本发明涉及医用材料，具体涉及一种注射用乳化交联透明质酸钠凝胶微球溶胀度的检测方法。
背景技术：
1、注射用乳化交联透明质酸钠凝胶微球是以透明质酸钠为原料，采用乳化交联法制备而来。将透明质酸钠碱性凝胶加入到含乳化剂的油相中，在乳化剂的作用下，降低两相表面张力，从而使透明质酸钠胶体呈微球形态均匀分布在乳状液中。随后加入的交联剂通过三步法与这些胶体颗粒进行交联反应，确保单个透明质酸钠胶体颗粒内部进行均匀和有序的交联反应，且颗粒之间不会产生交联，获得适用于注射使用的透明质酸钠凝胶微球。
2、溶胀是高分子聚合物在溶剂中体积发生膨胀的现象，溶胀度是体现水凝胶亲水性能的重要物理参数。凝胶的溶胀分为两个阶段：第一阶段是溶剂分子钻入凝胶中与大分子相互作用形成溶剂化层，此过程很快伴有放热效应和体积收缩现象(指凝胶体积的增加比吸收的液体体积小)。第二阶段是液体分子的继续渗透，这时凝胶体积大大增加，可达干燥物的几倍甚至几十倍。定义溶胀度为一定温度下，单位重量或体积的干燥交联凝胶所能吸收液体的极限量。因此，交联透明质酸钠凝胶的饱和水凝胶的含水量多少与交联透明质酸钠凝胶三维网格的大小呈正相关。在生产工艺过程中，通过溶胀度以了解和评估什么溶剂和体系会对透明质酸钠凝胶微球产生何种影响。
3、目前常用的透明质酸钠凝胶溶胀度的检测方法是通过称重法来进行计算。例如现有行业标准yy/t 0962-2021中介绍的交联透明质酸钠溶胀度的检测方法和美国专利(us005496890a)中公开了一种测定高吸水性聚合物的溶胀度检测方法，以上两种方法均采用称重法来计算样品溶胀度，但操作方法中除去多余水分这一步骤，因不同产品性状、人员操作差异等因素，导致检测结果受主观影响较大，计算结果不准确。且当待测物为微球颗粒状时，需要根据待测物粒径大小选择合适规格的的筛网。此外，中国专利(201710106267.2)中公开了一种固体粉末溶胀度检测方法，其使用了超滤离心管进行离心处理去除溶胀物中游离的水分，最后通过溶胀后待测物的重量计算得出待测物的溶胀度。该方法中选用了能够特定截留一定分子量的超滤膜和超滤离心管，检测成本较高。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种注射用乳化交联透明质酸钠凝胶微球溶胀度的检测方法，测量准确度高、人为主观误差小、重复性好，且降低检测成本。本发明是通过以下技术手段实现上述技术目的：
2、一种检测注射用乳化交联透明质酸钠凝胶微球溶胀度的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
3、(1)通过干燥失重法计算出待测样品的干燥失重率；
4、(2)将待测样品在装有磷酸盐溶液和甲苯胺蓝染色液的量筒中充分溶胀，待样品溶胀平衡后，肉眼平行观察水相和凝胶的分层界面的液位刻度值，通过记录待测样品溶胀后的体积，进而转化计算得出待测样品的溶胀度。
5、在采用上述技术方案的基础上，本发明还可采用以下进一步的技术方案，或对这些进一步的技术方案组合使用：
6、步骤(1)所述的通过干燥失重法计算出待测样品的干燥失重率具体为：
7、取待测样品，混合均匀，使其呈单分散的透明质酸钠颗粒状微球；精密称取待测样品适量，置于干燥至恒重的扁形称量瓶中，待测样品平铺厚度不可超过5mm；干燥至恒重；并经公式(a)转化计算得到待测样品的干燥失重率；干燥温度可选择为105℃；
8、
9、公式(a)中，
10、w1——为待测样品的重量，单位为克；
11、w2——为称量瓶恒重的重量，单位为克；
12、w3——为称量瓶和待测样品干燥恒重后的总重量，单位为克。
13、步骤(2)具体为：
14、(1)精密称取待测样品置于10ml量筒，立即手动摇晃，使样品粉末尽量分散；量筒中预先加入磷酸盐溶液和甲苯胺蓝染色液；
15、(2)在量筒口处盖上多层封口膜，涡旋混匀后室温下静置；
16、(3)重复步骤(2)涡旋混匀操作，至少重复两次，使待测样品充分混匀，浸润彻底；
17、(4)加入磷酸盐溶液至量筒口处，用封口膜封盖量筒口，上下颠倒混匀；
18、(5)将量筒静置于2-8℃冰箱中溶胀直至分层明显(静置时间一般为1-3天，具体静置时间根据待测样品粒径大小而定)。从冰箱中拿出量筒，肉眼平行观察水相和凝胶的分层界面，读取分层界面的刻度并记录。并经公式(b)转化计算得到待测样品的溶胀度；
19、
20、公式(b)中，
21、s——为溶胀度；
22、v——为待测样品溶胀后凝胶体积，单位为毫升；
23、1.01——为凝胶的密度，单位为克每毫升；
24、m——为待测样品的质量，单位为克；
25、f——为待测样品的干燥失重值，％。
26、步骤(1)中待测样品的质量优选量为0.045g-0.055g。
27、步骤(1)中所述的量筒中预先加入磷酸盐溶液体积优选值为4-5ml；甲苯胺蓝染色液浓度优选值为0.5％，体积优选值为0.045ml-0.055ml。
28、在一种优选实施方式中，步骤(2)中需准备若干个洁净干燥的10ml量筒，在量筒中预先加入4-5ml磷酸盐溶液和0.05ml的0.5％甲苯胺蓝染色液。
29、在一种优选实施方式中，步骤(2)中所述的磷酸盐溶液其制备方法为：分别称取磷酸二氢钠0.4g、磷酸氢二钠0.9g、氯化钠7.8g，用纯化水溶解后，再定容至1000ml，摇匀。
30、在一种优选实施方式中，步骤(2)中所述的0.5％甲苯胺蓝染色液其制备方法为：称取甲苯胺蓝0.5g，用9g/l氯化钠溶液搅拌溶解，并定容至100ml中，搅拌溶解。
31、在一种优选实施方式中，步骤(2)中所述的使待测样品在量筒中充分溶胀具体操作为：在量筒口处盖上多层封口膜，涡旋混匀约30s后室温下静置20-30分钟。重复上述涡旋混匀后室温下静置操作，至少重复两次，使待测样品充分混匀，浸润彻底。
32、与现有技术相比，本发明有益效果在于：
33、1.本发明通过待测样品溶胀平衡后的体积转化计算其溶胀前后的质量变化值，进而得到待测样品的溶胀度。减少了称重法在人为操作差异上带来的影响。
34、2.本发明所述的检测方法中加入了增强辨识方案，通过甲苯胺蓝染色液提高了水相和凝胶的分层界面的辨识度，更易于观察待测样品溶胀后的体积。
35、3.本发明方法中将待测样品的干燥失重率引入溶胀度检测公式中，避免了同一批次样品在进行平行样检测或者复测工作中的多次样品恒重，减少了工作量和检测时间。
36、4.本发明方法选用磷酸盐溶液作为乳化交联透明质酸钠凝胶微球的溶胀介质，充分考虑了透明质酸钠凝胶微球在生产工艺平衡液即为磷酸盐溶液，排除了因样品内外渗透压差异而产生的膨胀影响。
37、5.本发明所述的检测方法所用检测用具简易，操作简便，实用性强。不仅突破了溶胀度测量需要专用的不同规格的筛网、超滤离心管的局限性，减少了检验成本，且与采用行业标准yy/t 0962-2021和美国专利(专利公布序号：us005496890a)中公开的检测方法相比本发明结果误差更小，确保了检验结果的准确性和重复性、具有很高的实际意义和经济意义。
1.一种检测注射用乳化交联透明质酸钠凝胶微球溶胀度的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的通过干燥失重法计算出待测样品的干燥失重率具体为：
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)具体为：
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(1)中待测样品的质量优选量为0.045g-0.055g。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的量筒中预先加入磷酸盐溶液体积优选值为4-5ml；甲苯胺蓝染色液浓度优选值为0.5％，体积优选值为0.045ml-0.055ml。
6.根据权利要求1-5任意一项所述的一种检测注射用乳化交联透明质酸钠凝胶微球溶胀度的方法，其特征在于，所述的磷酸盐溶液的制备方法为：分别称取磷酸二氢钠0.4g、磷酸氢二钠0.9g、氯化钠7.8g，用纯化水溶解后，再定容至1000ml，摇匀。
7.根据权利要求3所述的检测注射用乳化交联透明质酸钠凝胶微球溶胀度的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的甲苯胺蓝染色液的制备方法为：称取甲苯胺蓝0.5g，用9g/l氯化钠溶液搅拌溶解后定容至100ml中，摇匀。
