本发明属于生物技术医药领域，具体涉及prl2靶向抑制剂在制备预防或治疗癌症的药物中的应用。
背景技术：
1、乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，由乳腺上皮细胞在致癌因子作用下增殖失控而产生。乳腺癌具有高度异质性，其病因及生物学特性极其复杂，尚未被完全阐明。因此，亟待探索乳腺癌治疗的新靶点和新思路。
2、prl2属于肝再生磷酸酶家族(phosphatase of regenerative livers，prls)，通过催化底物酪氨酸或苏氨酸位点去磷酸化，广泛参与多种生理及病理过程。研究表明，prl2是一种致癌因子，在多种人类肿瘤中异常高表达。在乳腺癌细胞mda-mb-231中，prl2的敲低减弱了细胞非锚定生长及迁移能力，这说明细胞的恶性表型是部分通过prl2信号通路介导的。
3、最新研究发现在乳腺癌等人类肿瘤中高水平prl2往往与较低水平的蛋白酪氨酸磷酸酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，pten)直接相关，抑癌因子pten是prl2的直接作用底物，prl2通过将pten去磷酸化而下调pten水平来发挥促癌作用。prl2能够将pten第336位酪氨酸(tyr336)位点的磷酸基团移除，增强nedd4介导的pten泛素化，使其被蛋白酶体降解，从而降低pten水平。pten水平的降低会触发pip3浓度升高，导致原癌基因akt的激活。prl2通过降低pten水平放大akt信号，促进肿瘤发生。同时，研究结果提示通过抑制prl2磷酸酶活性，恢复pten水平，能够消除pten缺失诱导的恶性肿瘤。
4、因此，寻找有效的prl2抑制剂对于乳腺癌等肿瘤的靶向治疗具有十分重要的意义。
5、天然产物(natural products，nps)由于其结构多样性、不良反应少等优点，是发现先导化合物与候选药物的重要来源。fda批准药物中有30％以上是直接使用nps或nps的结构修饰。在过去的二十年中，研究已证明nps是开发蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂的理想先导化合物。本研究建立基于prl2体外磷酸酶活性的药物筛选体系，通过对天然产物库进行高通量筛选，发现prl2的靶向抑制剂，为今后开发更高效、高选择性的prl2抑制剂提供先导化合物。
技术实现思路
1、基于现有技术中的不足，本发明从近千种天然产物中发现靶向抑制prl2磷酸酶的化合物，为以prl2为治疗靶点的乳腺癌等提供潜在候选药物。通过高通量筛选发现六个显著抑制prl2酶活的天然产物，其中对三个代表性化合物丹参酮i、黄连碱、双醋瑞因开展后续研究，三个化合物与prl2靶点的亲和力较强，可占据其活性口袋附近，化合物对乳腺癌细胞mda-mb-231具有抑制增殖作用，并对白血病细胞k562和非小细胞肺癌细胞a549的增殖也具有一定抑制作用，在乳腺癌小鼠模型中三个化合物均抑制肿瘤生长。
2、本发明的具体技术方案如下：
3、本发明提供了prl2靶向抑制剂在制备预防或治疗癌症的药物中的应用。所述prl2靶向抑制剂为双醋瑞因、丹参酮或黄连碱。
4、优选的，所述丹参酮为丹参酮i、隐丹参酮、丹参酮ii a或二氢丹参酮i。
5、在本发明实施的一些方案中，所述癌症为乳腺癌、非小细胞肺癌或血癌。
6、具体的，在应用时，双醋瑞因的给药剂量为50mg/kg/天，
7、丹参酮的给药剂量为20mg/kg/天，
8、黄连碱的给药剂量为60mg/kg/天。
9、本发明还提供了一种prl2靶向抑制剂的筛选方法，包括以下步骤：
10、以difmup作为磷酸酶荧光底物，以prl2蛋白作为反应蛋白，再加入待筛选化合物，孵育后检测荧光值，计算待筛选化合物对prl2蛋白的抑制率，设定抑制率值，抑制率大于抑制率值的待筛选化合物即为prl2靶向抑制剂。
11、具体的，所述孵育条件为室温孵育30min；在激发光340nm和发射光450nm处检测荧光值。设定抑制率值为60％。
12、本研究中，我们利用一种基于prl2体外酶活的药物筛选体系，对近千种天然产物进行高通量筛选，发现六个对prl2酶活具有显著抑制作用的化合物。其中四种均为丹参酮类化合物，另两种分别为黄连碱和双醋瑞因。为了研究不同化学结构作为靶向抑制prl2的先导化合物的可能性，我们选择一个代表丹参酮i，与黄连碱和双醋瑞因进行下一步研究。三个化合物对prl2靶点的亲和常数kd值均为10-5m，表明亲和力较强，分子对接显示三个化合物通过结合prl2活性位点或附近，防止底物进入活性口袋发挥抑制作用。细胞水平的研究显示三个化合物通过靶向prl2可显著抑制mda-mb-231乳腺癌细胞增殖，并且对k562白血病细胞和a549非小细胞肺癌细胞的增殖也具有一定抑制作用。动物水平研究表明三个化合物在乳腺癌小鼠模型中抑制肿瘤生长，发挥抗肿瘤作用。
13、即双醋瑞因、丹参酮i和黄连碱是有效的prl2抑制剂，其通过靶向抑制prl2发挥抗乳腺癌的作用。
1.prl2靶向抑制剂在制备预防或治疗癌症的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述prl2靶向抑制剂为双醋瑞因、丹参酮或黄连碱。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述丹参酮为丹参酮i、隐丹参酮、丹参酮ii a或二氢丹参酮i。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述癌症为乳腺癌、非小细胞肺癌或血癌。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，应用时，双醋瑞因的给药剂量为50mg/kg/天，
6.一种prl2靶向抑制剂的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要求6所述prl2靶向抑制剂的筛选方法，其特征在于，所述孵育条件为室温孵育30min；
8.根据权利要求6所述prl2靶向抑制剂的筛选方法，其特征在于，设定抑制率值为60％。
