本发明涉及生物，特别是涉及一种检测阴道炎相关微生物的引物组合及其应用。
背景技术：
1、生殖道感染一直是国内外关注生殖健康的问题，常见生殖道感染包括慢性盆腔炎、慢性宫颈炎、外阴炎和阴道炎等，其中阴道炎是十分常见且容易反复感染的一种疾病。目前临床上常见的阴道炎包括细菌性阴道炎、真菌性阴道炎、滴虫性阴道炎等。
2、细菌性阴道炎(bacterial vaginosis，bv)，是一种育龄妇女常见的生殖道感染疾病之一，是由于阴道微生物环境菌群与分泌物生化性质变化所引起的一种阴道炎症。目前对于阴道炎的治疗主要是采用口服和外用抗生素，但是该方法只能抑制有害菌的生长，对症状有初步的缓解。一旦停药，就很有可能再次产生阴道炎症。这也是阴道炎复发率高的原因。中华医学会、中国医师协会共同指出：阴道感染的本质是微生态失衡，阴道感染的终极治疗目标是恢复阴道微生态平衡。健康女性阴道菌群主要以乳杆菌为主，占比达到95％以上，主要是詹氏乳杆菌、卷曲乳杆菌、格式乳杆菌和惰性乳杆菌。临床研究显示，乳酸杆菌植入阴道后可黏附定植于阴道上皮细胞，并通过分解糖原产生乳酸，维持阴道酸性环境，同时产生h2o2、细菌素、溶菌酶等物质抑制致病菌的生长。nugent评分法是目前临床中诊断bv的一种主要手段，具有较高的灵敏度，通过对阴道中的微生态平衡进行评价。但nugent评分法由于过分依赖实验人员的经验判断，具有一定的误诊或漏诊率。
3、真菌性阴道炎(vulvovaginal candidiasis，vvc)患病率可达40％，在各种阴道炎中位居第2位，仅次于细菌性阴道炎。通常将念珠菌性阴道炎分为非复杂性念珠菌性阴道炎和复杂性念珠菌性阴道炎，前者约占90％。非复杂性念珠菌性阴道炎是指每年发病次数小于或等于3次，主要由白色念珠菌感染诱发的念珠菌性阴道炎。在所有念珠菌性阴道炎患者中，70％-90％由白色念珠菌感染所致，光滑念珠菌感染占10％-20％，其余为病原性真菌克柔念珠菌、近平滑假丝酵母菌、热带念珠菌等所致。真菌培养作为真菌性阴道炎的确诊金标准，主要是通过阴道分泌物在沙氏培养基上是否可以培养获得真菌来进行诊断。分泌物在沙氏培养基上培养和进行真菌检测需要耗时2-4d，如果在培养基中加入显色物质，可缩短检测耗时。但真菌培养法并不能对真菌进行定量，鉴于健康女性的阴道中也具有少量的念珠菌，因此该方法会造成一定的误诊率。
4、滴虫性阴道炎(trichomonas vaginosis，tv)，是由寄生性阴道毛滴虫感染所致，患病人数约占阴道炎患者的三分之一。滴虫性阴道炎好发于25-46岁女性，在25-34岁女性中的发病率最高，可达62.5％。与细菌性阴道炎和念珠菌性阴道炎相比，滴虫性阴道炎的临床症状和体征更加缺乏特异性，因此依赖临床症状和体征诊断滴虫性阴道炎，极不可靠。培养法被认为检测滴虫的金标准，灵敏度和特异性分别可达到95％和100％。然而，实际工作中由于检测耗时太长而极少使用培养进行滴虫检测。
5、目前，临床主要通过分析样本内的过氧化氢浓度、线索细胞浓度、白细胞计数、霉菌培养、滴虫培养、唾液酸酐酶以及白细胞酯酶等指标对患者阴道微生态平衡进行检测。主观性较强，对检验人员经验要求高，检查敏感性和特异性较低，尤其对混合感染的检测，更易造成漏检或误检。因此，本领域需求一种能够简单、快速、特异性强、灵敏度高地检测上述不同阴道炎相关微生物的产品。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种检测阴道炎相关微生物的引物组合及其应用，以解决上述现有技术存在的问题。该引物组合可以对与阴道炎相关微生物的多种靶标同时进行检测，解决了既往诊断阴道炎的主观性较大以及显微镜检查方法敏感性和特异性较低等问题。
2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
3、本发明提供一种检测阴道炎相关微生物的引物组合，包括16s rdna的通用引物1350f/1492r、检测乳杆菌(lactobacillus)的特异性引物lac-f/r、检测惰性乳酸杆菌(l.iners)的特异性引物li-f/r、检测加德纳菌(gardnerella vaginalis)的特异性引物gar-f/r、检测普雷沃氏菌(prevotella)的特异性引物pre-f/r、检测阿托波氏菌(atopobium vaginae)的特异性引物ato-f/r、18s rdna的通用引物18s-f/r、检测白色念珠菌(candida albicans)的特异性引物can-f/r和检测阴道毛滴虫(trichomonasvaginalis)的特异性引物tri-f/r，各引物的核苷酸序列如下表所示：
4、
5、
6、本发明还提供上述的引物组合在制备检测阴道炎相关微生物的产品中的应用。
7、进一步地，所述产品为试剂或试剂盒。
8、本发明还提供一种检测阴道炎相关微生物的产品，所述产品包括上述的引物组合。
9、进一步地，所述产品为试剂或试剂盒。
10、进一步地，所述产品还包括核酸释放试剂和核酸提取试剂。
11、进一步地，所述产品为荧光定量pcr检测产品。
12、进一步地，所述荧光定量pcr检测产品还包括tb green premix ex taq、质粒标准品、细菌基因组dna和不含核酸酶的水。
13、本发明公开了以下技术效果：
14、本发明提供了一种检测阴道炎相关微生物的引物组合，该引物组合可以对与阴道炎相关微生物的多种靶标同时进行检测，解决了既往诊断阴道炎的主观性较大以及显微镜检查方法敏感性和特异性较低等问题。利用本发明提供的引物组合，能够简单、快速地检测不同的阴道相关微生物，不仅可以为后续治疗提供针对性的策略，而且灵敏度高，特异性好。
1.一种检测阴道炎相关微生物的引物组合，其特征在于，包括16s rdna的通用引物1350f/1492r、检测乳杆菌(lactobacillus)的特异性引物lac-f/r、检测惰性乳酸杆菌(l.iners)的特异性引物li-f/r、检测加德纳菌(gardnerella vaginalis)的特异性引物gar-f/r、检测普雷沃氏菌(prevotella)的特异性引物pre-f/r、检测阿托波氏菌(atopobium vaginae)的特异性引物ato-f/r、18s rdna的通用引物18s-f/r、检测白色念珠菌(candida albicans)的特异性引物can-f/r和检测阴道毛滴虫(trichomonasvaginalis)的特异性引物tri-f/r，各引物的核苷酸序列如下表所示：
2.一种如权利要求1所述的引物组合在制备检测阴道炎相关微生物的产品中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品为试剂或试剂盒。
4.一种检测阴道炎相关微生物的产品，其特征在于，所述产品包括权利要求1所述的引物组合。
5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述产品为试剂或试剂盒。
6.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述产品还包括核酸释放试剂和核酸提取试剂。
7.根据权利要求6所述的产品，其特征在于，所述产品为荧光定量pcr检测产品。
8.根据权利要求7所述的产品，其特征在于，所述荧光定量pcr检测产品还包括tbgreen premix ex taq、质粒标准品、细菌基因组dna和不含核酸酶的水。
