本发明涉及禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽及其应用，属于分子生物学领域。
背景技术：
1、肝炎-心包积液综合征(hhs)主要是由禽腺病毒fadv-4感染所致，于1987年首次在巴基斯坦安卡拉暴发，又称“安卡拉病”。禽腺病毒直径大小为70～90nm，是一种无囊膜的双链dna病毒。病毒粒子呈正二十面体结构，由衣壳、核酸芯髓、纤突及相关蛋白组成。纤突(fiber)以penton为基座共价连接延伸于病毒粒子表面，是与宿主表面受体结合的重要蛋白。禽腺病毒fadv-1、fadv-4及fadv-10均含有两种纤突蛋白(fiber1和fiber2)，其他血清型仅含有一种纤突蛋白。
2、禽腺病毒的病鸡主要表现为精神沉郁、嗜睡、食欲衰退、伏卧不起、羽毛蓬松凌乱、排绿色稀粪等症状，后期急性死亡，死亡率高达80％。解剖后可见肝脏明显肿大，颜色为黄色并伴有明显出血点，肾脏肿大坏死，心包膜内有明显黄色积液。2015年中旬，由fadv-4引起的hhs疫情给我国养殖业造成了巨大经济损失。
3、ⅰ群禽腺病毒共有12个血清型，fadv-4是目前我国流行的主要毒株，且没有有效的疫苗和药物，因此，有关fadv-4及其蛋白的相关研究成为许多科研工作者的主要研究对象。纤突蛋白fiber1不仅能够产生有效的免疫保护，而且是病毒感染细胞的受体结合蛋白，针对fiber1蛋白的单克隆抗体的筛选以及抗原表位的鉴定将有助于fadv-4疫苗及诊断试剂的研发。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本发明的目的是提供三种禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽及其应用。
2、本发明还提供了能特异性识别所述的b细胞表位序列肽的3株单克隆抗体5c10、6f8和8e8。
3、为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
4、一种禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽，所述b细胞表位肽的氨基酸序列为seqid no.1：sdvgylglpph；所述b细胞表位肽的一种特异性识别单克隆抗体为5c10。
5、一种禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽，所述b细胞表位肽的氨基酸序列为seqid no.2：phtrdnwyv；所述b细胞表位肽的一种特异性识别单克隆抗体为6f8。
6、一种禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽，所述b细胞表位肽的氨基酸序列为seqid no.3：vttgpipfsyq；所述b细胞表位肽的一种特异性识别单克隆抗体为8e8。
7、本发明还提供了所述的三种禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽在制备fadv-4诊断试剂或药物中的应用；以及所述的三种禽腺病毒蛋白fiber1的单克隆抗体在制备fadv-4诊断试剂中的应用。
8、本发明的有益效果：
9、(1)本发明综合利用分子生物学和细胞生物学技术，首次鉴定了fiber1蛋白knob结构域上的b细胞表位肽。在大肠杆菌表达系统中成功表达并纯化了fiber1 knob(f1k)蛋白，利用杂交瘤技术筛选出3株单克隆抗体，并对单克隆抗体的可变区序列进行测序分析。随后合成了重叠覆盖fiber1 knob区的26条多肽，通过elisa和dot-blot实验成功鉴定了3个b细胞表位，并对所鉴定表位的关键氨基酸位点进行了测定。
10、(2)本发明的3株单克隆抗体分别为5c10、6f8、8e8，其中单抗5c10，与b细胞表位319sdvgylglpph329(seq id no.1)发生特异性反应；单抗6f8与b细胞表位328phtrdnwyv336(seq id no.2)发生特异性反应；单抗8e8与b细胞表位407vttgpipfsyq417(seq id no.3)发生特异性反应。
11、(3)本发明鉴定的b细胞表位丰富了禽腺病毒蛋白fiber1的免疫学功能，鉴定的表位为后续抗病毒药物、以及疫苗和检测产品研发奠定了坚实基础。
1.一种禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽，其特征在于，所述b细胞表位肽的氨基酸序列为：sdvgylglpph。
2.一种单克隆抗体5c10，其特征在于，特异性识别含有权利要求1所述的b细胞表位肽或蛋白。
3.一种禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽，其特征在于，所述b细胞表位肽的氨基酸序列为：phtrdnwyv。
4.一种单克隆抗体6f8，其特征在于，特异性识别含有权利要求3所述的b细胞表位肽或蛋白。
5.一种禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽，其特征在于，所述b细胞表位肽的氨基酸序列为：vttgpipfsyq。
6.一种单克隆抗体8e8，其特征在于，特异性识别含有权利要求5所述的b细胞表位肽或蛋白。
7.一种权利要求1、3或5所述的禽腺病毒蛋白fiber1的b细胞表位肽在制备fadv-4诊断试剂或药物中的应用。
8.一种权利要求2、4或6所述的禽腺病毒蛋白fiber1的单克隆抗体在制备fadv-4诊断试剂中的应用。
