本发明涉及生物,特别是涉及一种黑胶虫清除剂及其应用。
背景技术:
1、在细胞培养过程中,常见高倍显微镜下在原地进行布朗运动的黑色污染物,其形态不规则,初始呈现点状,随着培养时间的增加其形态可以转变为小片絮状。目前,这种成分不明的污染类型被称之为“黑胶虫”污染。黑胶虫可以在一段时间内与细胞共生,并且不会因传代处理而减少,随着污染程度的加重,最终会导致细胞死亡。此种污染的出现给研究人员在细胞培养过程中带来长期且影响巨大的困扰和损失。目前,针对这一常见污染类型已经存在商业化的清除试剂。然而现有的清除试剂具有如下缺点:(1)现有黑胶虫清除剂添加后抑制效果不显著,或仅在细胞传代过程中才具有一定程度的清除效果,这使得其对低密度细胞中黑胶虫的清除应用受限;(2)个别黑胶虫清除剂对细胞的成长存在抑制,并且抑制程度因细胞类型而存在差异;(3)现有黑胶虫清除剂对污染的清除效果不彻底,尤其在黑胶虫污染严重的情况;(4)大多数现有黑胶虫清除剂对细胞密度有要求。本发明拟开发一种新型的黑胶虫清除剂,以提高在不同类型的细胞中对黑胶虫污染的抑制效果,同时确保其不会改变细胞形态且对细胞增殖速率无影响。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种黑胶虫清除剂及其应用,以解决上述现有技术存在的问题。该黑胶虫清除剂对黑胶虫污染的清除效果显著,对细胞的形态及增殖速率无影响,在细胞培养的各个过程均适用,并且不受细胞密度的限制。
2、为实现上述目的,本发明提供了如下方案:
3、本发明提供一种黑胶虫清除剂,包括氯霉素溶液和环丙沙星溶液。
4、进一步地,所述黑胶虫清除剂还包括盐酸金霉素溶液和米诺环素溶液。
5、进一步地,所述氯霉素溶液的溶剂为无水乙醇;所述环丙沙星溶液的溶剂为水。
6、进一步地,所述盐酸金霉素溶液和所述米诺环素溶液的溶剂均为二甲基亚砜。
7、本发明还提供一种组合物在制备黑胶虫清除剂中的应用,所述组合物包括氯霉素和环丙沙星。
8、进一步地,所述组合物还包括盐酸金霉素和米诺环素。
9、本发明还提供上述的黑胶虫清除剂在清除黑胶虫污染中的应用。
10、本发明还提供一种清除黑胶虫污染的方法,包括在细胞培养中,在培养基中添加上述的黑胶虫清除剂,以清除所述黑胶虫污染的步骤。
11、进一步地,当所述细胞为具有tet-on系统的细胞时,在所述培养基中添加的黑胶虫清除剂包括氯霉素溶液和环丙沙星溶液。
12、本发明公开了以下技术效果:
13、本发明提供了一种新型的黑胶虫清除剂,适用于不同类型细胞清楚黑胶虫污染。该黑胶虫清除剂具有如下优势:
14、(1)对于严重的黑胶虫污染情况,该黑胶虫清除剂的清除效果显著;
15、(2)使用该黑胶虫清除剂,对细胞的形态及增殖速率无影响;
16、(3)该黑胶虫清除剂在细胞换液或传代时添加,均具有显著的效果;
17、(4)该黑胶虫清除剂在使用时,对细胞密度没有要求。
1.一种黑胶虫清除剂,其特征在于,包括氯霉素溶液和环丙沙星溶液。
2.根据权利要求1所述的黑胶虫清除剂,其特征在于,所述黑胶虫清除剂还包括盐酸金霉素溶液和米诺环素溶液。
3.根据权利要求1所述的黑胶虫清除剂,其特征在于,所述氯霉素溶液的溶剂为无水乙醇;所述环丙沙星溶液的溶剂为水。
4.根据权利要求2所述的黑胶虫清除剂,其特征在于,所述盐酸金霉素溶液和所述米诺环素溶液的溶剂均为二甲基亚砜。
5.一种组合物在制备黑胶虫清除剂中的应用,其特征在于,所述组合物包括氯霉素和环丙沙星。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述组合物还包括盐酸金霉素和米诺环素。
7.一种如权利要求1-4任一项所述的黑胶虫清除剂在清除黑胶虫污染中的应用。
8.一种清除黑胶虫污染的方法,其特征在于,包括在细胞培养中,在培养基中添加权利要求1-4任一项所述的黑胶虫清除剂,以清除所述黑胶虫污染的步骤。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,当所述细胞为具有tet-on系统的细胞时,在所述培养基中添加权利要求1或3所述的黑胶虫清除剂。