本发明涉及纳米药物，具体涉及一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂及其制备方法。
背景技术：
1、黄芪甲苷是草本植物黄芪主要活性成分之一，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种活性，且因其毒副作用小，具有广阔的应用前景。但黄芪甲苷亲脂性较高，生物利用度差，严重限制了其临床应用。壳聚糖作为一种广泛使用的纳米载体，因其生物相容性，无毒等优点备受关注，且作为自然界中存在的阳离子多糖，不仅可与带负电的大分子或交联剂形成聚电解质复合物，还可通过一系列化学反应产生多种衍生物，以扩展其功能性。这种特性使壳聚糖纳米粒成为一种优秀的纳米载药载体，可显著提高药物的溶解度，改善其粒径小和稳定性。
2、没食子酸作为一种多酚类化合物，具有杀菌、抗炎、抗氧化等生理功效，因其与蛋白质和多糖之间的强烈交联作用而被誉为天然交联剂。没食子酸与壳聚糖缀合形成的复合物具有缓释药物分子的能力，为降低药物毒副作用提供了新的可能性。目前，纳米技术作为药物载体在疾病治疗中具有重要的应用价值。虽然已有学者针对黄芪甲苷开展了如纳米乳、纳米脂质体、纳米胶束等多种制剂的研究，但这些制剂在提高黄芪甲苷水溶性和生物利用度方面仍存在不足，且部分制剂存在毒性、制备工艺复杂、成本高等问题。
3、中国专利cn115990176a公开的一种黄芪甲苷纳米粒，分别使用mof、微乳共载参酮ⅱa和黄芪甲苷以提高其溶解性和生物利用度。此法虽有高载药量的优势，但制作中使用了有毒副作用的有机配体，降低了其安全性。国外研究发表的一种黄芪甲苷包裹的壳聚糖纳米粒(nose to brain delivery of astragaloside iv byβ-asarone modifiedchitosannanoparticles for multiple sclerosis therapy[j].international journalof pharmaceutics,2023,644.)使用β-asarone修饰壳聚糖纳米粒包裹黄芪甲苷，此法虽可提高其溶解度以提升其生物利用度，但所制得纳米粒zeta电位低，纳米体系不稳定，影响其治疗效果。此外，目前尚未有将没食子酸和黄芪甲苷共载于同一纳米制剂的报道，也未有探讨没食子酸同时作为交联剂和活性物质与其他物质共载于壳聚糖纳米粒中发挥医药效果的研究。
技术实现思路
1、本发明正是针对现有技术存在的不足，提供了一种具有包封率大、粒径小、稳性定高、生物安全性与降解性好，共载和同时缓慢释放没食子酸与黄芪甲苷等优点的共载没食子酸和黄芪甲苷纳米缓释制剂。
2、为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
3、一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，包括壳聚糖和没食子酸形成的纳米粒载体，以及负载在壳聚糖纳米粒上的黄芪甲苷和没食子酸。
4、一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂的制备方法包括以下步骤：
5、步骤一：将脱乙酰壳聚糖完全溶于冰乙酸水溶液中，室温搅拌过夜后经滤膜滤过得到一定体积的混合终溶液。
6、步骤二：将黄芪甲苷加到上述步骤一所得溶液中并室温搅拌，可获得混合均匀的溶液。
7、步骤三：将没食子酸完全溶于超纯水中并磁力搅拌后，将其缓慢滴加到上述步骤二的混合溶液中，静电离子交联后可初步得到共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米混悬液。
8、步骤四：将右旋糖酐-40和泊洛沙姆-68加入到上述步骤三得到的纳米混悬液中，室温搅拌后可获得共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米混悬液。
9、进一步地，上述步骤三中使用没食子酸作为负离子交联剂通过与带正电的壳聚糖发生的离子交联作用形成含药壳聚糖纳米载体，其不仅具有共载黄芪甲苷和没食子酸两种药物，使两药的水溶性和生物利用度提高，还同时具有缓慢控释药物两药的能力，为增强与延长药物治疗疾病和降低药物毒副作用提供了新的可能性，步骤四中的泊洛沙姆-68为乳化分散剂可使制剂的粒径减少和粒子分布均匀。使用右旋糖酐-40作为稳定剂均匀覆盖在纳米粒的外层，增强此制剂的稳定性。
10、作为上述技术方案的进一步优化，步骤一中脱乙酰壳聚糖为100～130毫克，溶于35～45毫升的1％(v/v)冰乙酸溶液，磁力搅拌速度为700～900转每分钟，0.45微米滤膜滤过。
11、作为上述技术方案的进一步优化，步骤二中黄芪甲苷为15～30毫克，维持搅拌速度700～900转每分钟0.5～1.0小时。
12、作为上述技术方案的进一步优化，步骤三中没食子酸为60～100毫克，溶解在55～65毫升超纯水中，维持搅拌速度900～1100转每分钟0.5～1.0小时，用1毫升无针头注射器缓慢滴加至少15～20分钟，离子交联时间为2.5～3.5小时。
13、作为上述技术方案的进一步优化，步骤四中右旋糖酐40为400～500毫克，泊洛沙姆68为200～300毫克，维持搅拌速度900～1100转每分钟2.5～3.5小时。
14、作为上述技术方案的进一步优化，步骤一至步骤四制备共载没食子酸和黄芪甲苷的纳米缓释制剂的所有反应条件均为室温下进行。
15、本发明与现有技术相比较，本发明的实施效果如下：
16、1.本发明所述的一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，形态为乳白色混悬液或白色冻干粉，形状为球形或椭球形，粒径小于300纳米，混悬液在超纯水中分散指数为0.149～0.253，电动势为31.65～35.49毫伏；黄芪甲苷包封率为85.16％～93.53％，没食子酸包封率为68.63％～76.58％，缓慢控释药物时间长达72小时。
17、2.本发明所述的一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，制备过程简单，易操作，成本低，绿色低耗能，反应条件温和，易制得，使用乙酸代替有毒的有机溶剂溶解不溶于水的壳聚糖、没食子酸和黄芪甲苷，制备过程中无有机溶剂残留的问题，安全性高，适用于大规模药物制剂的生产。而且，共载没食子酸和黄芪甲苷的纳米缓释制剂的反应前后均无有害、有毒物质参与或生成，毒性小，安全性高。它不仅可作为黄芪甲苷的注射剂，控缓释、靶向等制剂，也可最大限度的利用食子酸和黄芪甲苷的药用价值。
18、3.本发明所述的一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，利用没食子酸羧基的负电性和壳聚糖氨基的正电性通过正负离子交联作用形成纳米载体。其中，没食子酸不仅为天然交联剂形成壳聚糖纳米载体辅助增强黄芪甲苷的生物利用度和药物活性，也为治疗疾病的天然药物，将其载进壳聚糖纳米粒中，结合同样具有抗炎、抗氧化等药理活性的天然药物黄芪甲苷，它们共载进制剂可达到增强和增加其纳米制剂治疗疾病的目的，实现了两药协同增效，显著优于黄芪甲苷单药和没食子酸单药疗效之和。
19、4.本发明所述的一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，扩大了壳聚糖及没食子酸和黄芪甲苷的应用范围，以天然物质壳聚糖和没食子酸为原料，绿色环保，符合可持续发展策略。且载体壳聚糖价格低廉，使其更利于大规模应用于临床，达到高效增强药物治疗疾病的目的。
20、5.本发明所述的一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，其制备方法中进行自发离子交联反应时，不需要另外添加ph调节剂，共载没食子酸和黄芪甲苷的纳米缓释制剂制备过程中所使用的所有化合物混合后的ph为4.5～5.5，对本发明离子交联反应来说，是最佳的反应条件，且在这个条件下，可以防止没食子酸壳聚糖纳米载体解离，阻止药物的泄露。另外，实验研究发现该纳米缓释制剂经注射给药小鼠28天和共孵育正常上皮细胞给药48小时小鼠和细胞的生存率均在83％以上，证明该药具有良好的安全性和生物相容性。
21、6.本发明所述的一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，其制备方法中用泊洛沙姆-68作为乳化分散剂和右旋糖酐-40作为稳定剂，利用泊洛沙姆-68的乳化分散作用使制备的纳米制剂粒径变小和分散均匀性好，且同时使用它们可高效增强此制剂的稳定性，易吸附在发病部位而不易被机体吞噬清除。而且，右旋糖酐-40的羟基与壳聚糖纳米粒的羟基通过氢键结合，在纳米制剂表面形成一层保护膜，可使其纳米粒子在到达病变部位前在人体内较为稳定，避免药物较快泄露被降解，提高药物在人体内的生物利用率。
22、7.本发明所述的一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，其制剂zeta电位的绝对值高，在30毫伏以上，证明共载没食子酸和黄芪甲苷的纳米缓释制剂具有较高的稳定性。而且，不管是含有没食子酸与壳聚糖离子交联形成的载体，还是共载没食子酸和黄芪甲苷的纳米缓释制剂，其zeta电位均为正值，与带负电的病变细胞具有较好的亲和力，从而增加其渗透作用增强机体对药物的吸收，进一步增强对疾病的治疗效果。
23、8.本发明所述的一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，因纳米缓释靶向作用和纳米级粒径的巨大比表面积，共载两药的纳米制剂不仅使没食子酸与黄芪甲苷的溶解性能、生物活性和药效得到提高，也增大了其与组织细胞的接触面积，使其促渗透吸收时间延长，具有良好的靶向和缓控释药性能，为降低药物毒副作用提供了新的可能性。
1.一种共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，其特征在于：该纳米缓释制剂包括壳聚糖和没食子酸形成的纳米粒载体以及负载在壳聚糖纳米粒上的黄芪甲苷和没食子酸，其粒径为267.37～289.14纳米，电动势为31.65～35.49毫伏，黄芪甲苷包封率为85.16％～93.53％，没食子酸包封率为68.63％～76.58％。
2.如权利要求1所述的共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，其特征在于，制备方法包括以下步骤：
3.如权利要求1所述的共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，其特征在于，壳聚糖纳米粒载体和负载黄芪甲苷壳聚糖纳米粒的的制备是利用没食子酸的负电性和壳聚糖的正电性基于正负离子相互作用的离子交联法制备的。
4.如权利要求1所述的共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，其特征在于，使用的没食子酸不仅作为参与离子反应辅助壳聚糖形成壳聚糖纳米载体，也作为形成制剂中的药物，与黄芪甲苷一样进行缓慢释放，参与疾病治疗和辅助增强黄芪甲苷药效。
5.如权利要求1所述的共载黄芪甲苷和没食子酸的纳米缓释制剂，其特征在于，使用右旋糖酐-40作为稳定剂以增强纳米制剂的稳定性，同时使用泊洛沙姆-68作为稳定剂和乳化分散剂，辅助其制剂稳定，促进纳米粒子分散和粒径变小。
6.一种药物，其特征在于：包括如权利要求1至5中任一项所述的纳米缓释制剂和辅料。
