本发明申请涉及生物免疫，具体涉及hpv56亚型l1蛋白、其表位肽、单克隆抗体、杂交瘤细胞及其应用。
背景技术：
1、人乳头瘤病毒（human papilloma virus, hpv）是一种双链、无包膜且高度保守的环状的小型dna肿瘤病毒，属于乳头空泡病毒科（papovaviridae）乳头瘤病毒属，hpv基因组全长约为8000 bp，分子量约为5000 kda，直径约为55 nm， hpv基因组分为三个区域，含有8个开放阅读框（open reading fragment, orf）。早期表达区（early expression region,e）、晚期表达区（late expression region, l）和非转录区（longcontrol region, lcr）共同构成hpv的基因组。目前，已经分离鉴定出200多种hpv亚型。通过基因测序与序列比对，hpv不同亚型的l1基因序列差异超过10%，而同型hpv亚型的l1序列差异低于2%。根据hpv致癌性的差异，可分为三类：低危型（low-risk human papillomavirus, lr-hpv）、高危型（high-risk humanpapillomavirus, hr-hpv）和可疑高危型。hpv病毒主要通过性传播的方式感染人体，侵害人体的粘膜和上皮组织，是大多数宫颈癌的病因，持续性的感染高危型hpv会导致宫颈癌的出现，宫颈癌是全球女性高发的恶性肿瘤，发病率和死亡率都很高。
2、hpv56病毒在中国地区的感染率居高不下，目前市面上还没有针对hpv56亚型的商品化疫苗，因此开发一种针对hpv56病毒的蛋白抗原表位及抗体显得尤为重要。
3、公开于该背景技术部分的信息仅用于加深对本公开的背景技术的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成本领域技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
1、鉴于以上技术问题中的至少一项，本公开提供了一种hpv56亚型l1蛋白、其表位肽、单克隆抗体、杂交瘤细胞及其应用，旨在解决目前市面上缺少针对hpv56亚型的商品化疫苗的技术问题。
2、本申请公开的第一方面，提供一种hpv56亚型l1蛋白的单克隆抗体，其重链可变区包括cdr h1、cdr h2、cdr h3，其氨基酸序列分别如seqid no.3、seq id no.4、seq id no.5所示，其轻链可变区包括cdr l1、cdr l2、cdrl3，其氨基酸序列分别如seq id no.6、seq idno.7、 seq id no.8所示。
3、本申请公开的第二方面，提供一种编码所述单克隆抗体的基因，其重链可变区dna序列如seq id no.9所示，轻链可变区dna序列如seq id no.10所示。
4、本申请公开的第三方面，将所述单克隆抗体或所述基因应用在制备检测hpv56亚型病毒的试剂中。
5、本申请公开的第四方面，提供一种所述单克隆抗体特异性识别的抗原表位肽，其为hpv56亚型l1蛋白2～13肽段，其氨基酸序列如seq id no.11所示。
6、本申请公开的第五方面，提供一种杂交瘤细胞，其分泌的单克隆抗体能特异性结合上述抗原表位肽。
7、本申请公开的第六方面，将所述单克隆抗体、所述抗原表位肽或所述杂交瘤细胞应用在制备免疫学检测的试剂中。
8、本申请公开的第七方面，提供一种hpv56亚型l1蛋白，其氨基酸序列如seq idno.1所示。
9、本申请公开的第八方面，提供一种hpv56亚型l1蛋白的编码基因，其dna序列如seqid no.2所示。
10、本申请公开的第九方面，将所述抗原表位肽、所述杂交瘤细胞、所述hpv56亚型l1蛋白或其编码基因应用在制备抗hpv56病毒的抗体或疫苗中。
11、本申请实施例中提供的一个或多个技术方案，至少具有如下任一技术效果或优点：
12、1. 本申请通过构建hpv56 l1的原核表达载体pe-sumo-hpv 56-l1，诱导表达hpv56亚型l1蛋白，以重组hpv56亚型l1蛋白作为免疫原免疫小鼠，通过细胞融合技术与elisa鉴定，筛选得到杂交瘤细胞株，该细胞株产生的单克隆抗体可特异性识别并结合l1蛋白的2atwrpsenkvyl13区域。
13、2. 本申请筛选得到的杂交瘤细胞具有稳定的抗体分泌能力，其分泌的单克隆抗体能快速特异的识别hpv56及其l1蛋白，为hpv56及其l1蛋白快速检测技术的发展奠定基础，在hpv56亚型l1蛋白相关的免疫检测中具有广泛的研究应用价值和商业使用价值，对基于hpv 56 l1蛋白的疫苗研制具有重要指导意义。
14、3. 本申请所公开的单克隆抗体的重链可变区序列和轻链可变区序列的基础上，可以通过常规基因工程和蛋白质工程进行一个或多个氨基酸的添加、删除、替换等修饰，获得其活性片段或保守性变异体，但仍能够与hpv56亚型l1蛋白特异性结合，为进一步改造其抗体可变区序列制备不同组合形式的基因工程抗体打下基础，以进一步提升抗体的特异性。
1.一种hpv56亚型l1蛋白的单克隆抗体，其特征在于，其重链可变区包括cdr h1、cdrh2、cdr h3，其氨基酸序列分别如seq id no.3、seq id no.4、seq id no.5所示，其轻链可变区包括cdr l1、cdr l2、cdr l3，其氨基酸序列分别如seq id no.6、seq id no.7、 seqid no.8所示。
2.编码权利要求1所述单克隆抗体的基因，其特征在于，单克隆抗体的重链可变区dna序列如seq id no.9所示，轻链可变区dna序列如seq id no.10所示。
3.权利要求1所述单克隆抗体或权利要求2所述基因在制备检测hpv56病毒的试剂中的应用。
4.一种权利要求1所述单克隆抗体特异性识别的抗原表位肽，其特征在于，其为hpv56亚型l1蛋白2～13肽段，其氨基酸序列如seq id no .11所示。
5.一种杂交瘤细胞，其分泌的单克隆抗体能特异性结合权利要求4所述抗原表位肽。
6.权利要求1所述单克隆抗体、权利要求4所述抗原表位肽或权利要求5所述杂交瘤细胞在制备免疫学检测试剂中的应用。
7.一种hpv56亚型l1蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如seq id no.1所示。
8.编码权利要求7所述蛋白的基因，其特征在于，所述蛋白的编码基因序列如seq idno.2所示。
9.权利要求4所述抗原表位肽、权利要求5所述杂交瘤细胞、权利要求7所述蛋白或权利要求8所述基因在制备抗hpv56病毒的抗体或疫苗中的应用。
