本公开涉及生物，特别地，本公开涉及一种能够支持单个造血干祖细胞同时向四种不同细胞分化的液体培养基。
背景技术：
1、造血干细胞(hsc)和造血祖细胞(hpc)具备向不同造血谱系分化的能力。单细胞克隆形成实验是检测待检造血干祖细胞多向分化潜能的重要检测方法之一。该方法由于操作简便，耗时较短，在造血系统细胞生物学研究中被广泛应用。hspc在体外可形成包含粒细胞(neutrophil，n)、单核和/或巨噬细胞(monocyte或macrophage，m)、有核红细胞(erythroblast，e)和巨核细胞(megakaryocyte,mk)的克隆。
2、在造血干祖细胞的研究中，造血干祖细胞体外多向分化能力的检测实验需要通过两种不同体系对造血干祖细胞进行培养，一种是可以检测nme分化能力的培养体系，需要使用fbs作为添加物，形成nme克隆；另一种是检测mk分化能力的培养体系，需要在以bsa作为添加物的无血清培养体系中形成。并且以上培养体系均需要添加凝胶形成剂以实现半固体条件下的培养。目前还未见报道可以同时支持造血干祖细胞向上述四个不同谱系分化能力，即形成nmemk克隆的液体培养方法。因此，为了降低成本和进一步提高效率，亟待解决上述技术问题。
技术实现思路
1、解决的技术问题：
2、本发明的一个方面，是针对现有技术中缺少能够支持造血干祖细胞同时向四种不同细胞分化的液体培养基的问题，提供了一种用于造血干祖细胞克隆形成的培养基。
3、提供的技术方案：
4、一种用于造血干祖细胞克隆形成的培养基，所述培养基中包含人血清白蛋白和/或聚乙烯醇，不包含牛血清白蛋白、凝胶形成剂和血清。
5、在本公开的一些实施方式中，上述造血干祖细胞可以包括造血干细胞(hsc)和/或造血祖细胞(hpc)。可以为人造血干祖细胞，也可以为其他哺乳动物的造血干祖细胞。所述其他哺乳动物的造血干祖细胞优选为小鼠造血干祖细胞。
6、在本公开的一些实施方式中，上述凝胶形成剂可以为选自海藻盐、明胶、胶原蛋白、卡波姆、黄原胶、瓜尔胶、卡拉胶、聚丙烯酸、纤维素衍生物、透明质酸中的一种或几种。
7、作为优选，在本公开的一些实施方式中，上述凝胶形成剂为纤维素衍生物。进一步地，所述纤维素衍生物可以为羧甲基纤维素钠、甲基纤维素或羟丙甲纤维素。
8、在本公开的一些实施方式中，上述造血干祖细胞为人造血干祖细胞，上述培养基中还可以包含hscf、hil-3、hepo、hg-csf、hgm-csf和hil-6。
9、在本公开的一些实施方式中，上述造血干祖细胞为小鼠造血干祖细胞，上述培养基中还可以包含小鼠scf、小鼠il-3、hepo和小鼠tpo。
10、在本公开的一个实施方式中，上述培养基由1×基础培养基、0.5mg/ml人血清白蛋白、10mm hepes缓冲液、0.1mm naa、1×its-x、0.5mg/ml psg、0.5mg/ml l-glu、0.055mm 2-me、1mm hydrocortisone、50ng/ml human scf、0.2mm lpag、10ng/ml human il-3、1iu/mlhuman epo、2ng/ml human g-csf、10ng/ml human gm-csf和10ng/ml human il-6组成。
11、在本公开的另一个实施方式中，上述培养基由1×基础培养基、0.5mg/ml人血清白蛋白或0.1％聚乙烯醇、10mm hepes缓冲液、0.1mm naa、1×its-x、0.5mg/ml psg、0.5mg/mll-glu、0.1mm 2-me、50ng/ml mouse scf、50ng/ml mouse tpo、10ng/ml mouse il-3和1iu/ml human epo组成。其中，上述0.1％聚乙烯醇为质量体积百分比(w/v)为0.1％的聚乙烯醇。
12、在本公开中，上述基础培养基可以为任意合适的培养基，例如，在本公开的一些实施方式中，所述基础培养基为imdm、f12、rpmi-1640、dmem、mem，等。
13、本公开的另一个方面，是提供了上述培养基在检测造血干祖细胞的多向分化潜能性中的用途。
14、本公开的另一个方面，是提供了一种单细胞克隆形成实验方法，将造血干祖细胞置于上述培养基中进行细胞培养，至所述造血干祖细胞分化形成为粒细胞、单核或巨噬细胞、有核红细胞和巨核细胞后，对单个分化后的细胞形成的克隆进行检测。
15、有益效果：
16、利用本公开提供的液体培养基对造血干祖细胞进行培养，能够同时高效诱导其向粒细胞、单核/巨噬细胞、有核红细胞、巨核细胞的分化，与现有技术中诱导造血干祖细胞克隆形成的培养基相比，具有操作简便、效果稳定、经济适用等优势，具有良好的应用前景。
1.一种用于造血干祖细胞克隆形成的培养基，其特征在于，所述培养基中包含人血清白蛋白和/或聚乙烯醇，不包含牛血清白蛋白、凝胶形成剂和血清。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述凝胶形成剂为选自海藻盐、明胶、胶原蛋白、卡波姆、黄原胶、瓜尔胶、卡拉胶、聚丙烯酸、纤维素衍生物、透明质酸中的一种或几种。
3.根据权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述凝胶形成剂为纤维素衍生物。
4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，所述纤维素衍生物为羧甲基纤维素钠、甲基纤维素或羟丙甲纤维素。
5.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述造血干祖细胞为人造血干祖细胞，所述培养基中还包含hscf、hil-3、hepo、hg-csf、hgm-csf和hil-6。
6.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述造血干祖细胞为小鼠造血干祖细胞，所述培养基中还包含小鼠scf、小鼠il-3、hepo和小鼠tpo。
7.根据权利要求5所述的培养基，其特征在于，所述培养基由1×基础培养基、0.5mg/ml人血清白蛋白、10mm hepes缓冲液、0.1mm naa、1×its-x、0.5mg/ml psg、0.5mg/ml l-glu、0.055mm 2-me、1mm hydrocortisone、50ng/ml human scf、0.2mm lpag、10ng/ml humanil-3、1iu/ml human epo、2ng/ml human g-csf、10ng/ml human gm-csf和10ng/ml humanil-6组成。
8.根据权利要求6所述的培养基，其特征在于，所述培养基由1×基础培养基、0.5mg/ml人血清白蛋白或0.1％聚乙烯醇、10mm hepes缓冲液、0.1mm naa、1×its-x、0.5mg/ml psg、0.5mg/ml l-glu、0.1mm 2-me、50ng/ml mouse scf、50ng/ml mouse tpo、10ng/ml mouseil-3和1iu/ml human epo组成。
9.如权利要求1～8任意一项所述的培养基在检测造血干祖细胞的多向分化潜能性中的用途。
10.一种单细胞克隆形成实验方法，其特征在于，将造血干祖细胞置于如权利要求1～8任意一项所述的培养基中进行细胞培养，至所述造血干祖细胞分化形成为粒细胞、单核或巨噬细胞、有核红细胞和巨核细胞后，对单个分化后的细胞形成的克隆进行检测。
