本发明涉及微生物，具体涉及一种促进川上座壳孢菌akg-2菌丝生长培养基及其方法。
背景技术：
1、橡副珠蜡蚧(parasaissetia nigra)又名橡胶盔蚧、乌黑副盔蚧，黑光硬蚧，属同翅目蚧总科蜡蚧科副珠蜡蚧属，是橡胶树主要害虫之一。座壳孢是介壳虫和粉虱的病原体，其孢子萌发后可穿透昆虫表皮，进而感染介壳虫和粉虱，够引起粉虱和介壳虫流行病使得他们成为潜在可利用的生物防治材料。川上座壳孢(aschersonia kawakamii)属于丝孢菌类，腔孢纲，球壳目，鲜壳孢科，座壳孢属真菌，是橡副珠蜡蚧的病原真菌，用于防治橡副珠蜡蚧的生防真菌。
2、目前国内外尚无关于川上座壳孢菌培养基研究的报道，通用的培养基生长较慢，不能很好满足该菌生长发育的需求，若要对其进行大规模生产应用，应当明确其对培养基各营养成分的需求从而对其进行控制，筛选出适合川上座壳孢菌生长的培养基。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种促进川上座壳孢菌akg-2菌丝生长培养基及其方法，该培养基组成成分明确、稳定，菌丝生长较快、菌丝体产量较高。
2、为实现上述目的，本发明所设计的技术方案如下：
3、本发明提供了一种促进川上座壳孢菌akg-2菌丝生长培养基，所述菌丝生长培养基的原料包括马铃薯、蔗糖、干酪素、氯化钾，维生素c和去离子水，其中，所述菌丝生长培养基中，马铃薯为100-250g/l，蔗糖为5-30g/l，干酪素为1-6g/l，氯化钾为0.5-3g/l和维生素c为0.005-0.05g/l。
4、进一步地，所述菌丝生长培养基中，马铃薯为150-220g/l，蔗糖为5-15g/l，干酪素为2-4g/l，氯化钾为0.5-2g/l，维生素c为0.005-0.02g/l。
5、再进一步地，所述菌丝生长培养基中，马铃薯为200g/l，蔗糖为10g/l，干酪素为3g/l，氯化钾为1g/l，维生素c为0.01g/l。
6、再进一步地，所述菌丝生长培养基还包括12～20g/l的琼脂。
7、再进一步地，所述菌丝生长培养基中，马铃薯为200g/l，蔗糖为10g/l，干酪素为3g/l，氯化钾为1g/l，维生素c为0.01g/l，琼脂为15g/l。本发明还提供了一种上述的菌丝生长培养基的制备方法，包括以下步骤：
8、1)按上述用量称取马铃薯、蔗糖、干酪素、氯化钾和维生素c；
9、2)向马铃薯浸出液加入蔗糖、干酪素和氯化钾；煮沸，搅拌均匀，并定容；
10、3)将定容后的溶液灭菌，培养基冷却至40～50℃，称取维生素c溶解至无菌水中，在超净工作台上采用0.22μm无菌针式过滤器向培养基中加入溶解后的维生素c溶液，摇匀后分装。
11、根据实际情况，向马铃薯浸出液加入麦芽糖、干酪素、硫酸镁；搅拌均匀，并定容至990ml，将定容后的溶液分装入250ml锥形瓶内，每瓶198ml，于121℃灭菌锅灭菌30min，培养基冷却至40-50℃后，称取0.1g维生素c溶解至10ml无菌水中，在超净工作台上采用无菌针式过滤器向培养基中加入溶解后的维生素b7溶液，每瓶加入2ml，摇匀。
12、进一步地，所述步骤1)中，马铃薯浸出液由以下步骤制备而成：
13、称取去皮马铃薯，人工切条后，沸水煮纱布过滤，留取汁液，即得到马铃薯浸出液。
14、再进一步地，所述步骤2)中，按每升生长培养基称取12～20g的琼脂加入马铃薯浸出液中，所述步骤3)中，摇匀后分装至培养皿中，每皿20ml。
15、本发明还提供了一种基于上述生长培养基促进川上座壳孢菌akg-2菌丝生长的方法，包括以下步骤：
16、1)将川上座壳孢菌akg-2活化，将活化后的菌株接种到pda培养基上，置于25～28℃恒温培养箱中倒置培养，培养至大量产孢后(约35d)，即可使用，其中，所述上述川上座壳孢菌(aschersonia kawakamii)akg-2的保藏编号为cgmcc no.40511；
17、2)用细胞刮刀充分刮取孢子置于无菌的体积分数为0.05％
18、(v/v)吐温-80溶液，在振荡仪中充分振荡，然后用灭了菌的过滤器将断裂菌丝滤除，收集孢子滤液，加入无菌的体积分数为0.05％(v/v)吐温-80溶液稀释并采用血球计数板调整孢子浓度，配制成浓度为1×106-1×107个/ml的孢子悬浮液，备用；
19、3)将孢子悬浮液接种至上述川上座壳孢菌菌丝生长培养基中培养，其中，川上座壳孢菌接种浓度为1×106-1×107个/ml(接种时接种量要控制在培养基体积比的5％以内)；所述培养条件为27℃暗培养。
20、本发明还提供了一种上述生长培养基促进川上座壳孢菌akg-2菌丝生长的方法，包括以下步骤：
21、1)将川上座壳孢菌akg-2活化，将活化后的菌株接种到pda培养基上，置于25～28℃恒温培养箱中倒置培养，培养至大量产孢后(约35d)，即可使用，其中，所述上述川上座壳孢菌(aschersonia kawakamii)akg-2的保藏编号为cgmcc no.40511；
22、2)用细胞刮刀充分刮取孢子置于无菌的体积分数为0.05％
23、(v/v)吐温-80溶液，在振荡仪中充分振荡，然后用灭了菌的过滤器将断裂菌丝滤除，收集孢子滤液，加入无菌的体积分数为0.05％(v/v)吐温-80溶液稀释并采用血球计数板调整孢子浓度，配制成浓度为1×106-1×107个/ml的孢子悬浮液，备用；
24、3)将孢子悬浮液接种至pda培养基中，用封口膜封口，暗培养处理置于25～28℃恒温培养箱中倒置暗培养14d，获得平板菌种；用直径为4mm的打孔器将已培养好的平板菌种打成4mm的菌饼，将其转接到上述菌丝生长培养基平板上，置于25～28℃培养箱中避光培养。
25、上述川上座壳孢菌(aschersonia kawakamii)akg-2，于2023年02月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.40511，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
26、本发明的有益效果：
27、本发明的培养基配方成分明确，菌丝生长较快、菌丝体产量较高，培养7d菌丝干重可达2.40g/l以上，为等量pdb培养基产量的4.2倍。该培养基可以进行连续批量化大规模发酵生产，对于该菌的大规模应用提供了必要的前提条件。
1.一种促进川上座壳孢菌akg-2菌丝生长培养基，其特征在于：所述菌丝生长培养基的原料包括马铃薯、蔗糖、干酪素、氯化钾、维生素c和去离子水，其中，所述菌丝生长培养基中，马铃薯为100-250g/l，蔗糖为5-30g/l，干酪素为1-6g/l，氯化钾为0.5-3g/l和维生素c为0.005-0.05g/l；所述上述川上座壳孢菌(aschersonia kawakamii)akg-2的保藏编号为cgmcc no.40511。
2.根据权利要求1所述的菌丝生长培养基，其特征在于：所述菌丝生长培养基中，马铃薯为150-220g/l，蔗糖为5-15g/l，干酪素为2-4g/l，氯化钾为0.5-2g/l，维生素c为0.005-0.02g/l。
3.根据权利要求2所述的菌丝生长培养基，其特征在于：所述菌丝生长培养基中，马铃薯为200g/l，蔗糖为10g/l，干酪素为3g/l，氯化钾为1g/l，维生素c为0.01g/l。
4.根据权利要求1～3中任意一项所述的菌丝生长培养基，其特征在于：所述菌丝生长培养基还包括12～20g/l的琼脂。
5.根据权利要求4中任意一项所述的菌丝生长培养基，其特征在于：所述菌丝生长培养基中，马铃薯为200g/l，蔗糖为10g/l，干酪素为3g/l，氯化钾为1g/l，维生素c为0.01g/l和琼脂为15g/l。
6.一种权利要求1～3任意一项所述的菌丝生长培养基的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，马铃薯浸出液由以下步骤制备而成：
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，按每升生长培养基称取12～20g的琼脂加入马铃薯浸出液中。
9.一种基于权利要求1～3任意一项所述生长培养基促进川上座壳孢菌akg-2菌丝生长的方法，其特征在于：包括以下步骤：
10.一种基于权利要求4～5任意一项所述生长培养基促进川上座壳孢菌akg-2菌丝生长的方法，其特征在于：包括以下步骤：
