本发明属于分子探针，尤其涉及一种花菁类染料的制备方法及其应用。
背景技术：
1、基于近红外二区的活体荧光成像，由于具有更深的穿透深度，更低的组织自荧光以及更弱的光毒性，在基础医学与临床转化方面方面极具价值。然而传统的无机荧光分子探针，如碳纳米管、无机量子点、稀土元素纳米颗粒等，它们虽然具有较高的荧光量子产率，但是它们的生物安全性和生物相容性相对较差，大大限制了其在临床上的应用。不同于无机的分子探针，有机的荧光染料分子具有更好的生物相容性，同时其结构可调控，可以通过合理的结构设计来改善其发光性质、水溶性、药代动力学等各种性能。
2、得益于能够与活体内的蛋白结合并产生荧光增强效应的能力，花菁类染料在生物系统和组织中显示出良好的应用前景。然而皮肤之中广泛分布的白蛋白使得许多花菁类染料具有较高的皮肤信号，如ir-808、ir-780。这大大影响了这类有机小分子探针的疾病成像效果，使得病灶部位和健康部位难以区分。为了解决花菁类染料具有较高的皮肤信号的这一难题，需要一种全新且有效的方法。为此提出一种花菁类染料的制备方法及其应用。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种花菁类染料的制备方法及其应用，旨在解决上述背景技术中提出的问题。
2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、一种花菁类染料的制备方法，包括以下步骤：
4、合成如下结构的花菁类染料ir-bic1、ir-bic2：
5、
6、合成所述花菁类染料ir-bic1、ir-bic2的具体步骤如下：
7、制备中间体2：将12.8mmol 1-苄基-1h-咪唑和88.4mmol 1,6-二溴己烷溶于20ml丙酮中，并在50℃下搅拌反应24h，反应完成后用tlc板监测，减压蒸馏除去溶剂，经柱层析法分离提纯得到淡黄色液体，即中间体2；
8、制备中间体3a：将1.73mmol中间体2、1.24mmol 1,1,2-三甲基-1h-苯并[e]吲哚共同溶解在12.2ml乙腈中，然后向混合物溶液中加入60mg碘化钾，混合体系进行超声氮气除水除氧后，加热至回流，搅拌反应68h后反应完成，使用tlc法监测，旋蒸除去有机溶剂得到粗产品，经柱层析纯化后得到深蓝色固体产物，即中间体3a；
9、制备中间体3b：制备中间体3b的步骤与制备中间体3a的步骤唯一不同的是，搅拌反应80h后反应完成；
10、制备ir-bic1：将0.2145mmol中间体3a、0.0975mmol n-[(3-(苯胺基亚甲基)-2-氯-1-环己烯-1-基)亚甲基]苯胺盐酸盐溶解在14.5ml正丁醇中，再加入0.073mmol醋酸钾，混合体系进行超声氮气除水除氧后，加热到115℃，搅拌反应8h，旋蒸除去有机溶剂得到粗产品，然后经过柱层析纯化得到终产物，为深绿色固体，即ir-bic1；
11、制备ir-bic2：制备ir-bic2的步骤与制备ir-bic1的步骤唯一不同的是，搅拌反应11h。
12、一种根据上述所述的花菁类染料的制备方法制得的花菁类染料。
13、一种根据上述所述的花菁类染料在制备进行肿瘤成像试剂中的应用，在进行肿瘤成像应用时，肿瘤成像试剂通过尾静脉注射直接用于成像。
14、与现有技术相比，本发明的有益效果是：
15、与传统上侧链不带有阳离子结构的花菁类染料相比，本发明提供的方法所制备的花菁类染料具有更低的皮肤信号。在体内的生物成像应用中，ir-bic1、ir-bic2能够在1100nm以上的近红外区对小鼠的肿瘤进行高信噪比成像，这使得其在临床转化中具有巨大的潜力。
1.一种花菁类染料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的花菁类染料的制备方法，其特征在于，合成所述花菁类染料ir-bic1、ir-bic2的具体步骤如下：
3.一种根据权利要求1或2所述的花菁类染料的制备方法制得的花菁类染料。
4.一种根据权利要求3所述的花菁类染料在制备进行肿瘤成像试剂中的应用，在进行肿瘤成像应用时，肿瘤成像试剂通过尾静脉注射直接用于成像。
