一种用于检测乳腺癌的血小板标志物及检测试剂盒

allin2026-02-13  27


本发明属于乳腺癌检测领域,具体涉及一种用于检测乳腺癌的血小板标志物及检测试剂盒。


背景技术:

1、乳腺癌(breast cancer, bc)在全球范围内女性恶性肿瘤中发病率及死亡率高居第一。我国乳腺癌的发病率及死亡率也在逐年提高,对于乳腺癌进行早筛、早诊、早治变得尤为重要。提高早期诊断率是从根本上改善乳腺癌预后的关键途径。现有的乳腺癌标志物,如ca153、cea、ca125等,在乳腺癌早期的检测敏感性较低,尤其是对于局部乳腺癌患者,这些标志物的表达水平可能不会明显升高。此外,这些标志物在一些良性疾病中(如炎症性疾病)也可能升高,导致特异性不足。而且乳腺癌是高度异质性的疾病,不同亚型的乳腺癌在基因、分子特征上差异显著。单一的肿瘤标志物很难反映出肿瘤的整体特征或适用于所有乳腺癌患者。超声和钼靶检查(乳腺x线摄影)是当前临床用于乳腺癌筛查和早期发现的重要手段。尽管这些技术在乳腺癌检测中的应用广泛,尤其对于早期发现肿瘤非常有效,但它们在偏远地区或医疗技术较落后的地区不适用。且超声和钼靶检查的费用相对较高,尤其是对于频繁的筛查或早期监测。

2、无法有效早期发现癌症是目前乳腺癌标志物的一大挑战。基于上述问题,寻找新的、更便捷且高效的乳腺癌肿瘤标志物显得尤为重要。

3、故基于此,提出本发明的技术方案。


技术实现思路

1、本发明的技术构思为:血小板是血液中除红细胞外第二大数目的细胞类型,不仅在止血、血栓形成和炎症过程中扮演关键角色,还参与了癌症相关过程,如上皮-间质转化、转移、血管生成和免疫逃避。液体活检技术近年来受到越来越多的关注,成为了一种新兴的、非侵入性的诊断和监测工具。而在众多的生物标志物中,血小板因其独特的生物学特性和在癌症中的多重作用,逐渐展现出其作为液体活检材料的巨大潜力。首先,在肿瘤发生过程中,血小板的形态、mrna转录谱会发生改变,可作为肿瘤发生发展的标志物;其次,血小板在外周血中的高丰度和稳定性使得其易于获取和处理,能够为癌症相关分子分析提供可靠的来源。相比其他检测材料,如循环肿瘤dna或外泌体,血小板的样本处理过程相对简单,且血小板在血液中的稳定性能够确保标志物的完整性,减少检测中的干扰因素。通过对血小板内部rna和蛋白质的分析,研究者能够捕捉肿瘤的分子特征,甚至发现传统组织活检难以检测的突变或标志物,从而实现更加精准的癌症管理。血小板的这些特性使其成为液体活检领域中一个有前景的工具,有助于推动个体化医疗的发展,为患者提供更为精准和高效的癌症管理策略。

2、为了解决现有技术存在的问题,本发明提供了一种用于检测乳腺癌的血小板标志物,所述血小板标志物包括znf185、dnajc8及vcl。

3、基于相同的技术构思,本发明的再一方案是,提供一种血小板标志物在制备用于检测乳腺癌的试剂盒中的用途,所述血小板标志物包括znf185、dnajc8及vcl。

4、基于相同的技术构思,本发明的再一方案是,提供一种用于乳腺癌的检测试剂盒,所述检测试剂盒包括用于检测血小板标志物的检测试剂,所述血小板标志物包括znf185、dnajc8及vcl。

5、优选地,所述检测试剂为引物,所述引物用于检测znf185、dnajc8及vcl的表达水平。

6、优选地,所述检测试剂盒还包括待测样本cdna、dna聚合酶、四种脱氧核苷酸三磷酸、sybr green i、mg2+、缓冲液、无酶水、edta试剂、trizol试剂和内参基因gapdh、β-actin的引物。

7、优选地,所述待测样本为人血液样本。

8、在本发明中,以znf185、dnajc8及vcl组合基因作为乳腺癌诊断新靶点通过以下方法进行:

9、(1)对患者的血小板样本采集、分离和提取;

10、(2)对血小板rna提取与质控;

11、(3)对血小板样本rna-seq建库及znf185、dnajc8及vcl基因表达量的测序分析;

12、(3)对额外的健康人及乳腺癌患者进行znf185、dnajc8及vcl基因表达量的测定;

13、(5)rt-qpcr方法对健康人及乳腺癌患者进行验证。

14、本发明的有益效果为:

15、通过对健康个体和乳腺癌患者的血小板转录组进行分析,发现znf185、dnajc8及vcl基因在癌症患者中具有显著差异,并且由上述3个基因构建的诊断模型展现出卓越的性能。该模型不仅在区分乳腺癌患者与非癌症个体时表现出高灵敏度和特异性,还在独立验证集中的准确率达到了95%以上,显示出其在临床应用中的巨大潜力。本发明主要检测患者外周血中血小板znf185,dnajc8及vcl基因的表达,来判断乳腺癌的发生情况,以达到早筛的目的。而且这些基因在乳腺癌机制研究发生中的分子机制仍未被充分揭示,诊断试剂的开发中尚未得到应用,这些基因的组合有望为乳腺癌的诊断提供新的策略。

16、即本发明通过大样本的临床研究构建了基于血小板znf185、dnajc8及vcl一组基因的乳腺癌诊断应用,克服了当前乳腺癌标志物的诸多局限,开辟了乳腺癌早期诊断探索的新模式,为从根本上改善乳腺癌早诊困境及乳腺癌患者预后提供了可能性,有利于临床推广应用。



技术特征:

1.一种用于检测乳腺癌的血小板标志物,其特征在于,所述血小板标志物包括znf185、dnajc8及vcl。

2.血小板标志物在制备用于检测乳腺癌的试剂盒中的用途,其特征在于,所述血小板标志物包括znf185、dnajc8及vcl。

3.一种用于乳腺癌的检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒包括用于检测血小板标志物的检测试剂,所述血小板标志物包括znf185、dnajc8及vcl。

4.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂为引物,所述引物用于检测znf185、dnajc8及vcl的表达水平。

5.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒还包括待测样本cdna、dna聚合酶、四种脱氧核苷酸三磷酸、sybr green i、mg2+、缓冲液、无酶水、edta试剂、trizol试剂和内参基因gapdh、β-actin的引物。

6.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其特征在于,所述待测样本为人血液样本。


技术总结
本发明属于乳腺癌检测领域,具体涉及一种用于检测乳腺癌的血小板标志物及检测试剂盒。本发明首先通过健康个体和乳腺癌患者的血小板进行转录组测序,然后通过差异表达分析首次识别出在乳腺癌患者血小板中特异性差异表达的基因,筛选出ZNF185、DNAJC8及VCL基因。基于三种基因的mRNA表达水平构建了logistic回归模型,在训练集的受试者工作特征曲线分析中,曲线下面积高达0.987,而在验证集中,AUC值高达到1。本发明主要通过液体活检方式,明确血小板基因ZNF185、DNAJC8及VCL的表达水平在诊断乳腺癌的应用,用于预测乳腺癌的发生,旨在鉴定乳腺癌的一种新的标志物,基于此制备乳腺癌诊断试剂盒。

技术研发人员:刘小伟,王鑫,石虎兵,敬静,余静
受保护的技术使用者:四川大学华西医院
技术研发日:
技术公布日:2024/10/31
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