本申请涉及合成生物学，尤其涉及一种紫杉二烯的分离制备方法。
背景技术：
1、紫杉醇是一种二萜类生物碱，广泛用于多种癌症的临床治疗。紫杉醇具有结构复杂的6-8-6三环碳骨架，带有9个立体中心、1个明显的氧杂环丁烷环基团和1个苯基异丝氨酸链，其可穿过微管壁的纳米孔，与微管腔表面的微管蛋白相互作用，破坏微管动力学，从而对癌细胞产生细胞毒性。
2、目前，紫杉二烯是紫杉醇生物合成途径中的关键前体之一，紫杉二烯是一类二萜化合物，由4分子异戊二烯基焦磷酸(ipp)经聚合、环化等酶促反应生成。研究发现，短叶红豆杉来源的紫杉二烯合成酶可催化ggpp(geranylgeranyl pyrophosphate，香叶基香叶基焦磷酸)合成紫杉二烯。并且，上述方式合成的紫杉二烯包括两个同分异构体，分别为紫杉-4(5),11(12)-二烯(taxa-4(5),11(12)-diene)和紫杉-4(20),11(12)-二烯(taxa-4(20),11(12)-diene)。现有技术中记载红豆杉中的紫杉-4(5),11(12)-二烯含量可能更丰富；但有科学家根据紫杉醇的结构推测紫杉-4(20),11(12)-二烯可能为紫杉醇合成的主要骨架。为了进一步研究紫杉醇的合成路径，有必要将二者分离。
技术实现思路
1、鉴于以上问题，本申请实施例提供一种紫杉二烯的分离制备方法，以解决上述的紫杉-4(5),11(12)-二烯和紫杉-4(20),11(12)-二烯无法实现分离的技术问题。
2、本申请实施例提供一种紫杉二烯的分离制备方法，包括：
3、获取含有紫杉-4(5),11(12)-二烯的待处理液；
4、采用第一有机溶剂对所述待处理液进行萃取，得到第一有机相混合液；
5、将所述第一有机相混合液进行旋转蒸发，采用第一有机溶剂溶解旋转蒸发残留物得到第二有机相混合液；
6、将所述第二有机相混合液进行柱层析分离，得到含有紫杉-4(5),11(12)-二烯的产物。
7、本申请实施例提供的紫杉二烯的分离制备方法，获取含有紫杉-4(5),11(12)-二烯的待处理液；采用第一有机溶剂对所述待处理液进行萃取，得到第一有机相混合液；将所述第一有机相混合液进行旋转蒸发，采用第一有机溶剂溶解旋转蒸发残留物得到第二有机相混合液；将所述第二有机相混合液进行柱层析分离，得到含有紫杉-4(5),11(12)-二烯的产物；通过上述方式，待处理液依次进行萃取、旋转蒸发及进行柱层析分离，能够去除大部分中间体杂质，并将紫杉-4(5),11(12)-二烯和紫杉-4(20),11(12)-二烯分离，提高产物中紫杉-4(5),11(12)-二烯的纯度。
8、本申请的这些方面或其他方面在以下实施例的描述中会更加简明易懂。
1.一种紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，将所述第二有机相混合液进行柱层析分离，包括：
3.根据权利要求2所述的紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，所述层析填料包括复合纤维填料、聚酰胺填料、大孔树脂填料、有机膨润土填料和硅胶填料中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，所述层析填料包括硅胶填料，所述硅胶填料选自无定形硅胶、球形硅胶、硅胶粉、十八烷基硅烷键合硅胶(ods)填料或亲水反相十八烷基硅烷键合硅胶填料中的至少一种；
5.根据权利要求1所述的紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，采用第一有机溶剂对所述待处理液进行萃取，包括：
6.根据权利要求5所述的紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，采用第一有机溶剂对所述待处理液进行萃取，还包括：
7.根据权利要求1所述的紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，所述第一有机溶剂为正己烷。
8.根据权利要求1所述的紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，所述待处理液为将能够合成紫杉二烯的底盘细胞进行发酵得到的发酵混合物，或，所述待处理液为能够合成紫杉二烯的底盘细胞的提取物。
9.根据权利要求8所述的紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，所述底盘细胞包括ts基因。
10.根据权利要求1所述的紫杉二烯的分离制备方法，其特征在于，所述待处理液为能够合成紫杉二烯的植物体的提取物。
