本发明属于医药，涉及一种倍半萜香豆素类化合物新阿魏素的用途，具体涉及倍半萜香豆素化合物新阿魏素(feshurin)在抗白癜风用药中的用途。通过对b16小鼠黑色素瘤细胞和hacat角质形成细胞的实验证实feshurin具有促进黑色素生成，保护黑色素细胞免受自身免疫破坏的作用。
背景技术：
1、白癜风是一种自发或特发性的色素脱失性皮肤病，被称为世界皮肤病三大顽症之一。现代医学认为白癜风是由于皮肤和毛囊的黑色素细胞内酪氨酸酶系统的功能减退，丧失而引起。病人血清中常伴有特异性抗体的产生，进一步说明其免疫性疾病的特征。由于白癜风发病机制比较复杂，目前还没有一种既安全又有效的药物可以治愈白癜风。因此，探索和研究治疗白癜风的先导化合物具有重要意义。倍半萜香豆素类化合物是一种广泛存在于伞形科、菊科和芸香科植物中的成分，其结构通常含有一个倍半萜基团。新阿魏素(feshurin)c24h32o5是一种从阿魏中分离出来的倍半萜香豆素类化合物。已报道有一定的抗肿瘤活性，但在治疗白癜风中的应用目前还没有报道。
2、黑色素的合成过程主要涉及酪氨酸酶(tyr)、酪氨酸酶相关蛋白1(trp-1)和酪氨酸酶相关蛋白2(trp-2)。在这些蛋白中，酪氨酸酶(tyr)是黑色素合成的限速酶，对黑色素生成的速度和数量有重大影响。在黑色素合成信号通路中，小眼畸形相关转录因子(mitf)作为主要靶标发挥着至关重要的作用。wnt信号通路在调节小眼畸形相关转录因子(mitf)的表达方面起着至关重要的作用。jak-stat(janus激酶信号转导和转录激活)信号通路与自身免疫性疾病和炎症性疾病的发病机制有关。
技术实现思路
1、本发明的目的在于，提供一种倍半萜香豆素类化合物新阿魏素的用途，经过对b16黑色素瘤细胞和hacat角质形成细胞的抗白癜风活性试验证明：化合物新阿魏素(feshurin)具有促进黑色素生成，提高酪氨酸酶活性和防止黑色素破坏的作用。
2、本发明所述的一种倍半萜香豆素类化合物新阿魏素在制备抗白癜风活性药物中的用途。
3、本发明所述的一种倍半萜香豆素类化合物新阿魏素(feshurin)c24h32o5是一种从阿魏中分离出来的倍半萜香豆素类化合物，结构为(ⅰ)：
4、
5、具体操作按下列步骤进行：
6、a.以阿魏的根为原料，自然晾干，破碎后用5-10倍量体积浓度60％-95％的乙醇提取2-5次，每次12-24h，浓缩，得到粗提物；
7、b.将步骤a所得到的粗提取物与水按质量比1:1-1:4混合悬浮，分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，利用薄层色谱板(tlc)，在254nm紫外线下检测倍半萜类化合物，并以硫酸醇作为显色剂加热现色；
8、c.将步骤b得到的乙酸乙酯部位以质量比1:3的比例与100-200目的硅胶混合均匀，而后以正相硅胶柱进行分离，洗脱剂为体积比10:1-1:1的正己烷:乙酸乙酯进行梯度洗脱，获得10个流份fr.1d-fr.10d，将fr.2d流份进一步通过正相硅胶色谱分离，洗脱剂为体积比10:1-1:1的石油醚:丙酮梯度洗脱，获得8个流份fr2d1f-fr2d8f，再将fr.2d4f流份以甲醇为洗脱剂，在葡聚糖凝胶色谱lh-20上进行分离，最终获得纯度为80.30％的粗化合物新阿魏素(feshurin)，再用甲醇水体系中进行重结晶，最终获得了目标化合物，通过核磁共振及x射线单晶衍射的方法确定了该化合物的平面构型及绝对构型，进一步通过高效液相色谱分析确定了化合物新阿魏素(feshurin)的纯度为97.71％.
9、本发明所述的一种倍半萜香豆素化合物新阿魏素(feshurin)在b16黑色素瘤细胞和hacat角质形成细胞上的抗白癜风活性研究，所采取的方法如下：
10、通过cck-8法，westrin blotting，实时荧光定量pcr，酶联免疫吸附法(elisa)等实验方法，研究对倍半萜香豆素单体化合物新阿魏素(feshurin)对b16黑色素瘤细胞上的黑色素生成活性、酪氨酸酶活性、黑色素生成相关信号通路和jak1激酶的抑制活性。
11、本发明所述的一种倍半萜香豆素化合物新阿魏素(feshurin)对b16小鼠黑色素瘤细胞上促进黑色素生成活性和hacat角质形成细胞上对jak1激酶的抑制活性。研究表明：化合物新阿魏素(feshurin)在较低浓度下，b16小鼠黑色素瘤细胞上对黑色素生成有明显的促进作用，并能以浓度依赖的方式诱导酪氨酸酶tyr的活性；在hacat细胞中还可以抑制ifn-γ诱导的cxcl10趋化因子的水平；研究结果表明，化合物新阿魏素(feshurin)可通过抑制jak-stat信号通路来降低ifn-γ诱导的cxcl10的表达水平。
12、本发明通过对b16小鼠黑色素瘤细胞和hacat细胞的实验结果解释新阿魏素(feshurin)具有开发新型抗白癜风药物的巨大潜力。
1.一种倍半萜香豆素类化合物新阿魏素在制备抗白癜风活性药物中的用途。
