本发明涉及用于在衣物的清洁或洗涤期间去除衣物上的脂肪的洗涤剂组合物。本发明还涉及清洁或洗涤衣物的方法。最后，本发明还涉及适合用于在例如本发明的洗涤剂组合物中使用的酶产品。
背景技术：
用于衣物清洁或洗涤的包含酶的洗涤剂组合物是熟知的。尽管洗涤剂组合物的详细成分列表有显著的跨地域差异，但主要的洗涤机制是类似的。典型地，通过由酶、表面活性剂和其他成分辅助的机械作用去除污垢和污渍。历史上，蛋白酶首先被广泛用于衣物洗涤。现今，已经引入脂肪酶、α-淀粉酶、甘露聚糖酶、和纤维素酶以增加有效性，尤其是用于在较低温度下的家用衣物洗涤。脂肪酶将脂肪分解成溶解于表面活性剂中的脂肪酸。wo 2006/113314涉及一种液体衣物洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包含(a)从约5至约20000lu/g的第一洗涤脂肪酶，该第一洗涤脂肪酶是具有与来源于疏棉状腐质霉(humicola lanuginosa)菌株dsm 4109的野生型脂肪酶具有至少90％同一性的氨基酸序列的多肽，并且与所述野生型脂肪酶相比，该第一洗涤脂肪酶包含e1或q249的内电中性或带负电荷的氨基酸被带正电荷的氨基酸的取代；并且该第一洗涤脂肪酶可以进一步：(i)在c-末端包含肽添加；(ii)在n-末端包含肽添加；(ill)满足以下限制：i)在所述野生型脂肪酶的位置e210中包含带负电荷的氨基酸；ii)在对应于所述野生型脂肪酶的位置90-101的区域中包含带负电荷的氨基酸；以及iii)在对应于所述野生型脂肪酶的n94的位置处包含中性的氨基酸或带负电荷的氨基酸；并且/或者iv)在对应于所述野生型脂肪酶的位置90-10i的区域中具有负电荷或中性电荷；以及(iv)其混合物；(b)按组合物的重量计从约0.01wt％至约10wt％的经修饰的聚乙烯亚胺聚合物，其中该经修饰的聚乙烯亚胺聚合物包含约300至约10000重均分子量的聚乙烯亚胺主链；该聚乙烯亚胺主链的修饰是：(1)聚乙烯亚胺主链中一个或两个烷氧基化修饰/氮原子，该烷氧基化修饰包含氢原子被具有平均约1至约40个烷氧基部分/修饰的聚亚烷氧基链替代，其中烷氧基化修饰的末端烷氧基部分被氢、c1-c4烷基或其混合物封端；(2)聚乙烯亚胺主链中一个c1-c4烷基部分的取代和一个或两个烷氧基化修饰/氮原子，该烷氧基化修饰包含氢原子被具有平均约1至约40个烷氧基部分/修饰的聚亚烷氧基链替代，其中末端烷氧基部分被氢、c1-c4烷基或其混合物封端；或(3)其组合；以及(c)包含液体载体的组合物的其余部分。仍然需要在清洁或洗涤期间具有改善的脂肪去除性能的洗涤剂组合物。
背景技术
0、发明背景
技术实现思路
1、本发明涉及洗涤剂组合物，这些洗涤剂组合物包含：
2、(a)表面活性剂或表面活性剂系统；
3、(b)脂肪酶；以及
4、(c)选自下组的一种或多种加强剂：
5、i)烷氧基化聚乙烯亚胺，特别是乙氧基化和丙氧基化聚乙烯亚胺；
6、ii)烷氧基化聚醚胺，特别是乙氧基化和丙氧基化聚醚胺；
7、iii)盐酸胍；和
8、iv)鼠李糖脂。
9、除了表面活性剂或表面活性剂系统、脂肪酶和加强剂之外，本发明的洗涤剂组合物可以进一步包含选自下组的一种或多种组分：助洗剂、螯合试剂、染料转移抑制试剂、分散剂、酶、以及酶稳定剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、预形成的过酸、聚合物分散剂、粘土去除/抗再沉积剂、增亮剂、泡沫抑制剂、染料、调色染料、香料、香料递送系统、结构弹力剂、织物软化剂、载体、水溶助剂、加工助剂、溶剂和/或颜料。
10、在一个优选的实施例中，本发明的洗涤剂组合物包含示于seq id no:1、2、3、4、5或6中任一项的一种或多种脂肪酶，或其变体或其类似物。
11、在一个实施例中，本发明的洗涤剂组合物包含选自下组的商业脂肪酶产品：lipolasetm、lipextm；lipolextm、lipocleantm、lipex evity 100l、lipex evity 105t、lipexevity 200l(来自诺维信公司(novozymes))、lumafast(来自杰能科公司(genencor))、preferenz l100(丹尼斯科美国公司(danisco us inc.))、和lipomax(来自吉斯特-博克德斯公司(gist-brocades))。
12、在清洁或洗涤时，特别是衣物的清洁和洗涤时，使用本发明的组合物与不存在一种或多种加强剂时相比，洗涤下的脂肪去除得到增强/改善。当分别使用在实例1-3或4中所述的测试时，洗涤下的脂肪去除是至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、优选至少55％、更优选至少60％、甚至更优选65％、尤其至少70％的污渍。
13、典型地，当洗涤剂没有特别地包含las时，与当洗涤剂特别地包含las时相比,脂肪去除％较低。
14、在一个实施例中，当使用在实例1-3中所述的测试(即包含las的洗涤剂)时，洗涤下的脂肪去除是至少30％、至少40％、至少50％、至少55％、更优选至少60％、甚至更优选至少65％、尤其至少70％，如在30％和70％之间、如在40％和70％之间、如在50％和70％之间、如在60％和70％之间、如在30％和60％之间、如在40％和60％之间、如在50％和60％之间、如在30％和50％之间、如在40％和50％之间的脂肪污渍。
15、在另一个实施例中，当使用实例4中所述的测试(即不存在las的洗涤剂)时，洗涤下的脂肪去除是至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％，如在5％和50％之间、如在5％和40％之间、如在5％和30％之间、如在5％和20％之间、如在5％和10％之间的脂肪污渍。
16、本发明还涉及用于清洁或洗涤衣物的方法，这些方法包括使衣物与本发明的组合物接触。
17、在本发明的上下文中，“衣物”特别地包括纺织品、衣服、亚麻布等。特别地，衣物可能被污染，使得需要洗涤或清洁来去除脂质污渍，如猪油、脂肪、油等。脂质包括甘油酯(例如甘油三酯)、磷脂、糖脂、和脂肪酸。
18、本发明的洗涤或清洁方法通常在洗衣机(例如，顶装式或前装式洗衣机)中进行，但也可以以其他方式(如手动地)进行。
19、根据本发明的方法，以0.01-5mg酶蛋白(ep)/l洗涤水的浓度给予脂肪酶。
20、在一个实施例中，以0.001-5ppm，特别地0.01-10ppm的浓度给予脂肪酶。
21、在一个实施例中，以0.001-100ppm，特别地0.01-50ppm的浓度给予烷氧基化聚乙烯亚胺和/或烷氧基化聚醚胺。
22、在一个实施例中，以0.001-100mm/l洗涤水，如大约0.01-05mm/l洗涤水的浓度给予盐酸胍。
23、在一个实施例中，其中脂肪酶和加强剂之间的比率是在1:50和1:1之间，如在1:40和1:2之间，如在1:30和1:3之间。
24、在一个实施例中，将两种或三种加强剂进行组合。在一个优选的实施例中，将乙氧基化和丙氧基化聚乙烯亚胺与盐酸胍进行组合。
25、定义
26、脂肪酶：术语“脂肪酶(lipase)”、“脂肪酶(lipase enzyme)”、“脂解酶”、“脂质酯酶”、“脂解多肽”以及“脂解蛋白”是指如酶命名法所定义的ec3.1.1类中的酶。它可以具有脂肪酶活性(三酰基甘油脂肪酶，ec3.1.1.3)、角质酶活性(ec3.1.1.74)、固醇酯酶活性(ec3.1.1.13)和/或蜡酯水解酶活性(ec3.1.1.50)。出于本发明的目的，可以使用具有如“材料与方法”部分中描述的不同链长度的底物用pnp测定确定脂肪酶活性(即脂肪酶的水解活性)。
27、一种或多种加强剂：在本发明的上下文中，“加强剂”是指在相同的性能测试条件下，与当仅使用脂肪酶(即不存在加强剂)时相比，增强脂肪酶性能的化合物。根据本发明，可以将该性能确定为如实例1-3中所述的脂肪去除百分比(％)。
28、可替代地，可以将该性能确定为相对洗涤性能(“rp(洗涤)”)。在相同条件下，当性能指数(pi)大于1时，即，与在不存在所述加强剂化合物情况下的洗涤性能相比，洗涤性能得到增强。
29、片段：术语“片段”意指在多肽的氨基和/或羧基末端缺失一个或多个(例如，若干个)氨基酸的多肽；其中该片段具有脂肪酶活性。在一个方面，片段含有seq id no:1、2、3、或4的氨基酸1至269的数目的至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％，但是小于100％。
30、亲本或亲本脂肪酶：术语“亲本”或“亲本脂肪酶”意指进行改变以产生酶变体的脂肪酶。亲本脂肪酶可以是天然存在的(野生型)多肽，但是还可以是其变体和/或片段。在优选的实施例中，亲本脂肪酶可以是分别示于seq id no:1、2、3、4、5、或6中的亲本脂肪酶。
31、seq id no:1是野生型疏棉状嗜热丝孢菌(thermomyces lanuginosus)脂肪酶(同义词：疏棉状腐质霉dsm 4109脂肪酶)，通常简称为“tll”。
32、seq id no:2是如wo 2019/154952中的seq id no:2所披露的野生型疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的变体。
33、seq id no:3是如wo 2021/001400中的seq id no:3所披露的野生型犁头霉属物种(absidia sp.)脂肪酶。
34、seq id no:4是如wo 2021/001400中的seq id no:2所披露的犁头霉属物种脂肪酶变体。
35、seq id no:5是seq id no:1中的野生型疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的变体。
36、seq id no:6是也如wo 2022/162043(其通过引用特此并入)中的seq id no:1所披露的白地霉(geotrichum candidum)脂肪酶(称为“gcl 1”)。
37、序列同一性：两个氨基酸序列之间的关联度通过参数“序列同一性”来描述。
38、出于本发明的目的，使用尼德曼-翁施算法(needleman-wunsch algorithm)(needleman和wunsch,1970,j.mol.biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列同一性，该算法如emboss软件包(emboss：the european molecularbiology open software suite[欧洲分子生物学开放软件套件],rice等人，2000,trendsgenet.[遗传学趋势]16:276-277)(优选5.0.0版本或更新版本)的尼德尔程序中所实施的。所使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、和eblosum62(blosum62的emboss版本)取代矩阵。将标记为“最长同一性”的尼德尔的输出(使用非简化选项获得)用作同一性百分比并且计算如下：
39、(相同的残基x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)
40、衣物：根据本发明，术语“衣物”包括纺织品、衣服、亚麻布等，以及可以由任何材料制成，该材料包括纱线、纱线中间体、纤维、非机织物材料、天然材料、合成材料、以及任何其他纺织品材料，这些材料制造的织物和由这些织物制成的产品(例如，服装和其他物品)。该纺织品或织物可以处于针织品、机织物(woven)、牛仔布(denim)、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布的形式。该纺织品可以是基于纤维素的，如天然纤维素制品，包括棉、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维，或者人造纤维素制品(例如，来源于木浆)，包括粘胶纤维/人造丝、乙酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维(lyocell)或其共混物。纺织品或织物也可以不基于纤维素，如天然聚酰胺，包括羊毛、驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和蚕丝，或合成聚合物如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸酯、聚丙烯和氨纶(spandex)/弹性纤维(elastane)、或其共混物以及基于纤维素的纤维和不基于纤维素的纤维的共混物。共混物的实例是棉和/或人造丝/粘胶纤维与一种或多种伴随材料的共混物，该伴随材料如羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚氯乙烯纤维、聚氨酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)和/或含纤维素的纤维(例如人造丝/粘胶纤维、苎麻、亚麻/亚麻布、黄麻、乙酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)。织物可以是常规的可洗涤衣物，例如有污渍的家用衣物。当使用术语织物或服装时，旨在也包括广义术语纺织品。在本发明的上下文中，术语“衣物”还涵盖织物。
41、变体：术语“变体”意指具有脂肪酶活性的、在一个或多个(例如，若干个)位置处包含改变(即取代、插入和/或缺失)的多肽。取代意指用不同的氨基酸替代占据某一位置的氨基酸；缺失意指去除占据某一位置的氨基酸；并且插入意指在邻接并且紧随占据某一位置的氨基酸之后添加氨基酸。
42、洗涤性能：洗涤性能可以使用熟知的terg-o-tometer(tom)进行测试，该方法是中型洗涤测定，其中可以测试多个纺织品布样类型。tom基本上是大型温控水浴，其中浸入了多达16个开口金属烧杯。每个烧杯构成一个小的顶装式洗衣机并且在实验期间，它们中的每一者将含有特定洗涤剂/酶系统的溶液，连同对弄脏的和未弄脏的织物测试其性能。通常在120rpm下使用每个烧杯内的旋转搅拌臂来产生机械应力。
43、用于测试脂肪去除的洗涤剂：出于本发明的目的，可以使用例如标准x洗涤剂确定脂肪去除。标准x洗涤剂包含表面活性剂系统，该表面活性剂系统包含阴离子和非离子表面活性剂，如实例1-3中所述。可以如实例1-3中所述，比较存在和不存在一种或多种加强剂情况下的脂肪去除％来确定脂肪去除。
44、野生型脂肪酶：术语“野生型”脂肪酶意指由见于自然界中的天然存在的微生物(如细菌、酵母或丝状真菌)表达的脂肪酶。在实施例中，野生型脂肪酶特别地可以是示于seq id no:1中的脂肪酶(其来源于疏棉状嗜热丝孢菌dsm 4109(同义词：疏棉状腐质霉dsm4109))、或示于seq id no:3中的犁头霉属物种脂肪酶、或来源于示于本文seq id no:6的白地霉的脂肪酶(gcl1)。
45、变体命名惯例
46、出于本发明的目的，使用如seq id no:1所披露的脂肪酶来确定另一种脂肪酶中对应的氨基酸残基。将另一种脂肪酶的氨基酸序列与seq id no:1进行比对，并且基于该比对，使用尼德曼-翁施算法(needleman和wunsch,1970,j.mol.biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定对应于seq id no:1中披露的多肽中的任何氨基酸残基的氨基酸位置编号，该算法如emboss软件包(emboss：the european molecular biology open softwaresuite[欧洲分子生物学开放软件套件],rice等人，2000,trends genet.[遗传学趋势]16:276-277)(优选5.0.0版本或更新版本)的尼德尔程序中所实施的。所使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、和eblosum62(blosum62的emboss版本)取代矩阵。
47、可以通过使用若干计算机程序，使用其对应默认参数比对多个多肽序列来确定在另一种脂肪酶中的对应氨基酸残基的鉴定，这些计算机程序包括但不限于muscle(通过对数期望值的多序列比较；版本3.5或更新版本；edgar,2004,nucleic acids research[核酸研究]32:1792-1797)，mafft(版本6.857或更新版本；katoh和kuma,2002,nucleic acidsresearch[核酸研究]30:3059-3066；katoh等人，2005,nucleic acids research[核酸研究]33:511-518；katoh和toh,2007,bioinformatics[生物信息学]23:372-374；katoh等人，2009,methods in molecular biology[分子生物学方法]537:39-64；katoh和toh,2010,bioinformatics[生物信息学]26:1899-1900)以及采用clustalw的emboss emma(1.83或更新版本；thompson等人，1994,nucleic acids research[核酸研究]22:4673-4680)。
48、当其他酶与seq id no:1的脂肪酶相背离，使得传统的基于序列的比较方法不能检测其关系时(lindahl和elofsson,2000,j.mol.biol.[分子生物学杂志]295:613-615)，可使用其他成对序列比较算法。在基于序列的搜索中较高的敏感度可使用搜索程序来获得，这些搜索程序利用多肽家族的概率表现(谱)来搜索数据库。例如，psi-blast程序通过迭代数据库搜索过程来产生多个谱，并且能够检测远距离同源物(atschul等人，1997,nucleic acids res.[核酸研究]25:3389-3402)。如果多肽的家族或超家族具有在蛋白结构数据库中的一个或多个代表，可以实现甚至更高的敏感度。程序例如genthreader(jones,1999,j.mol.biol.[分子生物学杂志]287:797-815；mcguffin和jones,2003,bioinformatics[生物信息学]19:874-881)利用来自多种来源(psi-blast、二级结构预测、结构比对谱、以及溶剂化势)的信息作为预测查询序列的结构折叠的神经网络的输入。类似地，gough等人，2000,j.mol.biol.[分子生物学杂志]313:903-919的方法可用于将未知结构的序列与存在于scop数据库中的超家族模型进行比对。这些比对进而可以用于产生多肽的同源性模型，并且使用出于该目的而开发的多种工具可以评估这样的模型的准确度。
49、对于已知结构的蛋白质，有几种工具和资源可用于检索并产生结构比对。例如，蛋白质的scop超家族已经在结构上进行比对，并且那些比对是可访问且可下载的。可以使用多种算法如距离比对矩阵(holm和sander,1998,proteins[蛋白质]33:88-96)或组合延伸(shindyalov和bourne,1998,protein engineering[蛋白质工程]11:739-747)比对两种或更多种蛋白质结构，并且这些算法的实施可以另外用于查询具有目的结构的结构数据库，以便发现可能的结构同源物(例如，holm和park,2000,bioinformatics[生物信息学]16:566-567)。
50、在本发明的上下文中，在描述变体时，为了方便参照起见，采用了以下所述的命名法。采用了已接受的iupac单字母或三字母的氨基酸缩写。
51、取代.对于氨基酸取代，使用以下命名法：原始氨基酸、位置、取代的氨基酸。相应地，将在位置226处的苏氨酸被丙氨酸取代表示为“thr226ala”或“t226a”。多个突变通过加号(“+”)分开，例如“gly205arg+ser411phe”或“g205r+s411f”代表在位置205和位置411处的甘氨酸(g)和丝氨酸(s)分别被精氨酸(r)和苯丙氨酸(f)取代。
52、缺失.对于氨基酸缺失，使用以下命名法：原始氨基酸、位置、*。相应地，将在位置195处的甘氨酸的缺失表示为“gly195*”或“g195*”。多个缺失通过加号(“+”)分开，例如“gly195*+ser411*”或“g195*+s411*”。
53、插入.对于氨基酸插入，使用以下命名法：原始氨基酸、位置、原始氨基酸、插入的氨基酸。相应地，将在位置195处的甘氨酸之后插入赖氨酸表示为“gly195glylys”或“g195gk”。多个氨基酸的插入被表示为[原始氨基酸、位置、原始氨基酸、插入的氨基酸#1、插入的氨基酸#2；等]。例如，将在位置195处的甘氨酸之后插入赖氨酸和丙氨酸表示为“gly195glylysala”或“g195gka”。
54、在这样的情况下，通过将小写字母添加至在所插入的一个或多个氨基酸残基之前的氨基酸残基的位置编号而对所插入的一个或多个氨基酸残基进行编号。在以上实例中，该序列因此会是：
55、 亲本： 变体： 195 195 195a 195b g g-k-a
56、多个改变.包含多个改变的变体通过加号(“+”)分开，例如，“arg170tyr+gly195glu”或“r170y+g195e”代表在位置170处和位置195处的精氨酸和甘氨酸分别被酪氨酸和谷氨酸取代。
57、不同改变.可以在一个位置上引入不同的变化时，这些不同的变化由一个逗号分开，例如“arg170tyr，glu”或“r170y，e”代表在位置170上的精氨酸被酪氨酸或谷氨酸取代。因此，“tyr167gly，ala+arg170gly，ala”表示以下变体：
58、“tyr167gly+arg170gly”、“tyr167gly+arg170ala”、“tyr167ala+arg170gly”、和“tyr167ala+arg170ala”。
1.一种洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包含：
2.如权利要求1所述的组合物，其中该组合物包含脂肪酶，烷氧基化聚乙烯亚胺、如乙氧基化和丙氧基化聚乙烯亚胺，和盐酸胍。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其中与不存在加强剂时相比，该组合物给出了改善的洗涤下的脂肪去除，特别是其中该洗涤下的脂肪去除是至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、优选至少55％、更优选至少60％、甚至更优选65％、尤其至少70％的污渍。
4.如权利要求1-3中任一项所述的组合物，其中该脂肪酶是
5.如权利要求1-4中任一项所述的组合物，该组合物进一步包含选自以下的一种或多种酶：α-淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、磷脂酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、磷酸二酯酶(pde)、脱氧核糖核酸酶(dna酶)、或其混合物。
6.一种用于清洁或洗涤衣物的方法，该方法包括使该衣物与如权利要求1-5中任一项所述的组合物接触。
7.一种酶产品，该酶产品包含：
