本发明涉及医学检验，尤其涉及一种ckmm抗体特殊处理及在肌酸激酶同工酶测定试剂的应用。
背景技术：
1、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme，ck)是一类重要的酶，在维持细胞内能量代谢平衡方面发挥着重要作用。肌酸激酶同工酶是二聚体酶，其结构由肌型亚单位(m)和脑型亚单位(b)两个亚基组成，根据其亚基组成不同，可分为ckmm、ckmb、ckbb和线粒体ck(mtck)四种同工酶形式。ckmm主要存在于骨骼肌和心肌中，ckbb存在于脑组织和神经元中，线粒体ck主要分布于心肌、平滑肌和神经组织等高能耗组织中的线粒体内，ckmb主要存在于心肌中，一旦心肌细胞受到损伤，ckmb会快速释放到血液中，导致其在血清中的浓度升高。ckmb的升高通常在心肌梗死发作后数小时内就会出现，因此可以用于早期诊断。在心肌梗死发作后的36小时内，ckmb的峰值通常出现，随后逐渐恢复到正常水平。在其他情况下，如心肌炎或心肌肥大，ckmb的升高相对较少，因此可以通过ckmb和其他心肌损伤指标的综合分析来明确诊断。另外ckmb的浓度变化可以用于监测心肌梗死患者的疗效。治疗有效时，ckmb的浓度会逐渐下降；反之，如果治疗无效或心肌损伤继续恶化，ckmb的浓度可能继续升高。
2、目前临床上针对血清中ckmb水平检测的试剂盒，有免疫抑制法、胶乳增强免疫比浊法、荧光层析法、免疫发光法等。目前临床上最普遍采用免疫抑制法，可能是血清中存在巨ck、ck-bb、ak等影响试剂单克隆抗体与肌酸激酶中的m亚基结合，存在未被抑制的ck-m，m亚基同时与b亚基参加酶反应，而且因计算时结果乘以2，更加扩大了误差。常规的试剂检测时经常因为样本中存在的丙酮酸、肝素等干扰物，影响检测结果的准确性，同时试剂中抗ck-m抗体在试剂中不稳定，造成试剂稳定性较差，进而影响了试剂在市场上的应用。
3、在体外诊断试剂中，试剂的稳定性与抗干扰能力都是必不可少的，如在公布号cn103278623a一种肌酸激酶同功酶纳米磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒及其制备方法提到，试剂可在37℃条件下放置7天仍保持活性不变，并且其对于ck-mm与ck-bb的特异性交叉反应有较好的抗干扰能力，试剂性能优越。但当前的临床背景下，试剂盒所需抗干扰能力应该更强，如患者体内存在的类风湿因子(rf)和人抗鼠抗体(hamas)均会对检测结果产生影响，而且单一的37℃条件稳定性并不能适用于日常临床诊断。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种ckmm抗体特殊处理及在肌酸激酶同工酶测定试剂的应用，解决了现有的肌酸激酶同功酶纳米磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒抗干扰能力不强，且单一的37℃条件稳定性并不能适用于日常临床诊断的问题。
2、为实现上述目的，本发明提供了一种ckmm抗体特殊处理，包括预处理液配制和酶处理两个部分，其中，酶处理包括以下步骤：
3、将ckmm抗体溶解于pbs溶液中，获得浓度为0.5～2mg/ml的ckmm抗体溶液；
4、将ckmm抗体溶液中加入辣根过氧化物酶，混匀后加入戊二醛；
5、反应完全后通过透析除去未反应的戊二醛，获得抗ckmm抗体-辣根过氧化物酶标记物。
6、其中，预处理液配制包括以下步骤：
7、在混合容器中加入设定量的纯化水；
8、再分别准确称取并依次加入缓冲液、proclin300、牛血清白蛋白、小鼠igg、mgcl2和znc12，且依次搅拌溶解；
9、完全溶解后继续搅拌设定时间，用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节至ph6.4～6.6，获得预处理液。
10、其中，辣根过氧化物酶与抗ckmm抗体的质量比为8～12：1，戊二醛的终浓度为0.1～0.4％。
11、其中，在混合容器中加入设定量的纯化水，所述步骤还包括：
12、在混合容器中加入占配制所需总量约80％的纯化水。
13、其中，完全溶解后继续搅拌设定时间，用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节至ph6.4～6.6，获得预处理液，所述步骤还包括：
14、用6mol/l盐酸溶液或10mol/l氢氧化钠溶液调节至ph6.4～6.6。
15、一种ckmm抗体特殊处理在肌酸激酶同工酶测定试剂的应用，采用所述的ckmm抗体特殊处理制备而成的抗ckmm抗体-辣根过氧化物酶标记物配制肌酸激酶同工酶测定试剂。
16、本发明的一种ckmm抗体特殊处理及在肌酸激酶同工酶测定试剂的应用，首先配制预处理液，当进行酶处理时，使用预处理液作为反应环境，将ckmm抗体溶解于pbs溶液中，获得浓度为0.5～2mg/ml的ckmm抗体溶液；将ckmm抗体溶液中加入辣根过氧化物酶，混匀后加入戊二醛；反应完全后通过透析除去未反应的戊二醛，获得抗ckmm抗体-辣根过氧化物酶标记物。将抗ckmm抗体-辣根过氧化物酶标记物应用制备成肌酸激酶同工酶测定试剂盒，通过改良酶标抗体缓冲液，进而改良了肌酸激酶同工酶测定试剂盒的试剂rl的配方，从而达到同时提高稳定性和抗干扰的能力；最终制备得到的肌酸激酶同工酶测定试剂盒，稳定性好：通过37℃热稳定性实验14天及常温储存12个月依然生物活性良好；在抗干扰方面，非离子表面活性剂对于非特异性吸附有着较好的抵抗效果。
1.一种ckmm抗体特殊处理，其特征在于，包括预处理液配制和酶处理两个部分，其中，酶处理包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的ckmm抗体特殊处理，其特征在于，预处理液配制包括以下步骤：
3.如权利要求1所述的ckmm抗体特殊处理，其特征在于，
4.如权利要求2所述的ckmm抗体特殊处理，其特征在于，在混合容器中加入设定量的纯化水，所述步骤还包括：
5.如权利要求4所述的ckmm抗体特殊处理，其特征在于，完全溶解后继续搅拌设定时间，用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节至ph6.4～6.6，获得预处理液，所述步骤还包括：
6.一种ckmm抗体特殊处理在肌酸激酶同工酶测定试剂的应用，采用如权利要求1所述的ckmm抗体特殊处理制备而成的抗ckmm抗体-辣根过氧化物酶标记物配制肌酸激酶同工酶测定试剂。
