本发明涉及用于治疗人类皮肤创伤修复的药物开发领域，特别涉及一种小分子短肽及其缓释体系在制备促进皮肤难愈性创面愈合与修复的产品中的应用。
背景技术：
1、皮肤的愈合过程是一个复杂的、协调有序的组织修复再生过程，是多种细胞及细胞因子共同作用完成的过程。该过程大致可以分为炎症反应期、增生期和重塑期，三个期相互交叉并无严格的界线，且均有大量的细胞及细胞因子参与愈合过程。参与愈合的细胞包括角质细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、单核/巨噬细胞和肥大细胞等；参与愈合的细胞因子包括成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor，fgf)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，vegf)、血小板衍生因子(plateletderived growth factor，pdgf)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，tnf-α)、转化生长因子(transforming growth factor，tgf)、胰岛素样生长因子(insulin-likegrowth factors，igf)和多种凝血因子等。在受到某些因素的调控下，创面修复的过程可能会长时间受到阻滞，停留在其中的一个阶段。
2、由各种原因造成的经1个月以上治疗未能愈合，也无愈合倾向的创面被定义为难愈性创面。国际伤口愈合学会将其定义为无法通过正常有序且及时的修复过程，达到解剖和功能上完全愈合的创面。难愈性创面的发病机制复杂、病程长，导致治疗难度大、费用高，给患者带来沉重的身心压力和经济负担。随着社会的发展及老龄化进程，难愈性创面的诱因已由过去的烧/创伤等外伤演变为现在的以糖尿病为首的代谢性疾病。
3、糖尿病难愈性溃疡是一个复杂的过程，是多种因素共同作用的结果。已经有研究表明，新生血管的形成和数量在组织修复中起着非常重要的作用，而这两者在糖尿病伤口愈合中是缺乏的。一方面是促进血管生长和增殖，另一方面是促进血管成熟，两者间存在着微妙的平衡关系，正常伤口愈合中的血管生成依赖于这种平衡机制，而糖尿病难愈性溃疡的病理状态破坏了这种平衡。因此，在糖尿病难愈性溃疡修复的过程中，血管内皮细胞和成纤维细胞(发挥非常重要的调控作用。
4、多肽类药物是后基因组时代新药研究领域最受关注的热点之一。是一种介于小分子和大分子之间的药物，来源广泛，是近年来全球药物研发的热点之一。多肽药物与蛋白药物相比分子量小，免疫原性低，生产工艺相对简单；与小分子化药相比，则毒性低，特异性较好，并且多肽药物能够通过多种方式给药，并且易于吸收。
5、但目前并没有用于糖尿病难愈性溃疡的多肽类药物。因此，研发具有对难愈性创面如糖尿病难愈性溃疡的多肽，并实现多肽的稳定性释放，在临床应用上具有非常重要的开发价值，对于疾病的治疗具有较好的前景。
技术实现思路
1、本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种小分子短肽在制备促进皮肤难愈性创面愈合与修复的产品中的应用。
2、本发明的另一目的在于提供一种小分子短肽缓释体系的制备方法。
3、本发明的又一目的在于提供所述方法制备得到的小分子短肽缓释体系。
4、本发明的再一目的在于提供所述小分子短肽缓释体系的应用。
5、本发明的目的通过下述技术方案实现：
6、一种小分子短肽在制备促进皮肤难愈性创面愈合与修复的产品中的应用，其中，
7、所述的小分子短肽的序列为gpanvet的线性肽(修复肽r1)、kvkvgpanvkvkv的线性肽(修复肽r2)和gpanvekekek的线性肽(修复肽r3)中的至少一种；优选为gpanvet的线性肽(修复肽r1)。
8、所述的皮肤难愈性创面包括糖尿病难愈性溃疡(糖尿病难愈性创面)等。
9、所述的小分子短肽对高糖损伤条件下的成纤维细胞或脐静脉血管内皮细胞具有促进增殖和迁移的作用(即对其具有促修复的作用)，能够促进糖尿病难愈性创面愈合。
10、所述的产品为医用产品、护肤品或化妆品。
11、所述的医用产品包括药品等。
12、所述的产品的制剂类型为散剂(粉剂)、溶液、冻干制剂、乳剂、霜剂、凝胶或敷料。
13、一种小分子短肽缓释体系的制备方法，包括如下步骤：
14、(1)制备小分子短肽缓释物前体：将磷脂与胆固醇溶解到无水乙醇中，旋转蒸发形成磷脂膜；然后加入柠檬酸溶液水化，经超声混合均匀后进行透析，得到透析液；再在透析液中加入上述小分子短肽，于37℃的水浴摇床中孵育1～3小时，经透析得到小分子短肽缓释物前体溶液；
15、(2)制备小分子短肽缓释物：在ε-聚赖氨酸(ε-pl)溶液中逐滴加入步骤(1)中得到的小分子短肽缓释物前体溶液，搅拌混合均匀后离心、取沉淀，得到所述的小分子短肽缓释体系。
16、步骤(1)中所述的磷脂与胆固醇的质量为2:1。
17、步骤(1)中所述的柠檬酸溶液为ph＝4的柠檬酸溶液。
18、步骤(1)中所述的超声的条件为：功率350w，开20s，关40s。
19、步骤(1)中所述的透析均为采用截留分子量3500da的透析袋透析12～48h；优选为采用截留分子量3500da的透析袋透析36h。
20、步骤(1)中，第一次透析所用的透析液为pbs缓冲液；第二次透析所用的透析液为pbs缓冲液、生理盐水或3d h2o。
21、步骤(1)中所述的小分子短肽的用量为按其在体系的终浓度为0.8～1.2mmol/l计算；优选为按其在体系的终浓度为1mmol/l计算。
22、步骤(2)中所述的ε-聚赖氨酸(ε-pl)的浓度为10～20mg/ml；优选为15mg/ml。
23、步骤(2)中所述的搅拌的条件为：800～1500rpm搅拌1～1.5小时。
24、步骤(2)中所述的离心的条件为：4℃、14000g离心10～20分钟。
25、一种小分子短肽缓释体系，通过上述任一项所述的方法制备得到。
26、所述的小分子短肽缓释体系在制备促进皮肤难愈性创面愈合与修复的产品中的应用。
27、所述的皮肤难愈性创面包括糖尿病难愈性溃疡(糖尿病难愈性创面)等。
28、本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
29、1、本发明通过实验发现：在高浓度葡萄糖条件下，r1肽能够促进成纤维细胞生长，促进血管内皮细胞生长，促进血管内皮细胞的迁移，提示其在高糖损伤条件下，具有促修复的作用。此外，r1肽还能够有效促进糖尿病小鼠的皮肤创伤愈合。因此，可将该r1肽用于治疗皮肤难愈性创面，如糖尿病难愈性溃疡等。
30、2、本发明还构建了r1肽缓释体系，能够有效实现药物的缓释，对糖尿病大鼠起到更好的促修复作用，促进皮肤创伤的愈合。因此，将该r1肽缓释体系用于治疗皮肤难愈性创面。
1.一种小分子短肽在制备促进皮肤难愈性创面愈合与修复的产品中的应用，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的皮肤难愈性创面包括糖尿病难愈性溃疡。
3.一种小分子短肽缓释体系的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的小分子短肽缓释体系的制备方法，其特征在于：
5.根据权利要求3所述的小分子短肽缓释体系的制备方法，其特征在于：
6.根据权利要求3所述的小分子短肽缓释体系的制备方法，其特征在于：
7.根据权利要求3所述的小分子短肽缓释体系的制备方法，其特征在于：
8.根据权利要求3所述的小分子短肽缓释体系的制备方法，其特征在于：
9.一种小分子短肽缓释体系，其特征在于：通过上述3～8任一项所述的方法制备得到。
10.权利要求9所述的小分子短肽缓释体系在制备促进皮肤难愈性创面愈合与修复的产品中的应用。
