背景技术：
1、尽管对包括癌症在内的许多疾病和病症进行了免疫疗法的研究，但仍遇到了仍需解决的功能限制。共刺激和共抑制配体和受体的网络严格控制免疫系统。免疫检查点基于复杂的相互作用对免疫反应进展进行负向调控。目前可用的免疫疗法可以调节一些患者的免疫反应，但是免疫检查点的表达和与天然结合配偶体的相互作用在患者之间可能存在差异。
2、因此，需要开发被优化成靶向肿瘤部位(尤其是在肿瘤微环境中)的新的改进的治疗方式(modalities)。
技术实现思路
1、除其他外，本公开提供了与特定靶标相互作用的双特异性抗体分子或其抗原结合片段以及使用此类双特异性抗体分子或其抗原结合片段的方法。在一些实施方案中，本文所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段包含选择性结合至含有跨膜和免疫球蛋白结构域的蛋白质2(transmembrane and immunoglobulin domain containing 2,tmigd2)的第一抗原结合结构域。在一些实施方案中，本文所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段包含选择性结合至至少一种肿瘤相关抗原(taa)的第二抗原结合结构域。herv-h ltr-相关蛋白质2(hhla2)是示例性taa，其是在多种肿瘤和抗原呈递细胞中广泛表达的b7基因家族成员。hhla2与抑制性和刺激性受体相互作用从而调控t细胞和nk细胞功能。tmigd2是在t细胞和nk细胞上表达的hhla2的活化性受体，该受体与hhla2相互作用从而共刺激t细胞和nk细胞活化。
2、虽然已将各种taa结合剂作为免疫疗法进行了研究，但是本公开特别涵盖具有新活性的双特异性抗体分子或其抗原结合片段的发现，该双特异性抗体分子或其抗原结合片段可以选择性结合至在癌细胞上表达的至少一种taa，并且选择性结合至在免疫效应细胞(尤其是t细胞(例如，初始t细胞和/或效应t细胞)和/或nk细胞)上表达的tmigd2。将此种针对肿瘤的方法组合来增加患者的免疫调节可以提供用于在肿瘤部位处，尤其是在肿瘤微环境(tme)中产生和形成免疫反应的有效策略。本文所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段可以活化先天免疫系统和适应性免疫系统两者。因此，本公开提供了特别可用于治疗包括实体瘤或血液肿瘤在内的多种癌症，以及调节受试者中的免疫反应的双特异性抗体分子或其抗原结合片段的若干实例。
3、在一个方面，本公开提供了双特异性抗体分子或其抗原结合片段，该双特异性抗体分子或其抗原结合片段包含：(i)第一抗原结合结构域，其选择性结合至tmigd2；以及(ii)第二抗原结合结构域，其选择性结合至至少一种taa。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域活化免疫效应细胞。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域将免疫效应细胞募集至肿瘤微环境。在一些实施方案中，免疫效应细胞包括或为t细胞(例如，初始t细胞和/或效应t细胞)和/或nk细胞。在一些实施方案中，至少一种taa包括或为hhla2、cd123、b7-h3、b7-h4、cd33、cd30、her2、cd22、cd79b、结合素-4、trop-2、bcma、cd19、叶酸受体α、egfr或它们的组合。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为hhla2。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为cd123。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为b7-h3。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为b7-h4。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为cd33。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为cd30。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为her2。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为cd22。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为cd79b。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为结合素-4。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为trop-2。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为bcma。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为cd19。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为叶酸受体α。在某些实施方案中，至少一种taa包括或为egfr。
4、在一些实施方案中，第一抗原结合结构域包括或为抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，第二抗原结合结构域包括或为抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，抗原结合片段包括或为scfv、fab、fab'、f(ab')2、纳米抗体或骆驼科动物抗体。在一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段为或包括：(i)嵌合、人或人源化抗体或其抗原结合片段；以及/或者(iii)单克隆抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段为或包含：(i)重链恒定区，其选自igg1、igg2、igg3或igg4；以及/或者(ii)轻链恒定区，其选自κ或λ的轻链恒定区。
5、在一些实施方案中，抗体或抗原结合片段包含具有降低的效应功能的fc区。在一些实施方案中，fc区包含根据eu索引编号的l234a和/或l235a的一个或多个氨基酸取代。在一些实施方案中，修饰包括根据eu索引编号的n297a。在一些实施方案中，第一抗原结合结构域包括或为scfv，并且第二抗原结合结构域包括或为抗体。在一些实施方案中，scfv和抗体通过肽接头共价连接。在一些实施方案中，肽接头的长度大于至少五个氨基酸。
6、在另一个方面，本公开提供了药物组合物，其包含本文所述的任何方面或实施方案的至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段，以及药学上可接受的载剂。
7、在另一个方面，本公开提供了治疗患有疾病、病症或疾患的受试者的方法，其包括施用治疗有效量的本文所述的任何方面或实施方案的药物组合物。在另一个方面，本公开提供了调节受试者中的免疫反应的方法，其包括施用治疗有效量的本文所述的任何方面或实施方案的药物组合物。
8、在一些实施方案中，受试者患有癌症或有发展成癌症的风险。在一些实施方案中，受试者患有实体瘤或血液癌症。在一些实施方案中，实体瘤为或包括以下中的一者或多者：肾癌、骨癌、皮肤癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌、子宫内膜癌、肺癌、卵巢癌、肝癌、胆管癌或甲状腺癌。在一些实施方案中，血液癌症包括或为白血病或淋巴瘤。在一些实施方案中，白血病包括或为急性淋巴细胞性白血病、急性髓系白血病、慢性髓系白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性白血病或急性白血病。在一些实施方案中，淋巴瘤包括或为霍奇金淋巴瘤(hl)、非霍奇金淋巴瘤、淋巴细胞性淋巴瘤或弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)。
9、在一些实施方案中，将本文所述的任何方面或实施方案的至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段与至少一种附加剂组合施用。
10、在另一个方面，本公开提供了编码本文所述的任何方面或实施方案的至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段的核酸分子(例如，表1-5中的一种或多种核酸分子)。
11、在另一个方面，本公开提供了包含本文所述的任何方面或实施方案的核酸分子的表达载体。
12、在另一个方面，本公开提供了包含或表达本文所述的任何方面或实施方案的至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段、本文所述的任何方面或实施方案的核酸分子，或者本文所述的任何方面或实施方案的表达载体的宿主细胞。
13、在另一个方面，本公开提供了制备至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段的方法，其包括：(i)在适合于表达至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段的条件下培养包含本文所述的任何方面或实施方案的核酸分子或本文所述的任何方面或实施方案的表达载体的宿主细胞，以及(ii)回收至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段。
14、在另一个方面，本公开提供了检测样品中tmigd2多肽和/或taa的存在或水平的方法，其包括使用本文所述的任何方面或实施方案的至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段来检测样品中的tmigd2多肽和/或taa。
15、在另一个方面，本公开提供了试剂盒，其包括本文所述的任何方面或实施方案的至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段，以及使用说明书。
1.一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其包含：
2.如权利要求1所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述第一抗原结合结构域活化免疫效应细胞。
3.如权利要求1或权利要求2所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述第一抗原结合结构域将免疫效应细胞募集至肿瘤微环境。
4.如权利要求2或权利要求3所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述免疫效应细胞包括或为t细胞和/或nk细胞。
5.如权利要求1至4中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述至少一种taa包括或为hhla2、cd123、b7-h3、b7-h4、cd33、cd30、her2、cd22、cd79b、结合素-4、trop-2、bcma、cd19、叶酸受体α、egfr或它们的组合。
6.如权利要求1至5中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述第一抗原结合结构域包括或为抗体或其抗原结合片段。
7.如权利要求1至6中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述第二抗原结合结构域包括或为抗体或其抗原结合片段。
8.如权利要求6或权利要求7所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段包括或为scfv、fab、fab'、f(ab')2、纳米抗体或骆驼科动物抗体。
9.如权利要求6至8中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段为或包括：
10.如权利要求6至9中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段为或包括：
11.如权利要求6至9中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含相对于参考抗体或其抗原结合片段具有降低的效应功能的fc区。
12.如权利要求11所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述fc区包含根据eu索引编号的l234a和/或l235a的一个或多个氨基酸取代。
13.如前述权利要求中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述第一抗原结合结构域包括或为scfv，并且所述第二抗原结合结构域包括或为抗体分子。
14.如权利要求13所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其中所述scfv和所述抗体分子通过肽接头共价连接。
15.一种药物组合物，其包含权利要求1至14中任一项所述的至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段，以及药学上可接受的载剂。
16.一种治疗患有疾病、病症或疾患的受试者以及/或者调节受试者的免疫反应的方法，其包括施用治疗有效量的权利要求15所述的药物组合物。
17.如权利要求15或权利要求16所述的方法，其中所述受试者患有癌症或有发展成癌症的风险。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述受试者患有实体瘤或血液癌症。
19.如权利要求18所述的方法，其中所述实体瘤为或包括以下中的一者或多者：肾癌、骨癌、皮肤癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌、子宫内膜癌、肺癌、卵巢癌、肝癌、胆管癌或甲状腺癌。
20.如权利要求18所述的方法，其中所述血液癌症包括或为白血病或淋巴瘤。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述白血病包括或为急性淋巴细胞性白血病、急性髓系白血病、慢性髓系白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性白血病或急性白血病。
22.如权利要求20所述的方法，其中所述淋巴瘤包括或为霍奇金淋巴瘤(hl)、非霍奇金淋巴瘤、淋巴细胞性淋巴瘤或弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)。
23.如权利要求16至22中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体分子或其抗原结合片段与至少一种附加剂组合施用。
24.一种核酸分子，其编码权利要求1至14中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段。
25.一种表达载体，其包含权利要求24所述的核酸分子。
26.一种宿主细胞，其包含或表达权利要求1至14中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段、权利要求24所述的核酸分子，或者权利要求25所述的表达载体。
27.一种制备双特异性抗体分子或其抗原结合片段的方法，其包括：
28.一种检测样品中tmigd2多肽和/或taa的存在或水平的方法，其包括使用权利要求1至14中任一项所述的双特异性抗体分子或其抗原结合片段来检测所述样品中的所述tmigd2多肽和/或所述taa。
29.一种试剂盒，其包括权利要求1至14中任一项所述的至少一种双特异性抗体分子或其抗原结合片段，以及使用说明书。
