本申请涉及生物,具体涉及一种固定化乳酸菌及其制备方法。
背景技术:
1、传统的固定化乳酸菌的方法主要为海藻酸钙法,将菌种移入种子培养基,于37℃下静置培养20h,去除菌液,离心收集菌体后加入到海藻酸钠溶液中,搅拌均匀,滴入氯化钙溶液,得到凝胶珠,于4℃固化4h后制得固定化乳酸菌。由于从种子培养基中离心分离的菌体中含有乳酸钙,在将菌体与海藻酸钠溶液混合的过程中,发生明显的凝胶作用,该方法实际操作起来难以用于发酵的固定化乳酸菌。
技术实现思路
1、基于此,有必要提供一种固定化乳酸菌的制备方法,该方法无需去除培养菌体过程中产生的钙离子,所制备的固定化乳酸菌可以正常发酵产乳酸且发酵周期大大缩短,在发酵完成后进行简单抽滤即可重复使用。
2、具体技术方案如下:
3、一种固定化乳酸菌,所述固定化乳酸菌包括乳酸菌和硅藻土,所述乳酸菌通过交联剂固定在所述硅藻土上,所述交联剂包括丙烯酸甲酯改性的聚乙烯亚胺和戊二醛。
4、在其中一个实施例中,在所述固定化乳酸菌中,所述乳酸菌、所述硅藻土和所述交联剂的质量比为1:(0.025-0.125):(0.005-0.05)。
5、可选地,在所述固定化乳酸菌中,所述乳酸菌、所述硅藻土和所述交联剂的质量比为1:(0.05-0.1):(0.02-0.04)。
6、在其中一个实施例中,所述丙烯酸甲酯改性的聚乙烯亚胺和戊二醛的质量比为1:(0.5~1.5)。
7、在其中一个实施例中,丙烯酸甲酯改性的聚乙烯亚胺的制备包括向聚乙烯亚胺溶液中加入丙烯酸甲酯制备得到;
8、可选地,所述聚乙烯亚胺溶液中聚乙烯亚胺的体积分数为50%-100%。
9、可选地,所述聚乙烯亚胺溶液与所述丙烯酸甲酯的体积比为(100-10):1。
10、可选地,向聚乙烯亚胺溶液中加入丙烯酸甲酯的反应温度为55℃-75℃。
11、所述的固定化乳酸菌的制备方法,所述制备方法包括:
12、制备所述乳酸菌的菌体悬液;
13、向所述菌体悬液中加入所述硅藻土,混匀,加入所述丙烯酸甲酯改性的聚乙烯亚胺,混匀,加入所述戊二醛,保温反应,制备固定化乳酸菌。
14、在其中一个实施例中,所述菌体悬液中湿菌体的浓度为(0.05-0.15)g/g。
15、在其中一个实施例中,所述戊二醛是通过配制为0.2%w/w~2%w/w的戊二醛溶液后采用滴加的方式加入。
16、在其中一个实施例中,所述保温反应的时间为4h~6h,所述保温反应的温度为40℃~60℃。
17、在其中一个实施例中,所述保温反应后还包括离心的步骤。
18、在其中一个实施例中,所述乳酸菌的菌体悬液的制备步骤包括:
19、培养乳酸菌获得种子液;
20、将所述种子液经离心,得到湿菌体;
21、将所述湿菌体重悬,获得所述乳酸菌的菌体悬液。
22、所述的固定化乳酸菌在发酵乳酸中的应用。
23、相对于传统技术,本申请具备如下有益效果:
24、本申请提供的固定化乳酸菌是采用硅藻土作为载体,通过丙烯酸甲酯改性的聚乙烯亚胺和戊二醛作为交联剂将乳酸菌固定在硅藻土上制备得到,其制备操作简单,无需进行钙离子的去除,在发酵时,可以大大缩短发酵周期,提高生产效率,在发酵完成后容易分离,有利于得到不含菌体的发酵液,方便后提取工艺实施,且分离后的固定化乳酸菌可重复再利用,通过循环套用固定化菌体,可以节省菌体生长所需的糖、氮源等各种生长因子。
1.一种固定化乳酸菌,其特征在于,所述固定化乳酸菌包括乳酸菌和硅藻土,所述乳酸菌通过交联剂固定在所述硅藻土上,所述交联剂包括丙烯酸甲酯改性的聚乙烯亚胺和戊二醛。
2.根据权利要求1所述的固定化乳酸菌,其特征在于,在所述固定化乳酸菌中,所述乳酸菌、所述硅藻土和所述交联剂的质量比为1:(0.025-0.125):(0.005-0.05);
3.根据权利要求1或2所述的固定化乳酸菌,其特征在于,所述丙烯酸甲酯改性的聚乙烯亚胺和戊二醛的质量比为1:(0.5~1.5)。
4.根据权利要求1或2所述的固定化乳酸菌,其特征在于,丙烯酸甲酯改性的聚乙烯亚胺的制备包括向聚乙烯亚胺溶液中加入丙烯酸甲酯制备得到;
5.权利要求1~4任一项所述的固定化乳酸菌的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述菌体悬液中湿菌体的浓度为(0.05-0.15)g/g;和/或,
7.根据权利要求5-6任一项所述的制备方法,其特征在于,所述保温反应的时间为4h~6h,温度为40℃~60℃。
8.根据权利要求5-6任一项所述的制备方法,其特征在于,所述保温反应后还包括离心的步骤。
9.根据权利要求5-6任一项所述的制备方法,其特征在于,所述乳酸菌的菌体悬液的制备步骤包括:
10.权利要求1-4任一项所述的固定化乳酸菌在发酵乳酸中的应用。