本公开属于生物发酵，具体涉及新真菌菌株蝉花ch2347、蝉花菌发酵物及其制备方法、化妆品、蝉花菌菌丝体提取物及纯化多糖。
背景技术：
1、蝉花(cordyceps cicadae)是一种虫草真菌，属于麦角菌科(clavicepitaceae)虫草属(cordyceps)，寄生于蝉若虫可形成蝉花，含有核苷、多糖、蛋白、透明质酸、虫草酸等多种活性成分，具备抗肿瘤、抗炎镇痛、改善肾功能、降血糖、降血压等多种药理作用。
2、但是，关于蝉花提取物应用于化妆品方面的报道较少。发明人采集筛选出一种新真菌菌株蝉花ch2347，经过大量研究发现将蝉花与土豆乳糖培养基发酵所得发酵物具有优良的皮肤抗炎修复作用，可作为功效成分用于化妆品。
技术实现思路
1、在下文中给出了关于本公开的简要概述，以便提供关于本公开的某些方面的基本理解。应当理解，这个概述并不是关于本公开的穷举性概述。它并不意图确定本公开的关键或重要部分，也不意图限定本公开的范围。其目的仅仅是以简化的形式给出某些概念，以此作为稍后论述的更详细描述的前序。
2、为解决上述技术问题，本公开提供的技术方案是：
3、第一方面，本发明提供一种新真菌菌株，为蝉花(cordyceps cicadae)ch2347，保藏编号为cgmcc no.40399。本发明的新真菌菌株蝉花ch2347由本技术人从重庆市武隆区双河乡(东经107°14'～108°05'，北纬29°02'～29°40')采集野生蝉花。挑取子座芽，加入到45ml无菌生理盐水中，振荡30min。梯度稀释，从各稀释液中吸取0.1ml到筛选平板并涂布，置于25℃恒温培养箱中培养3～5d。挑选单个典型的菌落培养获得。
4、第二方面，本公开提供一种蝉花菌发酵物的制备方法，包括：
5、步骤一，将蝉花ch2347经活化、纯化、扩大培养处理所得种子液；
6、步骤二，将所述种子液接种至发酵底物进行发酵培养处理；所述发酵底物为新鲜土豆与水经匀浆机匀浆溶解而成，其中土豆添加量为1-5wt％(比如1.2wt％、1.5wt％、2.0wt％、2.5wt％、3wt％、3.5wt％、4wt％、4.5wt％等)；
7、步骤三，对步骤二所得发酵产物进行灭菌处理、分离处理、得到蝉花菌发酵物，包括上清液和菌丝体。
8、进一步地，上述蝉花菌发酵物的制备方法中，所述发酵底物中还包括添加剂，所述添加剂选自蔗糖、乳糖、葡萄糖中的至少一种，添加量为0.1～5％(比如0.5wt％、1.0wt％、1.5wt％、2.0wt％、2.5wt％、3wt％、3.5wt％、4wt％、4.5wt％等)；优选地，所述发酵底物中土豆添加量为2wt％，乳糖添加量为2wt％；优选地，所述发酵底物中土豆添加量为2wt％，蔗糖添加量为2wt％。
9、所述发酵底物在接种前需经常规灭菌处理，比如在121℃下高温灭菌15min～20min(比如16min、17min、18r/min、19r/min等)。
10、进一步地，上述蝉花菌发酵物的制备方法中，所述种子液中菌丝体积百分比为80％以上(比如82％、85％、88％、90％等)；所述种子液的接种比例，即所述种子液与发酵底物为(体积质量比ml/g)1％-15％(比如1.5％、2％、3％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、9％、10％、12％等)；优选为3-10％。
11、进一步地，上述蝉花菌发酵物的制备方法中，所述发酵培养处理的温度为25-32℃(比如26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃等)，时间为3-7天(d)(比如3.5d、4d、4.5d、5d、5.5d、6d、6.5d等)；优选地，所述发酵培养处理的温度为28℃，时间为6天。
12、更进一步地，所述发酵培养处理在摇床中进行，摇床中转速为150r/min-280r/min(比如160r/min、180r/min、200r/min、220r/min、240r/min、260r/min等)；优选为250r/min。
13、进一步地，上述蝉花菌发酵物的制备方法中，步骤二中在进行第一次发酵培养处理之后，再经匀浆、灭菌处理后，第二次接种所述种子液，进行第二次发酵培养处理；优选地，第一次发酵培养处理中的所述发酵底物中土豆添加量为2wt％，蔗糖添加量为2wt％，第一次、第二次发酵培养处理中接种量为6-7％，温度为28℃，时间为3天，摇床中转速为180r/min。
14、第二方面，本公开提供一种由上述制备方法制得的蝉花菌发酵物。上述蝉花菌发酵物包括蝉花菌发酵液及其干粉，蝉花菌菌丝体及其干粉；干粉可以采用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得。
15、第三方面，本公开还提供一种含有上述蝉花菌发酵物的化妆品，所述化妆品为所述蝉花菌发酵液中添加1％的防腐剂配制而成。优选地，所述防腐剂为质量比1：1的馨鲜酮和己二醇。
16、第四方面，本公开提供一种蝉花菌菌丝体提取物，是从蝉花ch2347接种至发酵底物进行发酵培养所得的菌丝体中提取所得；所述发酵底物为新鲜土豆与水经匀浆机匀浆溶解而成，其中土豆添加量为2wt％，乳糖添加量为2wt％；所述提取方法选自如下任一种：(1)将所述菌丝体(湿物质)先热水浸提处理，然后进行醇沉处理，离心取沉淀冻干，得到粗多糖；(2)将所述菌丝体(湿物质)用胰蛋白酶或胃蛋白酶进行酶解处理，离心，冻干，得到多肽类提取物；(3)将所述菌丝体的冻干粉，在90℃温度下无水乙醇回流2h进行提取，离心，冻干，得到醇提物。
17、上述蝉花菌菌丝体提取物中，作为一种优选实施方式，所述提取方法为第(1)种，其中，所述热水浸提处理温度为90℃、时间为4h，所述醇沉处理使用无水乙醇，料液比为1:10。
18、第五方面，本公开提供一种纯化蝉花菌多糖，通过对上述粗多糖依次经sevage法除蛋白处理，ab-8大孔吸附树脂除杂处理，deae-52纤维素柱层析纯化处理而制得。
19、优选地，所述sevage法除蛋白处理中，重复sevage法除蛋白处理1-5次，然后再采用酒精沉淀法收集沉淀物，复溶于超纯水中，以10kda mw截断量透析48h，然后冷冻干燥。
20、所述优选地，所述deae-52纤维素柱层析纯化处理中，分别以浓度0.3mol/l或0.5mol/l nacl溶液进行洗脱处理，就对应的两个洗脱峰对应的两个组分分别进行旋蒸，透析，冻干，分别得到纯化多糖pmps-a1，pmps-a2。
21、相比于现有技术，本公开的有益效果包括但不限于：
22、1、本发明新筛选得到的真菌菌株蝉花ch2347，其发酵液具有优良肤感和舒缓性能，其菌丝体多糖具有良好的抗炎、修复功效，可用于化妆品。
23、2、本公开提供的制备方法，通过将蝉花菌接种于2％土豆+2％乳糖的培养基进行发酵培养，得到了菌丝体并进一步以该菌丝体为研究对象，获得六种发酵活性物，通过在炎症指标分泌和屏障相关蛋白指标的比较中，筛选获得一种具有较好功能的多糖活性物(即粗多糖pmps-a)；对该活性物进一步分级分离和结构分析，获得了两种组分(即纯化多糖pmps-a1，pmps-a2)，两种组分对细胞没有刺激性，较安全，而且具有较好的修复细胞划痕的作用，具有较好的改善uvb导致的线粒体膜电位损伤，其中pmps-a1具有更好的修复作用；
24、3、本公开提供的蝉花菌丝体提取物作为化妆品功效成分具有功效性强、成本低、操作简单、绿色安全等特征，具有较强的实用性和推广价值。
25、本公开的蝉花(cordyceps cicadae)ch2347，保藏日期为2023年04月10日，保藏编号为cgmcc no.40399，分类命名为：蝉花(cordyceps cicadae)ch2347，又称蝉花ch2347，保藏单位名称为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称cgmcc)，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编为100101。
1.一种新真菌菌株，为蝉花(cordyceps cicadae)ch2347，保藏编号为cgmccno.40399。
2.一种蝉花菌发酵物的制备方法，其特征在于，包括：
3.根据权利要求2所述的蝉花菌发酵物的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述发酵底物中还包括添加剂，所述添加剂选自蔗糖、乳糖、葡萄糖中的至少一种，添加量为0.1～5％；优选地，所述发酵底物中土豆添加量为2wt％，乳糖添加量为2wt％；优选地，所述发酵底物中土豆添加量为2wt％，蔗糖添加量为2wt％。
4.根据权利要求2或3所述的蝉花菌发酵物的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述种子液中菌丝体积百分比为80％以上；所述种子液与发酵底物的体积质量比1％-15％ml/g；优选为3-10％；更优选为5％。
5.根据权利要求2-4中任一项所述的蝉花菌发酵物的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述发酵培养处理的温度为25-32℃，时间为3-7天；优选地，所述发酵培养处理的温度为28℃，时间为6天；
6.根据权利要求2-5中任一项所述的蝉花菌发酵物的制备方法，其特征在于，步骤二中在进行第一次发酵培养处理之后，再经匀浆、灭菌处理后，第二次接种所述种子液，进行第二次发酵培养处理；优选地，第一次发酵培养处理中的所述发酵底物中土豆添加量为2wt％，蔗糖添加量为2wt％，第一次、第二次发酵培养处理中接种量为6-7％，温度为28℃，时间为3天，摇床中转速为180r/min。
7.一种由如权利要求2-6中任一项所述的制备方法制得的蝉花菌发酵物，其存在形式包括蝉花菌发酵液及其干粉，蝉花菌菌丝体及其干粉。
8.一种含有如权利要求7所述的蝉花菌发酵物的化妆品，其特征在于，所述化妆品为所述蝉花菌发酵液中添加1％的防腐剂配制而成；优选地，所述防腐剂为质量比1：1的馨鲜酮和己二醇。
9.一种蝉花菌菌丝体提取物，其特征在于，是从如权利要求1所述的蝉花ch2347接种至发酵底物进行发酵培养所得的菌丝体中提取所得；所述发酵底物为新鲜土豆与水经匀浆溶解而成，其中土豆添加量为2wt％，乳糖添加量为2wt％；所述提取方法选自如下任一种：(1)将所述菌丝体(湿物质)先热水浸提处理，然后进行醇沉处理，离心取沉淀冻干，得到粗多糖；(2)将所述菌丝体(湿物质)用胰蛋白酶或胃蛋白酶进行酶解处理，离心，冻干，得到多肽类提取物；(3)将所述菌丝体的冻干粉，在90℃温度下无水乙醇回流2h进行提取，离心，冻干，得到醇提物；
10.一种纯化蝉花菌多糖，其特征在于，通过对如权利要求9所述的粗多糖依次经sevage法除蛋白处理，ab-8大孔吸附树脂除杂处理，deae-52纤维素柱层析纯化处理而制得；
