本发明属于纳米脂质体，尤其涉及一种高效清除自由基的纳米脂质体与其制备方法和应用。
背景技术：
1、红景天(rhodiola rosea l)是景天科红景天属多年生草本植物，主要分布于喜马拉雅地区、中国西藏等地区。在我国传统医学中，中药材红景天主要指景天科植物大花红景天的干燥根和根茎，其有着上千年的应用历史，被广泛用于治疗多种疾病，如肺炎、腹泻、跌打损伤、心脑血管系统疾病等。《本草纲目》记载红景天为“本经上品，祛邪恶气，补诸不足”，是“已知补益药中罕见”。2020年版《中国药典》记载红景天“益气活血，通脉平喘”，可用于治疗“气虚血瘀，胸痹心痛，中风偏瘫，倦怠气喘”。目前，已从红景天中分离得到四十余种化学成分，红景天苷(salidroside)是其主要有效成分，也是评价红景天药材质量的标志物之一。
2、红景天苷是一种酚苷类化合物，具有多种生物学和药理学特性。研究表明，红景天苷能够提高抗氧化相关酶的活性，抑制促炎细胞因子的产生，对心血管系统、神经系统、肾脏、肝脏起到保护作用。还能够通过增强血清乳酸脱氢酶的活力，减少乳酸积累，增强机体对抗疲劳的能力。另外，红景天苷具有抗病毒、抗肿瘤、免疫刺激活性，通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤发生过程；通过促进树突状细胞(dc)的成熟，刺激t细胞的增殖和dcs的抗原呈递等，调节机体免疫反应。
3、作为一种绿色的植物提取物，红景天苷毒性低、副作用小，在日化用品中具有广泛的应用前景。红景天苷具有抑制酪氨酸酶活性，降低黑色素产生的特性，是化妆品中的天然美白添加剂。红景天苷能够吸收对皮肤有伤害的紫外线，阻止炎症因子产生、调控机体氧化应激及ampk信号通路，减少有害自由基的产生，通过抑制衰老相关的β-半乳糖苷酶活性、减弱g1/g0细胞周期停滞，逆转紫外线诱导的人体皮肤成纤维细胞早衰。红景天苷还可以加快dna氧化损伤修复，从而保护细胞免受氧化应激，维持细胞功能。在抵抗紫外线照射，清除有害自由基，延缓机体衰老等方面具有极大的优势，可在化妆品、洗涤用品中发挥防晒、美白、抗衰作用。但红景天苷在水中的溶解性相对较低，在机体内吸收速度较快，但同时也被清除得很快，对它的作用效果产生了限制。
4、穿心莲内酯(andrographolide)是存在于中药穿心莲中的一种二萜内酯类成分，水溶性差。穿心莲内酯具有显著的抗炎活性，其抗炎作用涉及多个炎症相关靶点，可通过抑制核转录因子-κb(nf-κb)、信号转导和转录激活因子3(stat3)等信号通路的表达和激活，减少其下游炎症介质合成与释放，抑制炎症反应的发生。穿心莲内酯能够激活nrf2/are-ampkα信号通路，进而使下游的ⅱ相代谢酶ho-1、nqo1、akr1c1的表达上调，从而减少氧化应激对细胞造成的伤害。
5、红景天苷和穿心莲内酯，这两种源自中药的活性成分，被认为是具有巨大开发价值和应用前景的药用分子，将二者复配使用可以通过多途径、多层次、多靶点的综合方式发挥疗效。其中，红景天苷可以提高抗氧化相关酶的活性(sod、gsh-px，cat)，并激活erk/mapks信号通路发挥抗炎和抗氧化作用。穿心莲内酯阻断nf-kb和stat3有关的机制，激活nrf2/are-ampkα信号途径，抑制氧化应激与炎症反应。二者协同使用，能够增强红景天苷单独使用时的抗氧化性能，并在多个信号通路中发挥靶向作用，能够显著提升药物对心血管系统、神经系统、肾脏、肝脏的保护作用。
6、纳米脂质体载体技术指由磷脂双分子层构成的亲水性囊泡包埋活性物质所组成的经皮共输送载体体系，具有和生物膜流动镶嵌模型相似的结构，与皮肤有很好的亲和性，能够使皮肤润滑、富有弹性。纳米脂质体粒径较小，通过纳米脂质体包裹红景天苷，可以使红景天苷分子穿透皮肤表层到达真皮层和基底层，并缓慢释放，在皮肤深层长时间滞留，延长作用时间。在化妆品领域具有广泛的用途和市场前景。但目前并未有将红景天苷与穿心莲内酯二者复配制备纳米脂质体的研究。
技术实现思路
1、针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本发明将红景天苷与穿心莲内酯二者复配使用可以通过多途径、多层次、多靶点的综合方式发挥疗效，穿心莲内酯与红景天苷纳米脂质体是一种利用纳米脂质体技术制备的药物递送系统，旨在提高红景天苷和穿心莲内酯的生物利用度、稳定性和疗效，在护肤以及药物治疗方面具有良好的功效和广阔的前景。
2、为了实现上述目的，采用了如下技术方案。
3、本发明提供了一种高效清除自由基的纳米脂质体，其原料按重量份包括以下组分：5～10份的红景天苷，3～5份的穿心莲内酯，5～15份的双分子层成膜剂，10～25份的活性成分溶剂，10～30份的双分子层稳定剂，5～10份的甘油，1～5份的胆甾醇和60～90份的超纯水。
4、进一步地，所述活性成分溶剂为peg-40氢化蓖麻油、辛酸/癸酸甘油三酯、聚甘油单油酸酯、聚甘油-10油酸酯、癸二酸二异酯、聚氧乙烯蓖麻油中的一种或几种，优选为g-40氢化蓖麻油或辛酸/癸酸甘油三酯。
5、进一步地，所述双分子层成膜剂为氢化卵磷脂、大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、向日葵卵磷脂中的一种，优选为氢化卵磷脂或大豆卵磷脂。
6、进一步地，所述双分子层稳定剂为1,2-丙二醇、1,3丙二醇、1,3丁二醇、1,4-丁二醇、1,2-戊二醇、己基癸醇、1,2己二醇、二丙二醇、辛基十二醇、乙氧基二甘醇中的一种或几种，优选为1,3丙二醇或1,2-戊二醇。
7、本发明还提供了一种高效清除自由基的纳米脂质体的制备方法，包括如下步骤：
8、步骤s1、将红景天苷、穿心莲内酯加入到活性成分溶剂中，置于水浴中超声处理，得到a相；
9、步骤s2、将所述双分子层成膜剂、甘油和胆甾醇于反应容器中震荡混合，然后置于水浴中，保温处理，得到b相；
10、步骤s3、将所述双分子层稳定剂与水混合，常温下搅拌，得到c相；
11、步骤s4、将所述步骤s1所得a相、s2所得b相、s3所得c相进行混合均质剪切得到混合初乳，随后将所述混合初乳进行超高压均质处理获得活性成分脂质体乳液，冷却至室温，即得到脂质体乳液。
12、进一步地，所述步骤s1的处理条件为：在20～40℃的水浴中，超声处理10～20min。
13、进一步地，所述步骤s2的处理条件为：置于40～60℃水浴中，磁力搅拌20～30min，转速为300～400rpm，水浴保温。
14、进一步地，所述步骤s3的搅拌条件为：磁力搅拌20～30min，转速为200～400rpm。
15、进一步地，所述步骤s4的剪切转速为8000～12000rpm。
16、进一步地，述步骤s4高压均质处理的条件为：压力设置为500～1000bar，温度为30～60℃，循环5～10次。
17、本发明还提供了高效清除自由基的纳米脂质体的应用，将所述脂质体用于制备具有清除自由基、抑制机体细胞炎症和阻断皮肤胶原蛋白、降解弹性蛋白功能的化妆品、护肤品、保健食品中。
18、本发明的有益效果是：
19、(1)由于红景天苷和穿心莲内酯水溶性差、生物利用度低，为此本发明将高效稳定的纳米脂质体作为药物载体，弥补不足，同时可以增加生物膜的透过性、改变在体分布，直达病灶，更好的发挥药效，本发明的红景天苷和穿心莲内酯纳米脂质体通过磷脂微囊包裹作用，能增强红景天苷和穿心莲内酯的脂溶性，进而增强红景天苷和穿心莲内酯的透皮能力，同时该纳米乳水溶性好，稳定性高，可与化妆品配方任意互配，该体系保护了活性成分免受外界环境的影响，同时控制释放速率，防止其被机体过快清除，增强了药物疗效，使药物展现令人满意的治疗效果，本发明提供的制备方法简单易行，利于工业化生产。
20、(2)本发明用超声分散技术分散活性物红景天苷，提高活性物质在介质中的分散性，超声分散利用超声波产生的空化效应来实现固体颗粒在液体中分散，空化效应可以产生高温高压环境，有助于纳米颗粒的形成，超声分散还可以减少颗粒间的结合力，有效防止团聚现象。
21、(3)本发明混合均质剪切能够减小物料中分散相的粒径，获得更细小的分散颗粒，提高物料的均匀性和稳定性，超高压均质处理能够制备非常细小和均匀的颗粒，相比传统的高压均质机有更高的压力，可以提供更好的稳定性、改善保存质量、改善均质性、提高吸收质量、节省昂贵的添加剂、改变粘度以及减少反应时间。
1.一种高效清除自由基的纳米脂质体，其特征在于，其原料按重量份包括以下组分：5～10份的红景天苷，3～5份的穿心莲内酯，5～15份的双分子层成膜剂，10～25份的活性成分溶剂，10～30份的双分子层稳定剂，5～10份的甘油，1～5份的胆甾醇和60～90份的超纯水。
2.根据权利要求1所述高效清除自由基的纳米脂质体，其特征在于，所述活性成分溶剂为peg-40氢化蓖麻油、辛酸/癸酸甘油三酯、聚甘油单油酸酯、聚甘油-10油酸酯、癸二酸二异酯、聚氧乙烯蓖麻油中的一种或几种。
3.根据权利要求2所述高效清除自由基的纳米脂质体，其特征在于，所述双分子层成膜剂为氢化卵磷脂、大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、向日葵卵磷脂中的一种。
4.根据权利要求3所述高效清除自由基的纳米脂质体，其特征在于，所述双分子层稳定剂为1,2-丙二醇、1,3丙二醇、1,3丁二醇、1,4～丁二醇、1,2-戊二醇、己基癸醇、1,2己二醇、二丙二醇、辛基十二醇、乙氧基二甘醇中的一种或几种。
5.根据权利要求1～4任一项所述高效清除自由基的纳米脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s1的处理条件为：置于20～40℃水浴中，超声处理10～20min。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s2的处理条件为：在40～60℃的水浴中，磁力搅拌20～30min，转速为300～400rpm，水浴保温。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s3的搅拌条件为：磁力搅拌20～30min，转速为200～400rpm。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s4的剪切转速为8000～12000rpm；
10.根据权利要求1～4任一项所述高效清除自由基的纳米脂质体在制备具有清除自由基、抑制机体细胞炎症和阻断皮肤胶原蛋白、降解弹性蛋白功能的化妆品、护肤品、保健食品中的应用。
