1.本发明涉及柚子树种植方法，尤其涉及一种可提升果实品质的 柚子树种植方法。
背景技术：2.柚子属于芸香科柑橘类植物，是一种在东南亚地区广泛种植的 水果。由于种植零星分散、种植技术水平不一等差异的影响，同时 柑橘果园中普遍存在土壤水分流失、土壤土质下降等土壤条件问 题，因此仍有大量口感不佳、形状不良的瑕疵皮落果和成熟果作为 废物处理。再者，柚子这类柑橘属水果在种植过程中易受到病虫害 的威胁而患上黄龙病，导致柚子品质下降。
3.目前，柚子的种植需要先除掉地面杂草，如铁芒箕、茅根草、 牛筋草、马唐草等，再以地膜、沙砾、秸秆为覆盖材料进行地表覆 盖处理以改善土壤的理化性质、土壤水分、水分利用效率(减少水 分蒸发、增加农作物蒸腾作用)以及土壤微环境(提高微生物丰富 度和多样性)，促进土壤有机质的分解和矿质养分的吸收，进而提 高其作物产量和品质。然而，这种种植方法的维护成本高，不利于 可持续发展，因此，有必要提出一种新的可提升果实品质的柚子树 种植方法，该种植方法能够为柑橘产业的绿色可持续发展提供一定 的促进作用。
技术实现要素：4.本发明所要解决的技术问题是提供一种可提升果实品质的柚子 树种植方法，可以防止水土流失，减少种植对土壤带来的破坏性影 响，提升柚子的品质，有利于促进果树种植的可持续发展。为实现 上述技术目的，本发明采取的具体的技术方案为：
5.一种可提升果实品质的柚子树种植方法，包括土壤处理、苗木 选择、苗木定植、后期护理的步骤，其中苗木定植步骤中包括以下 步骤：
6.步骤s1：修剪根部：将柚子苗木的侧根进行分散式修剪，保留 30-50条根粗在0.5-1厘米的侧根，将侧根的长度修剪为10-30厘 米，保留的侧根匀称分布在主根周侧，断根部位涂布300-500ppm 生根溶液；
7.步骤s2：制备种植土坯底：用巨大芽孢杆菌菌粉、蛭石粉、种 植土、腐殖酸盐缓释剂、铁芒箕枝叶、水按照重量比1-10：300
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500：200-350:3-20:100-200：200-500混匀配成；
8.步骤s3：包埋根部：将种植土坯底填充到育苗袋，将柚子苗木 的根部种植到育苗袋内培植25-45天；
9.步骤s4：防虫处理：定期在柚子苗木的叶子和茎部喷洒防虫 剂，所述防虫剂包含以下重量份的成分：铁芒箕提取液20-40份， 羧甲基纤维素钠5-12份，水杨酸甲酯10-20份；二甲基十八烷基氯 化铵5-15份，水50-80份；
10.步骤s5：苗木移植：将柚子苗木和种植土坯底从所述育苗袋中 取出，将柚子苗木连同种植土坯底种植在定植孔中，回填种植土， 在定植孔周围种植铁芒箕。
11.铁芒箕提取液的制备：将铁芒箕粉碎得到铁芒箕粗粉，铁芒箕 粗粉与乙醇按1:12
质量与体积比率混合，先在温度为35℃条件下浸 泡1h，55℃超声波提取80min，抽滤后留取滤液，并回收乙醇，铁 芒箕提取液。
12.作为本发明改进的技术方案，所述土壤处理步骤包括：
13.步骤1)选址：选择年雨量在1500-2400毫米的南亚热带和北亚 热带过渡地带，气候以中亚热带气候为主，海拔在15-40米的岭地 作为种植地；
14.步骤2)整地：对土地进行除杂、松土、施肥、撒石灰，对土 地进行整平、开沟、挖定植孔，相邻两定植孔之间的距离为1.5
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2m。
15.在本技术中，选择南亚热带和北亚热带过渡地带，属于中亚热 带湿润型季风气候区，每年3-8月为雨季，9-2月为旱季，雨热基本 同季，有利植物生长，而且春季冷暖空气交替频繁，夏季炎热酷 暑，秋冬季晴朗，昼夜温差大，年平均气温为18.2-23.6度，雨量充 沛，冬短夏长，春秋过渡快，四季分明；种植地选在海拔15-40 米，阳光充足，且昼夜温差，有利于柚子着色和糖分转化,甜度高,品 相好。
16.作为本发明改进的技术方案，在所述步骤s1中，生根溶液由以 下重量份组成：98％α-萘乙酸钠1-2份，羧甲基纤维素钠0.5-1份， 水杨酸0.5-1份，其余为水。
17.生根溶液中含有α-萘乙酸钠和水杨酸，可以有效促进根系的尖 端发育，迅速促进植物细胞分裂与生长，诱导形成不定根，也可增 强植物的抗旱、抗寒、抗病、抗盐碱、抗干热风的能力，而且其中 还加入了羧甲基纤维素钠，可以使得生根溶液形成低粘度胶体溶 液，将生根溶液涂抹到断根部位，可以使得断根部位形成保护薄 膜，从而将α-萘乙酸钠和水杨酸锁定在断根部位，有利于提高柚子 苗木的存活率。
18.作为本发明改进的技术方案，在所述步骤s2中，铁芒箕枝叶选 用新鲜采摘下来并裁剪成3-5厘米长的铁芒箕。该长度的铁芒箕可 以在种植土坯底形成较好的孔隙，还可以很好释出铁芒箕中的黄酮 类、多酚类、皂苷类、萜类及次级化合物。
19.作为本发明改进的技术方案，在所述步骤s2中，腐殖酸盐缓释 剂由腐植酸、蔗糖、甲酸钙、白炭黑、三乙醇胺、石膏粉以重量比 1-5：1-3：1-3：0.2-1:3-7混合造粒而成。
20.在本技术的腐殖酸盐缓释剂中，采用石膏粉作为载体，负载腐 植酸、蔗糖、甲酸钙、白炭黑、三乙醇胺，以腐植酸作为絮凝剂， 以甲酸钙作为促凝剂，以白炭黑作为胶结剂，以蔗糖作为缓释剂， 复合三乙醇胺，可以增强植土坯底的絮凝效果，使得腐殖酸盐缓释 剂具有很强的吸水、蓄水、吸附缓冲性和螫合能力，能使蔗糖成分 在土壤内缓慢释放，蔗糖释放到土壤中时，可以刺激柚子苗木的根 部细胞快速裂解生长，明显柚子苗木生长，更能显著提高柚子品 质；此外，腐植酸含有多种具有化学活性和生物活性的官能团，具 有刺激柚子苗木生长发育的作用，可增加根长、根量和根系活力， 增强根系吸收养分和水分的能力。
21.作为本发明改进的技术方案，在所述步骤s2中，所述腐殖酸盐 缓释剂的粒径为0.5-3厘米。
22.作为本发明改进的技术方案，在所述步骤s4中，喷洒防虫剂前 对柚子苗木进行浇水，使土壤持水量60-80％，柚子苗木根部有积 水，土壤中的水出现缓慢渗透现象；喷洒防虫剂喷洒后，三天内不 对柚子苗木进行浇水。
23.作为本发明改进的技术方案，在所述步骤s4中，喷洒防虫剂的 间隔周期在55-90天，喷施程度为枝叶、茎部均匀挂有雾状水滴。
24.作为本发明改进的技术方案，在所述步骤s5中，铁芒箕的种植 间距不大于0.5米，
铁芒箕与柚子苗木之间的种植间距为0.2-0.5 米。
25.作为本发明改进的技术方案，所述后期护理步骤包括：
26.步骤a1：修剪：每年2-3月，采摘分支上嫩芽；
27.步骤a2：施肥：每年2-3月，沿树干周围开挖宽为30-40cm， 深为50-60cm的环形沟，往环形沟内填充有机肥料，再进行覆盖， 环形沟与柚子苗木之间的距离为0.5-0.8米；在每年5-6月，喷施 1％过磷酸钙溶液；在7-8月，每隔10天施加一次膨果肥；摘果 后，再次开挖环形沟，填充过磷酸钙再进行覆盖。
28.所述有机肥为秸秆、豆粕、棉粕、菇渣、沼渣、菌渣、木质素 渣、畜禽粪便等；膨果肥为浓度500ppm牛奶膨靓果。
29.有益效果
30.本发明方法提供一种可提升果实品质的柚子树种植方法，该方 法需要先将柚子苗木的侧根进行分散式修剪，在断根部位涂布生根 溶液，以促进萌发更多新根，可使果树后期长出的新根均匀分布在 主根周侧，有利于柚子树根部汲取土壤的养分和水分，并均匀向上 传输，对树体匀称生长和扩大冠径起到促进作用，也为柚子苗木来 年更好地生长打下基础。
31.种植土坯底用以作为柚子树苗培植的土壤基底，其中种植土坯 底以蛭石粉、种植土为主要成分，透气性好，加入水后，粘性增 大，孔隙率下降，具有良好的阳离子交换性和吸附性，蛭石粉还可 向柚子苗木提供自身含有的k、mg、ca、fe以及微量的mn、cu、 zn等元素，具有保水、储水和提供矿物肥料等多重作用，可以使得 种植土坯底很好粘附柚子苗木的根部并为柚子苗木的根部提供水 分；其中种植土坯底中还加入了铁芒箕枝叶，铁芒箕枝叶可以进一 步增大种植土坯底的孔隙率和透气性，随着铁芒箕枝叶在种植土坯 底中腐化，可以为柚子苗木提供养分，而且铁芒箕体内的黄酮类、 多酚类、皂苷类、萜类及次级化合物具有抗氧化、抗菌、修复伤 口、驱虫等功效，释放到种植土坯底中，可以减少虫卵，还有利于 断根部位的修复和生根，对提高柚子苗木成活率起到极大地改善作 用。
32.另外，种植土坯底中含有腐殖酸盐缓释剂，有利于提高种植土 坯底中的养分利用率，提高种植土坯底的孔隙率，有利于使得柚子 苗木根部保持较好的水分环境，还可以为柚子苗木提供生长养分， 有利于提高柚子的果实品质。
33.在本技术中，定期在柚子苗木的叶子和茎部喷洒防虫剂，其中 防虫剂中含有铁芒箕提取液、水杨酸甲酯和二甲基十八烷基氯化 铵，可以防治有害生物如害虫、害螨、线虫、病原菌等，还可激活 某些植物防御基因，使植株产生毒素或防御蛋白以抵抗虫害，可以 达到很好的驱虫效果；羧甲基纤维素钠可有使得防虫剂很好附着在 柚子苗木的叶子和茎部，形成防虫保护层。
34.本技术在柚子苗木周围种植铁芒萁，有利于维持生态平衡，铁 芒箕在对可降低土壤温度、增加土壤含水量、改善土壤孔隙，改善 根系呼吸，从而促进柚子苗木生长。
附图说明
35.图1为本技术实施例1和对比例1的种植分布图；
36.图2为本技术实施例1的实地图；
37.图3为本技术对比组1的实地图；
38.图4为生长期间实施例1与对比例1的土壤含水率变化图；
39.图5为生长期间实施例1与对比例1的土壤ph变化图；
40.图6为生长期间实施例1与对比例1的土壤全氮、全磷、全钾 的含量变化图；
41.图7为生长期间实施例1与对比例1的土壤微生物的丰富度和 多样性指数图；
42.图8为生长期间实施例1与对比例1的土壤细菌在不同阶段的 聚类upgma分析(a)、nmds(b)、anosim(c)分析图；
43.图9为生长期间实施例1与对比例1的土壤的细菌和真菌群落 在门水平和属水平上的相对丰度示意图；
44.图10为生长期间实施例1与对比例1土壤中存在显著差异的细 菌和真菌进化分支图；
45.图11为生长期间实施例2与对比例2柚子的柚子的果重比值对 比图；
46.图12为生长期间实施例2与对比例2柚子的柚子的纵横径及其 比值对比图。
具体实施方式
47.为使本发明实施例的目的和技术方案更加清楚，下面将结合本 发明实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所 描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基 于所描述的本发明的实施例，本领域普通技术人员在无需创造性劳 动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
48.本技术领域技术人员可以理解，除非另外定义，这里使用的所 有术语(包括技术术语和科学术语)具有与本发明所属领域中的普 通技术人员的一般理解相同的意义。还应该理解的是，诸如通用字 典中定义的那些术语应该被理解为具有与现有技术的上下文中的意 义一致的意义，并且除非像这里一样定义，不会用理想化或过于正 式的含义来解释。
49.实施例1
50.一种可提升果实品质的柚子树种植方法，包括如下步骤：
51.(1)土壤处理：
52.步骤1)选址：选择年雨量在1500-2400毫米的南亚热带和北亚 热带过渡地带，气候以中亚热带气候为主，海拔在15-25米的岭地 作为种植地；
53.步骤2)整地：对土地进行除杂、松土、施肥、撒石灰，对土 地进行整平、开沟、挖定植孔，相邻两定植孔之间的距离为2m；
54.(2)苗木选择：
55.选择植株健康、无病虫害，根系完好，高度在1-1.2米且须根多 的柚子苗木；
56.(3)苗木定植：
57.步骤s1：修剪根部：将柚子苗木的侧根进行分散式修剪，保留 35-40条根粗在0.5-1厘米的侧根，将侧根的长度修剪为15-20厘 米，保留的侧根匀称分布在主根周侧，断根部位涂布500ppm生根 溶液；生根溶液由以下重量份组成：98％α-萘乙酸钠1份，羧甲基 纤维素钠0.5份，水杨酸0.5份，其余为水
58.步骤s2：制备种植土坯底：用巨大芽孢杆菌菌粉、蛭石粉、种 植土、腐殖酸盐缓释剂、铁芒箕枝叶、水按照重量比3：350： 350:10:120：400混匀配成；腐殖酸盐缓释剂由腐植酸、蔗糖、甲酸 钙、白炭黑、三乙醇胺、石膏粉以重量比2：1：2：0.5:5混合造粒 而成，腐殖酸
盐缓释剂的粒径为2厘米；
59.步骤s3：包埋根部：将种植土坯底填充到育苗袋，将柚子苗木 的根部种植到育苗袋内培植35天；
60.步骤s4：防虫处理：定期在柚子苗木的叶子和茎部喷洒防虫 剂，所述防虫剂包含以下重量份的成分：铁芒箕提取液20份，羧甲 基纤维素钠6份，水杨酸甲酯12份；二甲基十八烷基氯化铵10 份，水50份；喷洒防虫剂的间隔周期在90天，喷施程度为枝叶、 茎部均匀挂有雾状水滴，喷洒防虫剂前对柚子苗木进行浇水，使土 壤持水量60-80％，柚子苗木根部有积水，土壤中的水出现缓慢渗透 现象；喷洒防虫剂喷洒后，三天内不对柚子苗木进行浇水；
61.步骤s5：苗木移植：将柚子苗木和种植土坯底从所述育苗袋中 取出，将柚子苗木连同种植土坯底种植在定植孔中，回填种植土， 在定植孔周围种植铁芒箕，铁芒箕的种植间距为0.2-0.5米，铁芒箕 与柚子苗木之间的种植间距为0.3米；
62.(4)后期护理：
63.步骤a1：修剪：每年2-3月，采摘分支上嫩芽，长分枝留5-6 个嫩芽，中分枝留3-4个嫩芽，短分枝留2-3个嫩芽；
64.步骤a2：施肥：每年2-3月，沿树干周围开挖宽为30-40cm， 深为50-60cm的环形沟，往环形沟内填充有5厘米机肥料，再进行 覆盖，环形沟与柚子苗木之间的距离为0.5-0.8米；在每年5-6月， 喷施1％过磷酸钙溶液；在7-8月，每隔10天施加一次膨果肥；摘 果后，再次开挖环形沟，填充过5厘米磷酸钙再进行覆盖。
65.实施例2
66.一种可提升果实品质的柚子树种植方法，与上述实施例1的区 别在于：(3)苗木定植：
67.步骤s1：修剪根部：将柚子苗木的侧根进行分散式修剪，保留 35-40条根粗在0.5-1厘米的侧根，将侧根的长度修剪为15-20厘 米，保留的侧根匀称分布在主根周侧，断根部位涂布300ppm生根 溶液；生根溶液由以下重量份组成：98％α-萘乙酸钠2份，羧甲基 纤维素钠1份，水杨酸1份，其余为水
68.步骤s2：制备种植土坯底：用巨大芽孢杆菌菌粉、蛭石粉、种 植土、腐殖酸盐缓释剂、铁芒箕枝叶、水按照重量比3：350： 350:10:120：400混匀配成；腐殖酸盐缓释剂由腐植酸、蔗糖、甲酸 钙、白炭黑、三乙醇胺、石膏粉以重量比4：2：1：1:7混合造粒而 成，腐殖酸盐缓释剂的粒径为3厘米；
69.步骤s3：包埋根部：将种植土坯底填充到育苗袋，将柚子苗木 的根部种植到育苗袋内培植45天；
70.步骤s4：防虫处理：定期在柚子苗木的叶子和茎部喷洒防虫 剂，所述防虫剂包含以下重量份的成分：铁芒箕提取液30份，羧甲 基纤维素钠5份，水杨酸甲酯10份；二甲基十八烷基氯化铵5份， 水50份；喷洒防虫剂的间隔周期在60天，喷施程度为枝叶、茎部 均匀挂有雾状水滴，喷洒防虫剂前对柚子苗木进行浇水，使土壤持 水量60-80％，柚子苗木根部有积水，土壤中的水出现缓慢渗透现 象；喷洒防虫剂喷洒后，三天内不对柚子苗木进行浇水；
71.步骤s5：苗木移植：将柚子苗木和种植土坯底从所述育苗袋中 取出，将柚子苗木连同种植土坯底种植在定植孔中，回填种植土， 在定植孔周围种植铁芒箕，铁芒箕的种植
间距为0.2-0.5米，铁芒箕 与柚子苗木之间的种植间距为0.3米。
72.对比例1
73.一种可提升果实品质的柚子树种植方法，与上述实施例1的区 别在于：
74.步骤s5：苗木移植：将柚子苗木和种植土坯底从所述育苗袋中 取出，将柚子苗木连同种植土坯底种植在定植孔中，回填种植土， 以砂砾覆盖土壤表面。
75.其余步骤和条件均与实施例1一致。
76.对比例2
77.一种可提升果实品质的柚子树种植方法，与上述实施例2的区 别在于：
78.步骤s2：用种植土制备种植土坯底，其余步骤和条件均与实施 例2一致。
79.测试例1
80.试验对象：
81.在广东省梅州市梅县区松口镇寺坑村的一个柚子果园进行，地 区气候属于亚热带季风气候。该试验分为2个处理：(1)处理组 a，用实施例1种植；(2)空白组b，用对照例1种植。每个处理 组设置6个重复，具体参见图1-图3。
82.1土壤含水率的测定方法
83.土壤含水率的测定采取传统烘干测定法。具体测定步骤：取适 量新鲜土壤与铝盒，分别于电子天平称重，分别得到湿土重量 (m1)、铝盒重量(m0)，将装有土壤的铝盒放入105℃的恒温烘 箱内烘干至恒重，取出冷却至室温后立即称重将干土壤称重得到 (m2)。重复三次。土壤含水率的计算如以下公式所示。
[0084][0085]
1.2土壤含水率的测定结果
[0086]
两组的土壤含水率在柚子果实的生长期间变化趋势总体相同， 均呈上升-下降-上升的趋势(图4)，同时每个时期的处理组a的土 壤含水率均明显高于空白组b(p《0.05)。其中两组土壤含水率均 在采样天数为60天时达到最高；每一个批次的处理组a的土壤含 水率均比空白组b的土壤含水率明显高得多(p《0.05)，表明种植 铁芒箕可以减少土壤水分蒸腾。
[0087]
2.1土壤酸碱度的测定方法
[0088]
土壤酸碱度的测定采用ph计直接测得。测定步骤：对土壤样 品进行自然风干并通过10目的筛子，加水后静置30min(土壤：水 ＝1：2.5)，用校正后的ph计测定悬浮液中的ph值，重复三次。
[0089]
2.2土壤酸碱度的测定结果
[0090]
两组的土壤ph值在柚子果实的生长期间变化趋势总体相同， 均呈上升-下降-上升-趋于平缓的趋势(图5)。其中处理组a的土 壤ph值在采样天数生长过程中存在显著高与空白组b的时期 (p《0.05)，表明经铁芒箕覆盖处理后的柚子树的土壤ph值在生长 中期存在某些时期显著高于未处理柚子树的土壤ph值，其总体ph 值略微有所上升。
[0091]
3.1土壤全氮、全磷、全钾含量的测定方法
[0092]
3.1.1土壤全氮的测定：采用开式法测定土壤全氮的含量。用硫 酸钾、硫酸铜和硒粉作催化剂，加入浓硫酸，在高温处理下将土壤 中有机含氯化合物转变为铵根离子。土壤
样品需经过自然风干后用 100目筛作为预处理。具体步骤如下：
[0093]
土样的消煮：称取1g(精确到小数点后四位)风干土样放入 50ml的干燥开氏瓶中，加入1.1g混合催化剂和3ml浓硫酸，摇 匀。盖上小漏斗小火徐徐加热至泡沫消失后，提高温度微沸消煮至 溶液灰白色，继续加高温度至完全灰白稍带绿色后，再继续消煮1 h。消煮完毕后取下开氏瓶冷却(消煮完毕时消煮液和瓶壁中不应存 在黑色炭粒)；
[0094]
氮的测定：将开氏瓶中的小竹野转入半微量定氮蒸馏器的蒸馏 室中，用少量水洗涤开氏瓶4～5次，每次3ml～4ml，总量少于 20ml。另备有标线三角瓶，内加硼酸指示剂溶液5ml，将三角瓶 置于冷凝器的承接管下，管口插入至液面下。按照8ml/min d速度 进行蒸汽蒸馏。馏出液30～40ml时停止蒸馏，用少量水冲洗冷凝 管下端，取下三角瓶，用0.02mol/l硫酸标准溶液滴定至紫红色， 同时进行空白试验。
[0095]
3.1.2土壤全磷的测定：采用碳酸钠熔融-钼蓝比色法测定土壤全 磷。土壤样品需经过自然风干后用100目筛作为预处理。具体步骤 如下：
[0096]
土壤熔融-待测液的制备：称取通过100目的烘干土壤样品 0.2500g置于铂坩埚中，另外称取研细的无水碳酸钠2g，将其中的1.8g小心地用玻璃棒与样品充分搅拌混匀，其余的碳酸钠铺盖于混 合物表面，并轻轻敲动坩埚使表面铺平，将坩埚放人高温电炉中， 升温至900c～920c熔融，20min后取出，趁热时揭盖观察熔块状 态，若表面成凹形，颜色匀一无气泡时则熔融已完全。待坩埚冷却 至不太烫手时，盖好坩埚盖，戴上手套，将坩埚轻轻振拍，使熔块 脱出将熔块移入100ml烧杯中，盖上表面皿，小心地加人约10ml 硫酸溶液溶解熔块，并用热水洗净坩锅。将烧杯中的内容物洗人 100ml容量瓶中，用热水及橡皮头玻璃棒洗净烧杯、洗涤液均倒人 上述容量瓶中，冷却后定容，用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于三角瓶 中；
[0097]
磷的测定：吸取滤液5ml～10ml于50ml容量瓶中，加水稀 释至约30ml，加二硝基酚指示剂2滴。调节h至溶液刚呈微黄 色，然后加入铝锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容。在室温高于 15℃的条件下放置30min后，在分光光度计上用波长700nm比 色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上 寻找对应含量。颜色在8h内可保持定。
[0098]
3.1.3土壤全钾的测定：土壤全氮采用的测定是氢氧化钠熔融-火 焰光度法测得。土壤样品需经过自然风干后用100目筛作为预处 理。具体步骤如下：
[0099]
土壤熔融-待测液的制备：称取烘干土样约0.250g于银坩埚底 部，加几滴无水乙醇湿润，然后加入2.0g固体naoh，平铺于土样 的表面。将所有样品放入银坩埚内，坩埚在低温时放人高温电炉 内，由低温升至400c后关闭电源，15min后继续升温至720c。 保持此温度15min后，取出坩埚，冷却后，若熔块成淡蓝色或蓝绿 色，表明熔融较好；若熔块呈棕黑色，表明还没有熔好，必须再加 naoh熔融一次。在冷却的坩埚内，加10ml水，加热至8℃左 右，待熔块溶解后，再煮沸5min，不经过滤直接转人50ml容量 瓶中，然后用少量0.4mol/l硫酸溶液清洗坩埚数次，一起倒人容量 瓶内，使总体积至40ml左右，再加5滴hci(1:1)。加5mll 9 mol/l硫酸溶以中和多余的naoh。最后用水定容、过滤，此待测 液可供磷和钾测定用；
[0100]
钾的测定：吸取待测液5.00或10.00ml(视含钾量大小而 定)于50ml容量瓶中，用水定容，直接在火焰光度计上测定。在 系列钾标准溶液输人标定以后，可从仪器直接获得钾浓度的读数。 然后通过样品的检流计读数，在工作曲线上查得待测液的钾浓度。
[0101]
3.2土壤全氮、全磷、全钾含量的测定结果
[0102]
经过铁芒箕覆盖种植处理后的处理组a与空白组b的全氮、全 磷、全钾含量随时间变化的趋势相似，但因处理组与未处理组的处 理条件不同，其全氮、全磷、全钾的含量存在一定差异。处理组a 的全磷含量在生长前期显高于空白组b(p《0.05)；处理组a的全 氮含量在生长前期、中期、后期均显著低于空白组b，其中处理组 a和空白组b的全氮、全磷、全钾含量在生长周期中均在一定范围 内波动变化(图6)。土壤的全氮、磷、钾和有机碳含量能显著影 响土壤特性，对土壤质量、肥力起到重要作用，其次还对作物生长 发育起着重要作用。上述结果表明，在柚子生长期间，经铁芒箕覆 盖种植处理的柚树土壤的全氮、全磷含量得到显著的提升，而土壤 全钾的含量显著下降。按照国家土壤养分标准分级中属于中上水 平，因此钾含量的显著下降影响不大。而铁芒箕覆盖种植后土壤的 氮、磷含量提升通常伴随着总有机碳的增加，土壤的环境和养分也 因此得到提高，从而有利于果实产量、品质的提高。
[0103]
4.1土壤细菌丰富度的测定方法
[0104]
4.1.1土壤细菌16s的测定：对土壤样本的基因组dna进行提 取后，根据保守区设计得到引物，在引物末端加上测序接头进行 pcr扩增及产物纯化、定量、均一化形成测序文库，对建好的文库 进行质检并合格后用i11umina novaseq 6000进行高通量测序。随后 对以上样本得到的原始数据进行质量过滤、双端序列拼接、去除嵌 合体得到有效序列后，划分otus并对其进行多样性分析、差异分 析、相关性分析、功能预测分析。基因组dna的提取和pcr扩增 及后续测序委托百迈客云科技有限公司完成。
[0105]
4.1.2土壤真菌its的测定
[0106]
对土壤样本的基因组dna进行提取后，根据保守区设计得到 引物，在引物末端加上测序接头进行pcr扩增及产物纯化、定量、 均一化形成测序文库，对建好的文库进行质检并合格后用i11uminanovaseq 6000进行高通量测序。随后对以上样本得到的原始数据进 行质量过滤、双端序列拼接、去除嵌合体得到有效序列后，划分 otus并对其进行多样性分析、差异分析、相关性分析、功能预测 分析。基因组dna的提取和pcr扩增及后续测序委托百迈客云科 技有限公司完成。
[0107]
使用miccrosoft excel 2021软件、应用spss 25软件、rsstudio 软件、qiime2软件、origin2021软件对数据进行数据分析、绘图； 利用tq analyst软件对近红外采集数据进行处理建模。采用邓肯检 验、wilcoxon检验(mann-whitney检验)、kruskal-wallis检验、 spearman相关性检验比较不同处理间的差异性、相关性分析。使用 qiime 2分析微生物种群丰富度和多样性指数，其评价指标分别为 ace(ace丰富度估计量)、shannon(香农多样性指数)，并进行 beta多样性指数组间差异分析。微生物分析采用百迈客云平台进行 分析(www.biocloud.net)。
[0108]
4.2土壤细菌丰富度的测定结果
[0109]
由图7可知，处理组a和空白组b的样品测序文库的覆盖度均 达到99％以上，说明绝大部分微生物的序列可以被测出，有较好的 代表性。图7a、7b所示，处理组a的土壤细菌ace指数指数在整 个生长期间显著高于空白组b的指数(p《0.05)，而处理组a的真 菌ace指数与空白组b无明显差异(p》0.05)。这表明覆盖处理组 的土壤细菌丰富度得到了显著的提高，而真菌对此的影响不显著； 处理组a与空白组b的土壤细菌shannon指数生长中后期(60
～135 天)处理组a的细菌shannon指数显著高于空白组b(图7c)，而 处理组a的真菌shannon指数在第135天显著低于空白组b的指数 (p《0.01)，其余时间差异不显著(p》0.05)(图7d)。
[0110]
采用bray-curtis距离算法对属水平的处理组a和空白组b的微 生物群落进行nmds分析、upgma聚类分析、anosim检验将两 组之间物种的差异程度可视化。upgma聚类分析为样品层次聚 类，样品越靠近，枝长越短，说明两个样品的物种组成越相似。 nmds分析基于各类型样本相似性距离的降维，其中stress值小于 0.2表明分析具有可靠性。
[0111]
而在属水平上对土壤真菌进行多样性分析中发现，虽然在 nmds分析图中显示各阶段的处理组a和空白组b的同一样本重复 性一般，但对于同阶段的样本对比可得，覆盖柚子生长末期中同阶 段的处理组a与空白组b的土壤的真菌差异明显(图8b)。 anosim分析中表明组间差异显著大于组内差异(r＝0.863、 p＝0.001)(图8c)，同时upgma聚类树中也显示各阶段的处理 组a和空白组b的真菌分类明显(图8a)。
[0112]
表明铁芒箕覆盖种植后柚子树的土壤细菌丰富度和多样性有显 著性变化。同时，铁芒箕对土壤细菌的丰富度和多样性影响大于土 壤真菌。
[0113]
土壤的细菌、真菌是各种化学循环过程的主要驱动因子，研究 其结构的变化有助于理解和解释铁芒箕覆盖下柚树的环境变化。处 理组a和空白组b的细菌和真菌群落在门水平和属水平上的相对丰 度如图9所示。
[0114]
图9a中，土壤中细菌门以变形菌门(proteobacteria)、放线菌 门(actinobacteria)、酸杆菌门(acidobacteria)、拟杆菌门(bacteroidetes)、绿弯菌门(choroflexi)为优势种群，它们共享 超过80％的总序列。在真菌门群落组成中，占主导地位的真菌门是 子囊菌门(ascomycota)、担子菌门(basidiomycota)，约占总序 列的60％～95％(图9b)，其中，处理组a的担子菌门 (basidiomycota)的相对丰度显著增加。对于属水平的细菌群落则 以chujabacter、rhodanobacter、sphingomonas、bryobacter、 bradyrhizobium、acidothermus为优势菌群(uncultured除外)；而 真菌在属水平上的丰度对比中可以发现，香菇属(lepista)、青霉 菌(penicillium)、木霉属(trichoderma)、红菇属(russula)为 主要相对丰度的真菌，其中处理组a的香菇属(lepista)、青霉菌 (penicillium)相对丰度均有上升，同时处理组a的裸伞属 (gymnopilus)受到相对丰度下降。总体而言，铁芒箕覆盖处理的土壤 细菌群落和真菌群落在各阶段间有差异，改变了丰富细菌和真菌在 门水平和属水平上的相对丰度。
[0115]
以上的分析可以表明铁芒箕覆盖处理会对微生物的群落存在一 定影响。为进一步鉴定筛选微生物群落中覆盖前后具有显著差异的 标志微生物(biomarker)，通过进行lefse分析，对门、纲、目、 科、属的分类水平同时进行物种的统计检验和差异分析(lda》3、 p《0.05)。分支图中一共有54个细菌和35个真菌的进化分支图显 现出显著的差异(图10)。
[0116]
空白组b的样品中放线菌门(actinobacteria)中有6个细菌成 员成为丰度优势菌种(目-属)，其中还有一个放线菌门亲本——类 嗜热性菌群(thermoleophilia)的丰度具有显著优势。处理组a中 的发现拟杆菌门(bacteroidetes)中的有5个细菌成员呈现显著性丰 度优势的现象，同时变形菌门中的α-变形杆菌、δ-变形杆菌、黄 单胞科(xanthomonadaceae)、γ-proteobacteria(共13个菌群成 员)成为处理组a中的优势菌群。研究表明变形菌和拟杆菌中是一 类革兰氏阴性细菌，大部分为腐生好气菌。变形菌具有利
用各种底 物的能力，能促使土壤中的动物和植物遗骸腐烂；拟杆菌则被认为 是一种农业土壤利用的敏感生物指标，其丰度会在被侵蚀的土壤中 会显著减少，因此铁芒箕种植可使拟杆菌丰度显著增加则说明土壤 条件有所改善。其次，处理组a中存在酸杆菌亚门下的 blastocatellia_subgroup_4纲的丰度显著。
[0117]
酸杆菌则易受土壤水分的影响，与土壤水分呈正相关，而放线 菌与之相反，与水分呈负相关关系，为革兰氏阳性菌。
[0118]
真菌对铁芒箕覆盖的条件响应的数量少于细菌，丰度显著水平 的显现主要围绕处理组a与对照组b子囊菌和担子菌这两类菌群。 子囊菌门中的鞘翅目(lasiosphaeriaceae)、子囊菌目类 diaporthales的菌群和担子菌中的tricholomataceae、鳞毛蕨科 (omphalotaceae)、姬松茸科(agaricaceae)为处理组a的优势菌 群，同时处理组a的壶菌有显著增加。而子囊菌门中的多孢子虫 (pleosporales)、肾小球(glomerellales)、花蜜科 (nectriaceae)、双翅目(didymellaceae)和担子菌门中的果冻真 菌(tremellales)、粘液霉菌类(mortierellaceae)、三孢子虫(trechisporales)、三异形目动物科(trimorphomycetaceae)、马 拉斯米亚科(marasmiaceae)为空白组b的优势群落。这说明处理 组和空白组的子囊菌门和担子菌门中都存在真菌成员的差异变化。 有研究表明子囊菌产生的降解酶能够高效的利用资源能力，其在根 际土壤有机质降解中起到重要作用；而担子菌门中许多菌种与重金 属有良好的结合能力，对土壤修复起到一定修复作用，二者的存在 是健康土壤特性的指标。
[0119]
测试例2
[0120]
试验对象：
[0121]
在广东省梅州市梅县区松口镇寺坑村的一个柚子果园进行，地 区气候属于亚热带季风气候。该试验分为2个处理：(1)试验组 a，用实施例2种植得到的果实；(2)对比组b，用对照例2种植 得到的果实。每个处理组设置6个重复。
[0122]
5.1柚子果重、纵横径测定
[0123]
果实总重量使用电子天平直接称量读取测得；果实纵径、横径 使用游标卡尺测得。重复三次。
[0124]
5.2柚子果重、纵横径的测定结果
[0125]
果实成熟期间，试验组a、对比组b的鲜果期和贮藏期柚子的 重量、纵径、横径的对比图如图11，12所示。在鲜果期时期，覆盖 处理后的试验组a大部分较对比组b的柚子要重，试验组a的柚子 纵径数值或是横径数值均较对比组b柚子高(p《0.05)。试验组a 的柚子整体体积较对比组b的柚子体积有显著提升。
[0126]
柚子经过30天的贮藏期后，试验组a的柚子纵径变化不大 (p》0.05)，柚子横径稍有下降(p《0.05)；对比组b的柚子纵径 稍有上升，横径变化不大；试验组a的贮藏柚子的果形指数较鲜果 期的柚子大(p《0.05)，而对比组b的鲜果与贮藏果的果形指数没 有显著差异。这说明经贮藏一段时间后，试验组a的柚子可能存在 柚子皮囊失水变皱导致果囊宽度减小的情况，而对比组b的整体变 化不大。
[0127]
由上述分析可知，试验组a的柚子果实纵径、横径均有显著的 提升，经过一段时间的贮藏后，覆盖处理的柚子横径显著下降导致 其果形指数上升。
[0128]
测试例3
[0129]
按照实施例1-2和对比例1-2中的方法分别进行种植1000棵柚 子树，在种植30天后统计成活率，具体情况见表1。
[0130]
表1柚子树种植成活率统计表
[0131]
项目实施例1实施例2对比例1对比例2成活率98.3％98.8％97.9％82.6％
[0132]
由此得出，采用本发明的柚子树种植方法进行种植管理，柚子 树成活率均得到了提高。
[0133]
以上仅为本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不 能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本 领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以 做出若干变形和改进，这些均属于本发明的保护范围。
技术特征：1.一种可提升果实品质的柚子树种植方法，其特征在于，包括土壤处理、苗木选择、苗木定植、后期护理的步骤，其中苗木定植步骤中包括以下步骤：步骤s1：修剪根部：将柚子苗木的侧根进行分散式修剪，保留30-50条根粗在0.5-1厘米的侧根，将侧根的长度修剪为10-30厘米，保留的侧根匀称分布在主根周侧，断根部位涂布300-500ppm生根溶液；步骤s2：制备种植土坯底：用巨大芽孢杆菌菌粉、蛭石粉、种植土、腐殖酸盐缓释剂、铁芒箕枝叶、水按照重量比1-10：300-500：200-350:3-20:100-200：200-500混匀配成；步骤s3：包埋根部：将种植土坯底填充到育苗袋，将柚子苗木的根部种植到育苗袋内培植25-45天；步骤s4：防虫处理：定期在柚子苗木的叶子和茎部喷洒防虫剂，所述防虫剂包含以下重量份的成分：铁芒箕提取液20-40份，羧甲基纤维素钠5-12份，水杨酸甲酯10-20份；二甲基十八烷基氯化铵5-15份，水50-80份；步骤s5：苗木移植：将柚子苗木和种植土坯底从所述育苗袋中取出，将柚子苗木连同种植土坯底种植在定植孔中，回填种植土，在定植孔周围种植铁芒箕。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述土壤处理步骤包括：步骤1)选址：选择年雨量在1500-2400毫米的南亚热带和北亚热带过渡地带，气候以中亚热带气候为主，海拔在15-40米的岭地作为种植地；步骤2)整地：对土地进行除杂、松土、施肥、撒石灰，对土地进行整平、开沟、挖定植孔，相邻两定植孔之间的距离为1.5-2m。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤s1中，生根溶液由以下重量份组成：98％α-萘乙酸钠1-2份，羧甲基纤维素钠0.5-1份，水杨酸0.5-1份，其余为水。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤s2中，铁芒箕枝叶选用新鲜采摘下来并裁剪成3-5厘米长的铁芒箕。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤s2中，腐殖酸盐缓释剂由腐植酸、蔗糖、甲酸钙、白炭黑、三乙醇胺、石膏粉以重量比1-5：1-3：1-3：0.2-1:3-7混合造粒而成。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在所述步骤s2中，所述腐殖酸盐缓释剂的粒径为0.5-3厘米。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤s4中，喷洒防虫剂前对柚子苗木进行浇水，使土壤持水量60-80％，柚子苗木根部有积水，土壤中的水出现缓慢渗透现象；喷洒防虫剂喷洒后，三天内不对柚子苗木进行浇水。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤s4中，喷洒防虫剂的间隔周期在55-90天，喷施程度为枝叶、茎部均匀挂有雾状水滴。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤s5中，铁芒箕的种植间距不大于0.5米，铁芒箕与柚子苗木之间的种植间距为0.2-0.5米。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述后期护理步骤包括：步骤a1：修剪：每年2-3月，采摘分支上嫩芽；步骤a2：施肥：每年2-3月，沿树干周围开挖宽为30-40cm，深为50-60cm的环形沟，往环形沟内填充有机肥料，再进行覆盖，环形沟与柚子苗木之间的距离为0.5-0.8米；在每年5-6
月，喷施1％过磷酸钙溶液；在7-8月，每隔10天施加一次膨果肥；摘果后，再次开挖环形沟，填充过磷酸钙再进行覆盖。
技术总结本发明公开一种可提升果实品质的柚子树种植方法，需要先将柚子苗木的侧根进行分散式修剪，在断根部位涂布生根溶液，以促进萌发更多新根，可使果树后期长出的新根均匀分布在主根周侧，有利于柚子树根部汲取土壤的养分和水分，其中种植土坯底以蛭石粉、种植土为主要成分，透气性好，加入水后，粘性增大，孔隙率下降，具有良好的阳离子交换性和吸附性，蛭石粉还可向柚子苗木提供自身含有的K、Mg、Ca、Fe以及微量的Mn、Cu、Zn等元素，具有保水、储水和提供矿物肥料等多重作用，可以使得种植土坯底很好粘附柚子苗木的根部并为柚子苗木的根部提供水分，柚子苗木周围种植铁芒萁，有利于维持生态平衡，铁芒箕在对可降低土壤温度、增加土壤含水量。水量。水量。
技术研发人员：刘袆帆 利新红 谢秀娟 钟永辉 陈绮媚
受保护的技术使用者：梅州市梅县区农业科学研究所
技术研发日：2022.04.06
技术公布日：2022/7/4
