本发明属于生物,具体涉及一种双歧杆菌冻干保护剂及其制备方法和应用。
背景技术:
1、真空冷冻干燥技术是生产益生菌制剂的一种常用方法,由于冷冻干燥过程中菌体细胞极易受到损伤甚至死亡,在冻干后表现为存活率降低,细胞活性、细胞膜功能和细胞内酶活力下降等,因此在冻干前需要添加适量保护剂以减少细胞损伤程度。随着菌种的不同,选择冻干保护剂的种类有很大差异,冻干保护剂的筛选是益生菌生产加工过程中重要的手段和基础环节,旨在通过恰当的筛选具有菌株特异性的冻干保护剂。高通量筛选技术具有快速、高效、微量化、自动化等特点,然而基于比生长速率通过高通量技术筛选冻干保护剂的方法未见相关报道。
2、目前,对于双歧杆菌冻干保护的研究有所报道,比如通过加入保护剂或优化冻干工艺参数。cn202010622073.x提供了一种可显著提高双歧杆菌冻干存活率和耐酸性的冻干保护剂,然而此方法的冻干存活率不够高,大大缩小了产品的利润空间。cn116426388a提供了一种富硒长双歧杆菌冻干保护剂,但其保护剂选用的组分较多且制备方法复杂。因此研发一种配方简便且对双歧杆菌菌种保护效率高的冻干保护剂是现阶段需解决的技术问题。
技术实现思路
1、有鉴于此,本发明的目的在于提供一种双歧杆菌冻干保护剂及其制备方法和应用,基于比生长速率的高通量技术筛选的双歧杆菌冻干保护剂对菌体活性具有很大的保护效果,冻干存活率达到92.56%。
2、为解决上述技术问题,本发明提供了以下技术方案:
3、本发明提供一种双歧杆菌冻干保护剂,包括如下重量份组分:糖类74~94份、蛋白类79~99份和无机盐类23~43份。
4、优选的,所述糖类包括麦芽糖、山梨糖、半乳糖、木糖、麦芽糊精、果糖、葡萄糖中的一种或多种。
5、优选的,所述蛋白类包括酵母蛋白胨、酵母浸粉、鱼蛋白胨、牛肝浸粉、牛肉浸粉中的一种或多种。
6、优选的,所述无机盐类包括磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、碳酸钠、碳酸氢钠、氯化钙中的一种或多种。
7、优选的,所述双歧杆菌包括动物双歧杆菌乳亚种v9、乳双歧杆菌probio-m8、、短双歧杆菌b2798或长双歧杆菌婴儿亚种b8762。
8、本发明提供所述的双歧杆菌冻干保护剂的制备方法,包括如下步骤:称取900~1100份水和上述重量份的糖类、蛋白类、无机盐类,混合,得双歧杆菌冻干保护剂。
9、本发明提供一种双歧杆菌冻干粉,包括双歧杆菌菌泥和所述的双歧杆菌冻干保护剂
10、优选的,所述双歧杆菌菌泥与双歧杆菌冻干保护剂的质量比为1:0.5~2.5。
11、本发明提供所述的双歧杆菌冻干保护剂在保护双歧杆菌活性中的应用。
12、与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
13、本发明将糖类、蛋白类和无机盐类组合获得保护剂,可以降低动物双歧杆菌乳亚种v9真空冷冻干燥损伤、减少细胞死亡、提高冻干菌粉中菌株的存活率和活性,动物双歧杆菌乳亚种v9冻干存活率达到92.56%。相对现有的冻干保护剂,该保护剂相对简单,且制备和使用简便易行。
1.一种双歧杆菌冻干保护剂,其特征在于,包括如下重量份组分:糖类74~94份、蛋白类79~99份和无机盐类23~43份。
2.如权利要求1所述的双歧杆菌冻干保护剂,其特征在于,所述糖类包括麦芽糖、山梨糖、半乳糖、木糖、麦芽糊精、果糖、葡萄糖中的一种或多种。
3.如权利要求1所述的双歧杆菌冻干保护剂,其特征在于,所述蛋白类包括酵母蛋白胨、酵母浸粉、鱼蛋白胨、牛肝浸粉、牛肉浸粉中的一种或多种。
4.如权利要求1所述的双歧杆菌冻干保护剂,其特征在于,所述无机盐类包括磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、碳酸钠、碳酸氢钠、氯化钙中的一种或多种。
5.如权利要求1~4任意一项所述的双歧杆菌冻干保护剂,其特征在于,所述双歧杆菌包括动物双歧杆菌乳亚种v9、乳双歧杆菌probio-m8、短双歧杆菌b2798或长双歧杆菌婴儿亚种b8762。
6.如权利要求1~5任意一项所述的双歧杆菌冻干保护剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:称取900~1100份水和上述重量份的糖类、蛋白类、无机盐类,混合,得双歧杆菌冻干保护剂。
7.一种双歧杆菌冻干粉,其特征在于,包括双歧杆菌菌泥和权利要求1~5任意一项所述的双歧杆菌冻干保护剂。
8.如权利要求7所述的双歧杆菌冻干粉,其特征在于,所述双歧杆菌菌泥与双歧杆菌冻干保护剂的质量比为1:0.5~2.5。
9.如权利要求1~5任意一项所述的双歧杆菌冻干保护剂在保护双歧杆菌活性中的应用。
