本发明属于真菌次级代谢产物领域，具体涉及一种土曲霉酮terrein的制备方法及应用。
背景技术：
1、白背叶是大戟科、野桐属的小乔木或灌木，根有小毒，有清热平肝，健脾化湿，收敛固脱的功效；叶有清热利湿，消炎解毒，止血止痛的功效；根可用于治疗急慢性肝炎，肝脾肿大，消化不良，风湿关节痛等症状，叶外用于中耳炎，病肿，湿疹，跌打损伤等症状。本发明从海南东寨港野菠萝岛红树林自然保护区采摘白背叶根，分离获得一株内生真菌bys8，申请人前期从中分离系列抗炎、抗肿瘤防治农业致病菌的化合物；本发明对其进一步研究发现真菌bys8可用于生产土曲霉酮terrein，并研究了土曲霉酮terrein在防治线虫方面的活性。
技术实现思路
1、本发明提供一种土曲霉酮terrein的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
2、(1)配制种子培养基，将白背叶来源真菌bys8接入种子培养基种子，28℃恒温培养3天得种子培养液；
3、(2)将步骤(1)得到的种子培养液接入发酵培养基中，28℃恒温静置培养28-30天得发酵物；
4、(3)将步骤(2)得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，其中发酵液用等体积的乙酸乙酯萃取2-3次，合并萃取液后减压浓缩得到浸膏；
5、(4)步骤(3)得到的浸膏经过减压硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯按100:0、90:10、80:20、70:30、60:40，50:50、40:60、30:70、20:80、10:90、0:100梯度洗脱，每个梯度收集两个柱体积，将梯度为30:70得到的洗脱液浓缩后，经反相硅胶柱层析，洗脱剂为水:甲醇＝40:60，再经高效液相色谱hplc制备，色谱柱为agilent c18,9.4×250mm，7μm，流速为2ml/min，流动相为ch3cn:h2o＝10:90，最终得到土曲霉酮terrein。
6、
7、其中所述洗脱剂或流动相的比例均为体积比；所述种子培养基中含有葡萄糖1.5％–3.0％、酵母膏0.1％–0.5％、蛋白胨0.1％–0.5％、粗海盐0.11％–0.6％、适量的水；所述发酵培养基中含有葡萄糖1.6％–3.5％、酵母膏0.1％–0.5％、蛋白胨0.1％–0.5％、粗海盐0.11％–0.6％、适量的水；上述百分比均为重量百分比；所述种子培养基和发酵培养基均需120℃灭25–30分钟。
8、本发明的另一实施方案提供白背叶来源真菌bys8在制备土曲霉酮terrein中的应用。
9、本发明的另一实施方案提供土曲霉酮terrein或其药学上可接受的盐在防治线虫中的应用。
10、本发明提供一种杀线虫组合物，其特征在于以土曲霉酮terrein或其药学上可接受的盐作为有效成分。
11、本发明提供的上述杀线虫组合物，还包括药用辅料；其剂型可以是固体制剂、半固体制剂或液体制剂。
12、本发明所述的白背叶来源真菌bys8，其菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2023年11月16日；保藏编号：cgmcc no.40924；分类命名：土曲霉aspergillus terreus；记载在申请人先前中国发明专利申请号：202410064027.0、202410063291.2、202410062901.7中。
1.一种土曲霉酮terrein的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
2.权利要求1所述的白背叶来源真菌bys8，其特征在于其菌种保藏信息：保藏单位名称为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.40924。
3.权利要求2所述的白背叶来源真菌bys8在制备土曲霉酮terrein中的应用。
4.权利要求1制备的土曲霉酮terrein或其药学上可接受的盐在防治线虫中的应用。
5.一种杀线虫组合物，其特征在于以权利要求1制备的土曲霉酮terrein或其药学上可接受的盐作为有效成分。
6.权利要求5所述的杀线虫组合物，其特征在于还包括药用辅料。
7.权利要求5-6任一项所述的杀线虫组合物，其特征在于其剂型可以是固体制剂、半固体制剂或液体制剂。
