本发明属于疫苗制备，尤其涉及弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株、其构建方法与应用。
背景技术：
1、弓形虫病是一种普遍存在的人畜共患寄生虫病，几乎可以感染包括人类在内的所有温血动物。人和动物主要通过摄入猫排泄物中的卵囊、包囊或通过先天性途径感染弓形虫。免疫功能正常的个体通常无症状，但免疫功能低下的宿主感染原发性毒力虫株会引发严重的弓形虫病，尤其是孕妇易发生流产或胎儿畸形。弓形虫感染可引发弓形虫脑炎，主要包括头痛、嗜睡、身体不协调、偏瘫、记忆力丧失、痴呆等症状。除在脑组织中形成包囊外，弓形虫最常感染的器官还有肺、眼睛、心脏。目前，弓形虫仍然是全球畜牧业发展和公共卫生安全的重要人兽共患病原。
2、弓形虫因具有错综复杂的生命周期和中间宿主以及对宿主免疫系统的逃避，使弓形虫病有较大的防控难度。虽然乙胺嘧啶和磺胺嘧啶的联合治疗已被证明在治疗速殖子方面最有效，但药物干预往往会带来各种不良反应，不能完全根除缓殖子，从而促进潜伏感染和药物残留。开发有效的疫苗已成为防控弓形虫病的主要策略。
3、迄今为止，研究人员已经研发了许多弓形虫疫苗，包括核酸疫苗、蛋白质疫苗、纳米疫苗、基于载体的活疫苗和减毒活疫苗。其中，减毒活疫苗可以模拟宿主体内寄生虫感染的整个过程，刺激宿主的免疫系统提供有效的免疫保护。弓形虫活疫苗，包括虫株s48、t-263和ts-4，已被证明可增强宿主对抗弓形虫感染的免疫力。值得注意的是，t-263虫株可激发终末宿主猫产生强大的免疫反应，特别是可有效防止卵囊脱落。同时，接种s48虫株可作为预防绵羊先天性弓形虫病的措施，同时减轻肉制品中的弓形虫载量，并加强食品安全。目前，源自s48虫株谱系的是新西兰和英国等国家唯一获得商业认可的疫苗。然而，s48虫株存在突变和致病性恢复的风险。尽管上述疫苗类型取得了相当大的进展，但减毒弓形虫疫苗尚未完全消除组织包囊和根除弓形虫病。因此，研制有效、安全、持久的抗弓形虫感染疫苗对于控制弓形虫病非常必要，而商业减毒活疫苗是弓形虫病疫苗研发的一个重点。
技术实现思路
1、本发明提供了一种弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株在制备抗弓形虫感染药物中的应用。
2、进一步地，所述弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株是由pruδku80虫株改造获得的。
3、更进一步地，所述弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株是利用crispr-cas9技术敲除pruδku80中的gra72基因获得的。
4、更进一步地，所述的疫苗为弓形虫pruδgra72弱毒疫苗。
5、本发明又提供了一种弓形虫弱毒疫苗，其有效成分包括弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株。
6、进一步地，所述弓形虫弱毒疫苗中还包括疫苗佐剂。
7、本发明又提供了一种弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株的构建方法，所述构建方法为通过敲除pruδku80中的gra72基因以获得pruδgra72弱毒疫苗株。
8、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
9、本发明提供的弓形虫基因缺失株pruδgra72是一种潜在的弓形虫减毒活疫苗虫株，能引起小鼠强烈而持续的以th1型为主的免疫反应，pruδgra72免疫可长期保护小鼠免受毒性较低的速殖子(pys和pru)和pru包囊的感染，可显著延长小鼠在感染高毒力rh速殖子时的存活率，并显著减少慢性感染小鼠的脑包囊。本发明为抗弓形虫感染药物的开发奠定了基础。
1.弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株在制备抗弓形虫感染疫苗中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株是由pruδku80虫株改造获得的。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株是利用crispr-cas9技术敲除pruδku80中的gra72基因获得的。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，其特征在于，所述的疫苗为弓形虫pruδgra72弱毒疫苗。
5.一种弓形虫弱毒疫苗，其特征在于，其有效成分包括弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株。
6.根据权利要求5所述的弓形虫弱毒疫苗，其特征在于，还包括疫苗佐剂。
7.一种弓形虫pruδgra72弱毒疫苗株的构建方法，其特征在于，所述构建方法为通过敲除pruδku80中的gra72基因以获得pruδgra72弱毒疫苗株。
