本发明属于肿瘤治疗和分子免疫学领域，涉及一种结合人pd-l1的抗体及其诊断用途。
背景技术：
1、程序性细胞死亡蛋白配体1(programmed death-ligand 1,pd-l1)，又可称为分化簇274(cluster of differentiation 274，cd274)或者b7同源蛋白1(b7homolog1，b7-h1)，属于肿瘤坏死因子超家族，是由290个氨基酸残基组成的i型跨膜糖蛋白，包含一个igv样区、一个igc样区、一个跨膜疏水区和一个30个氨基酸的胞内尾部,完整分子量为40kda1。pd-l1是pd-1的表面糖蛋白配体，其通过与pd-1的结合来调节免疫应答，它们结合后传达出一种共抑制性信号，可以使t细胞的免疫活性受到抑制，在免疫耐受中发挥重要作用，同时也是肿瘤细胞免疫逃逸的重要原因。
2、pd-l1mrna在几乎所有组织中都有表达，但pd-l1蛋白只在少部分组织中持续表达，包括肝脏、肺脏、扁桃体以及免疫特赦组织如眼、胎盘等。pd-l1也表达于活化的t细胞，b细胞，单核细胞，树突状细胞，巨噬细胞等。pd-l1主要在许多人类肿瘤组织呈高表达，且肿瘤细胞表达的pd-l1与pd-1的相互作用可诱导肿瘤特异性t细胞的抑制或细胞凋亡。所述癌症包括乳腺癌、肺癌、胃癌、肠癌、食管癌、卵巢癌、宫颈癌、肾癌、膀胱癌、胰腺癌、神经胶质瘤、黑素瘤等，且pd-l1的表达水平和患者的临床及预后紧密相关。
3、有临床数据表明表达pd-l1的癌症患者更可能对pd-1的治疗起作用。然而，使用pd-l1蛋白表达作为癌症的准确预测因子和/或抗pd-1和抗pd-l1定向疗法的疗效仍然具有挑战性。许多市售的针对pd-l1的抗体与其他蛋白质发生交叉反应和/或表现出非特异性组织学染色，从而使它们成为不可靠的诊断试剂。因此，尚需要开发新的用于检测诊断的pd-l1抗体。
技术实现思路
1、本发明第一方面提供一种识别并特异性结合人pd-l1的cgiqdtnskkqsdthleet序列的抗pd-l1抗体。
2、在一些实施方案中，本发明的分离的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段包含：氨基酸序列如seq id no：2所示的hcdr1、氨基酸序列如seq id no：3所示的hcdr2、氨基酸序列如seq id no：4所示的hcdr3、氨基酸序列如seq id no：6所示的lcdr1、氨基酸序列如seq idno：7所示的lcdr2和氨基酸序列如seq id no：8所示的lcdr3中的至少一个、至少两个、至少三个、至少四个或至少五个。
3、在一些实施方案中，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段包含氨基酸序列如seqid no：2所示的hcdr1、氨基酸序列如seq id no：3所示的hcdr2、氨基酸序列如seq id no：4所示的hcdr3、氨基酸序列如seq id no：6所示的lcdr1、氨基酸序列如seq id no：7所示的lcdr2和氨基酸序列如seq id no：8所示的lcdr3。
4、在一些实施方案中，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段的重链可变区的氨基酸序列与seq id no：5所示的氨基酸序列具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性，和/或轻链可变区的氨基酸序列与seq id no：9的氨基酸序列具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性。
5、在一些实施方案中，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段的重链可变区包含seqid no：5所示的氨基酸序列，和/或轻链可变区包含seq id no：9所示的氨基酸序列。
6、在一些实施方案中，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段的重链可变区的氨基酸序列如seq id no：5所示，轻链可变区的氨基酸序列如seq id no：9所示。
7、在一些实施方案中，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段的重链的氨基酸序列与seq id no：10所述的氨基酸序列具有至少95％，96％，97％，98％或99％序列同一性，和/或轻链的氨基酸序列与seq id no：11的氨基酸序列具有至少95％，96％，97％，98％或99％序列同一性.
8、在一些实施方案中，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段的重链包含seq id no：10所示的氨基酸序列，和/或轻链包含seq id no：11所示的氨基酸序列。
9、在一些实施方案中，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段的重链的氨基酸序列如seq id no：10所示，轻链的氨基酸序列如seq id no：11所示。
10、在一些实施方案中，所述抗原结合片段选自fab、fab'、f(ab')2、fv、scfv或sdab。
11、在一些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段为igg1、igg2、igg3或igg4亚型，优选为igg1亚型。
12、在一些实施方案中，所述抗体为单克隆抗体，优选为兔单克隆抗体。
13、本发明第二方面提供一种多核苷酸分子，其编码本文任一实施方案所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段。
14、本发明第三方面提供一种表达载体，其包含本文任一实施方案所述的多核苷酸分子；优选地，所述载体为真核表达载体。
15、本发明第四方面提供一种宿主细胞，其包含本文任一实施方案所述的多核苷酸分子或表达载体；优选地，所述宿主细胞是真核细胞，更优选哺乳动物细胞。
16、本发明第五方面提供一种检测试剂或检测试剂盒，其含有本文任一实施方案所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段；优选地，所述检测试剂盒还含有进行免疫组织化学、免疫荧光、流式细胞术、酶联免疫吸附测定或免疫印迹所需的试剂。
17、本发明第六方面提供本文任一实施方案所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段在制备检测试剂或检测试剂盒中的应用，其中，该检测试剂和检测试剂盒用于检测来自受试者的样品中pd-l1的存在或表达水平；优选地，所述检测试剂或检测试剂盒适合用于免疫组织化学、免疫荧光、流式细胞术、酶联免疫吸附测定或免疫印迹中。
18、本发明第七方面提供本文任一实施方案所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段在制备检测试剂或检测试剂盒中的应用，其中，该检测试剂和检测试剂盒用于一种预测患有癌症或免疫功能失调或者处于其风险下的受试者对用包括pd-1轴结合拮抗剂的抗癌疗法进行的治疗的应答性的方法中；优选地，所述检测试剂或检测试剂盒适合用于免疫组织化学、免疫荧光、流式细胞术、酶联免疫吸附测定或免疫印迹中。
1.分离的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段包含：氨基酸序列如seq id no：2所示的hcdr1、氨基酸序列如seq id no：3所示的hcdr2、氨基酸序列如seq id no：4所示的hcdr3、氨基酸序列如seq id no：6所示的lcdr1、氨基酸序列如seq id no：7所示的lcdr2和氨基酸序列如seq id no：8所示的lcdr3中的至少一个、至少两个、至少三个、至少四个或至少五个；
2.如权利要求1所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段包含氨基酸序列如seq id no：2所示的hcdr1、氨基酸序列如seq id no：3所示的hcdr2、氨基酸序列如seq id no：4所示的hcdr3、氨基酸序列如seq id no：6所示的lcdr1、氨基酸序列如seq id no：7所示的lcdr2和氨基酸序列如seq id no：8所示的lcdr3。
3.如权利要求2所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段的重链可变区的氨基酸序列与seq id no：5所示的氨基酸序列具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性，和/或轻链可变区的氨基酸序列与seq id no：9的氨基酸序列具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％序列同一性；
4.如权利要求2所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗pd-l1抗体或其抗原结合片段的重链的氨基酸序列与seq id no：10所述的氨基酸序列具有至少95％，96％，97％，98％或99％序列同一性，和/或轻链的氨基酸序列与seq id no：11的氨基酸序列具有至少95％，96％，97％，98％或99％序列同一性；
5.如权利要求1所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗原结合片段选自fab、fab'、f(ab')2、fv、scfv或sdab。
6.如权利要求1-5中任一项所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段为igg1、igg2、igg3或igg4亚型，优选为igg1亚型。
7.如权利要求1-5中任一项所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体，优选为兔单克隆抗体。
8.一种多核苷酸分子，其编码如权利要求1-7中任一项所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段。
9.一种表达载体，其包含如权利要求8所述的多核苷酸分子；优选地，所述载体为真核表达载体。
10.一种宿主细胞，其包含如权利要求8所述的多核苷酸分子或如权利要求9所述的表达载体；优选地，所述宿主细胞是真核细胞，更优选哺乳动物细胞。
11.一种检测试剂或检测试剂盒，其含有权利要求1-7中任一项所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段；优选地，所述检测试剂盒还含有进行免疫组织化学、免疫荧光、流式细胞术、酶联免疫吸附测定或免疫印迹所需的试剂。
12.权利要求1-7中任一项所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段在制备检测试剂或检测试剂盒中的应用，其中，该检测试剂和检测试剂盒用于检测来自受试者的样品中pd-l1的存在或表达水平；优选地，所述检测试剂或检测试剂盒适合用于免疫组织化学、免疫荧光、流式细胞术、酶联免疫吸附测定或免疫印迹中。
13.权利要求1-7中任一项所述的抗pd-l1抗体或其抗原结合片段在制备检测试剂或检测试剂盒中的应用，其中，该检测试剂和检测试剂盒用于一种预测患有癌症或免疫功能失调或者处于其风险下的受试者对用包括pd-1轴结合拮抗剂的抗癌疗法进行的治疗的应答性的方法中；优选地，所述检测试剂或检测试剂盒适合用于免疫组织化学、免疫荧光、流式细胞术、酶联免疫吸附测定或免疫印迹中。
