本发明涉及一种与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna及其应用，属于生物技术和分子检测。
背景技术：
1、胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，由于胃癌在诊断时通常处于晚期，死亡率很高。幽门螺杆菌感染、饮酒、吸烟、高盐摄入量以及水果和蔬菜摄入量低等都是胃癌发病的高危因素。尽管临床诊疗技术迅猛发展，但胃癌早期诊断率和5年生存率仍处于较低水平。n-亚硝基化合物是一种强致癌剂，来源广泛，与多种肿瘤发生有关。在我国，人们经常暴露于n-亚硝基化合物饮食环境中，腌制食品、加工肉制品和高盐饮食均可增加胃癌发病风险，n-亚硝基化合物的致癌性已经成为全球性的健康问题。目前，胃癌诊断的金标准是病理活检，但该方法侵入性大，液体活检近年来在胃癌等肿瘤诊疗中备受关注。然而目前临床上常用的血清学肿瘤生物标志物的敏感性和特异性均不高，用于诊断胃癌特别是亚硝酸盐暴露胃癌仍有一定的局限性。因此，亟需探寻胃癌特别是亚硝酸盐暴露相关胃癌进展中的关键分子，开发一种微创或者无创、灵敏且特异的诊断方法，同时作为胃癌治疗的新靶点对其进行有效干预，为广大胃癌患者和社会减轻负担。
2、1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(n-methyl-n’-nitro-n-nitrosoguallidine,mnng)是研究n-亚硝基化合物致癌机制常用的模式化合物。研究发现长期mnng暴露可增强人正常胃黏膜上皮细胞(ges-1细胞)增殖、迁移及致瘤性，而外泌体(exosomes)在其中发挥重要作用。环状rna(circrna))是一种真核生物中具有共价闭合环状结构的生物小分子，能够耐受rna外切酶影响，因此不易降解且表达稳定。circrna在生物学功能上可以作为mirna的海绵、调控蛋白结合、翻译蛋白质、调控基因转录等，exosomes可转运circrna，与胃癌等肿瘤的发生与发展密切相关。exosomes转运的circrna有望作为胃癌非侵入性液体活检生物标志物与治疗靶点，具有优良的应用前景。
3、随着高通量测序的不断发展，越来越多的circrna进入受到关注。尽管已有较多的研究发现circrna在胃癌的发生发展中发挥着重要作用，可能作为候选的诊断或者治疗靶点，但是仍有大量circrna尚处于未知阶段，尤其需要去发掘胃癌尤其是亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna分子，为亚硝酸盐暴露相关胃癌的诊断与治疗提供新策略。
技术实现思路
1、本发明针对现有技术的一些不足，提供了一种与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna及其应用。本发明提供的与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna为外泌体携载的circrna，在亚硝酸盐暴露相关胃癌患者血清外泌体中呈现显著高表达，可以作为亚硝酸盐暴露相关胃癌诊断和/或治疗的生物标志物，为亚硝酸盐暴露相关胃癌的诊断提供新依据；另外，抑制所述circrna的表达能够显著抑制恶性转化细胞的增殖、干性、迁移和侵袭能力，有望作为胃癌治疗的新靶标。
2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、本发明首先提供了一种与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna，所述circrna为hsa_circ_0000549，其核苷酸序列如seq id no：1所示。
4、本发明还提供所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna在作为生物标志物在制备诊断和/或治疗亚硝酸盐暴露相关胃癌产品中的应用。
5、本发明还提供一种检测所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna的引物，所述引物的核苷酸序列如seq id no：2和seq id no：3所示。
6、本发明还提供所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna、或所述检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna的引物在制备诊断和/或治疗亚硝酸盐暴露相关胃癌的产品中的应用，所述产品包括检测试剂、试剂盒或药物。
7、本发明还提供检测所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌的试剂；所述试剂包括所述检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna的引物。
8、本发明还提供所述检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna的引物、或所述检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌的试剂在制备检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌的试剂盒中的应用。
9、本发明还提供检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌的试剂盒，所述试剂盒包括所述检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna的引物、或所述检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌的试剂。
10、本发明还提供所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna的抑制剂，所述抑制剂为抑制所述circrna表达的sirna，所述sirna的正义链核苷酸序列如seq id no：6所示，反义链核苷酸序列如seq id no：7所示。
11、本发明还提供所述抑制剂在制备治疗亚硝酸盐暴露相关胃癌药物中的应用。
12、本发明还提供一种用于治疗亚硝酸盐暴露相关胃癌的药物，所述药物包括所述抑制剂。
13、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
14、(1)本发明首次提供了与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna，所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna在亚硝酸盐暴露相关胃癌患者血清外泌体中呈现显著高表达，其核苷酸序列如seq id no：1所示。
15、(2)本发明基于血清来源的外泌体(exosomes)的circrna芯片测序，筛选发现hsa_circ_0000549(circsrsf5)在亚硝酸盐暴露相关胃癌患者血清exosomes、健康人血清exosomes中存在显著性差异(hsa_circ_0000549在亚硝酸盐暴露相关胃癌患者血清exosomes中的表达量高于健康人血清exosomes中的表达量)，有望作为亚硝酸盐暴露相关胃癌潜在的非侵入性生物标志物。
16、(3)通过功能学实验，本发明还发现敲减hsa_circ_0000549能够显著抑制mnng诱导恶性转化细胞的增殖、干性、迁移和侵袭能力，过表达hsa_circ_0000549能够显著促进mnng诱导恶性转化细胞的增殖、干性、迁移和侵袭能力，exosomes转运的hsa_circ_0000549(circsrsf5)有望成为亚硝酸盐暴露相关胃癌治疗的潜在靶标，为胃癌治疗提供新思路。
1.与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna，其特征在于，所述circrna为hsa_circ_0000549，其核苷酸序列如seq id no：1所示。
2.权利要求1所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna作为生物标志物在获取诊断和/或治疗亚硝酸盐暴露相关胃癌信息中的应用。
3.用于检测权利要求1所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna的引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如seq id no：2和seq id no：3所示。
4.权利要求1所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna、或权利要求3所述引物在制备诊断和/或治疗胃癌的产品中的应用，所述产品包括检测试剂、试剂盒或药物。
5.检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌的试剂，其特征在于，所述试剂包括权利要求4所述的引物。
6.权利要求3所述的引物、或权利要求5所述试剂在制备检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌的试剂盒中的应用。
7.检测与亚硝酸盐暴露相关胃癌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求3所述引物、或权利要求5所述试剂。
8.权利要求1所述与亚硝酸盐暴露相关胃癌相关的circrna的抑制剂，其特征在于，所述抑制剂为抑制所述circrna表达的sirna，所述sirna的正义链核苷酸序列如seq id no：6所示，反义链核苷酸序列如seq id no：7所示。
9.权利要求8所述的抑制剂在制备治疗亚硝酸盐暴露相关胃癌药物中的应用。
10.一种用于治疗亚硝酸盐暴露相关胃癌的药物，其特征在于，所述药物包括权利要求8所述的抑制剂。
