(7)将步骤(6)获得的沉淀用0.1m乙酸溶液透析1d，每12h更换一次透析液，后用蒸馏水透析1d，每12h更换一次透析液，真空冷冻干燥得林蛙皮胶原蛋白。
21.本发明所述的应用到冷鲜猪肉的方法可以按照以下方法进行：
22.将冷鲜猪肉浸泡在胶原蛋白-壳聚糖涂膜液中，浸泡时间为10s～1min，取出沥干放入保鲜盒内。
23.本发明的积极效果在于：
24.1、本发明的一种可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液，具有在体内无毒、无免疫原性、安全可靠的优点。采用浸泡涂膜的方法，在冷鲜猪肉形成一层保护层，对冷鲜猪肉的起到明显保鲜效果。
25.2、林蛙皮常被当作提取林蛙油后的废弃物而丢弃，沦为垃圾。利用林蛙皮源胶原蛋白制成可食性应用于食品保鲜，具有重要的经济效益和环境效益。
具体实施方式
26.通过以下实施例进一步举例描述本发明，并不以任何方式限制本发明，在不背离本发明的技术解决方案的前提下，对本发明所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。
27.实施例1
28.本实施提供了一种林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，并对冷鲜猪肉进行浸泡保鲜，步骤包括：
29.(1)采用胃蛋白酶法提取林蛙皮胶原蛋白；
30.(2)将步骤(1)提取的胶原蛋白溶于100ml蒸馏水中，配置成质量浓度为0.4％的林蛙皮胶原蛋白溶液；将壳聚糖溶于100ml的1％乙酸溶液，配置成质量浓度为2％的壳聚糖溶液；
31.(3)将步骤(2)所获得胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液按照1:1的比例混合，放在磁力搅拌器中，37℃搅拌搅拌30min。
32.(4)对照组：称取100g冷鲜猪肉，不做任何处理，平摊放入保鲜盒内，在4℃条件下保藏。试验组：将冷鲜猪肉浸泡在步骤(3)所获得的胶原蛋白-壳聚糖涂膜液中，浸泡1min后取出沥干平摊放入保鲜盒内，在4℃条件下保藏。在不同时间段对冷鲜猪肉进行指标检测和评价。
33.表1对照组
[0034][0035][0036]
表2试验组
[0037][0038]
实施例2
[0039]
本实施提供了一种林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，并对冷鲜猪肉进行浸泡保鲜，步骤包括：
[0040]
(1)采用胃蛋白酶法提取林蛙皮胶原蛋白；
[0041]
(2)将步骤(1)提取的胶原蛋白溶于100ml蒸馏水中，配置成质量浓度为0.4％的林蛙皮胶原蛋白溶液；将壳聚糖溶于100ml的1％乙酸溶液，配置成质量浓度为2％的壳聚糖溶液；
[0042]
(3)将步骤(2)所获得胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液按照2:3的比例混合，放在磁力搅拌器中，37℃搅拌搅拌30min。
[0043]
(4)对照组：称取100g冷鲜猪肉，不做任何处理，平摊放入保鲜盒内，在4℃条件下保藏。试验组：将冷鲜猪肉浸泡在步骤(3)所获得的胶原蛋白-壳聚糖涂膜液中，浸泡50s后取出沥干平摊放入保鲜盒内，在4℃条件下保藏。在不同时间段对冷鲜猪肉进行指标检测和评价。
[0044]
表3对照组
[0045][0046]
表4试验组
[0047][0048][0049]
实施例3
[0050]
本实施提供了一种林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，并对冷鲜猪肉进行浸泡保鲜，步骤包括：
[0051]
(1)采用胃蛋白酶法提取林蛙皮胶原蛋白；
[0052]
(2)将步骤(1)提取的胶原蛋白溶于100ml蒸馏水中，配置成质量浓度为0.4％的林蛙皮胶原蛋白溶液；将壳聚糖溶于100ml的1％乙酸溶液，配置成质量浓度为2％的壳聚糖溶液；
[0053]
(3)将步骤(2)所获得胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液按照3:2的比例混合，放在磁力搅拌器中，37℃搅拌搅拌30min。
[0054]
(4)对照组：称取100g冷鲜猪肉，不做任何处理，平摊放入保鲜盒内，在4℃条件下保藏。试验组：将冷鲜猪肉浸泡在步骤(3)所获得的胶原蛋白-壳聚糖涂膜液中，浸泡1min后取出沥干平摊放入保鲜盒内，在4℃条件下保藏。在不同时间段对冷鲜猪肉进行指标检测和评价。
[0055]
表5对照组
[0056][0057][0058]
表6试验组
[0059][0060]
结论：
[0061]
上述1～3个实施例数据显示，对照组到第4天，已经变质。冷鲜猪肉经过可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液处理后，能有效的降低冷鲜猪肉冷藏期间菌落总数、tbars值、ph值和汁液流失率。因此，本发明的可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液能有效的避免冷鲜猪肉发生腐败变质等现象，可以提高冷鲜猪肉冷藏期间的质量和延长其保质期。
技术特征：1.一种可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采用胃蛋白酶法提取林蛙皮胶原蛋白；(2)将步骤(1)提取的胶原蛋白溶于100ml蒸馏水中，配置成质量浓度为0.4～0.6％的林蛙皮胶原蛋白溶液；将壳聚糖溶于100ml的1％乙酸溶液，配置成质量浓度为1.5～2.5％的壳聚糖溶液；(3)将步骤(2)所获得胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液按照1～5:3的比例混合，置于磁力搅拌器中搅拌均匀即得。2.根据权利要求1所述的可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，其特征在于:林蛙皮胶原蛋白溶液浓度为0.4～0.5％。3.根据权利要求1所述的可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，其特征在于:壳聚糖溶液浓度为2～2.5％。4.根据权利要求1所述的可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，其特征在于:所述林蛙皮胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液按照3:2的比例混合。5.根据权利要求1所述的可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法，其特征在于:步骤(3)中，所述的搅拌，条件为37℃搅拌30min。6.根据权利要求1所述的可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液应用到冷鲜猪肉的保鲜，其特征在于:用胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液浸泡处理冷鲜猪肉。7.根据权利要求6所述的可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液应用到冷鲜猪肉的保鲜，其特征在于:用胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液浸泡冷鲜猪肉的时间为30s-1min。
技术总结本发明公开了一种可食性林蛙皮胶原蛋白-壳聚糖复合涂膜液的制备方法与应用，步骤包括：(1)提取林蛙皮源胶原蛋白；(2)将胶原蛋白溶于100mL蒸馏水中，配置成质量浓度为0.4～0.6％的林蛙皮胶原蛋白溶液；将壳聚糖溶于100mL的1％乙酸溶液，配置成质量浓度为1.5～2.5％的壳聚糖溶液；(3)将胶原蛋白溶液和壳聚糖溶液按照一定比例混合，置于磁力搅拌器搅拌均匀。将冷鲜猪肉浸泡在胶原蛋白-壳聚糖涂膜液中，取出沥干后放入保鲜盒进行保鲜。本发明在无二次污染、绿色环保和充分利用生物资源的基础上，既保证了冷鲜猪肉的品质，又延长了冷鲜猪肉的货架期。鲜猪肉的货架期。
技术研发人员：卢静 任宏茹 关爽
受保护的技术使用者：吉林大学
技术研发日：2022.03.28
技术公布日：2022/7/5
