1.本发明属于白酒检测领域，具体涉及一种酒醅中吡嗪类化合物的前处理及检测方法。
背景技术：2.吡嗪类化合物是白酒中重要的微量成分，尤其是2,3,5,6-四甲基吡嗪，具有烤焙、坚果、可可等香气，是重要的风味化合物；同时具有治疗心脑血管疾病，预防顺铂诱导的氧化应激、细胞凋亡和肾毒性，防止由乙醇引起的胃粘膜损伤，改善学习障碍等生理活性，是白酒中明确的健康功能成分，在酱香型白酒中含量最高。
3.通过调控生产工艺如堆积培菌过程控制、高产吡嗪类化合物的微生物菌剂组合使用等，以提高白酒中吡嗪类化合物的质量浓度，进而提高白酒的风味活性以及生理功能，在各大酒厂得到广泛应用。在此过程中，需要全面监控酒醅中吡嗪类化合物的含量，根据其变化规律进而确定工艺参数，因此有必要建立一种酒醅中吡嗪类化合物的前处理及检测方法。
4.与白酒样品不同，酒醅为固体基质，吡嗪类化合物的含量甚微，且酒醅中含有大量的蛋白质、糖分、色素，采用有机溶剂直接配制标准溶液，并直接提取进行检测的方法，容易产生基质效应，影响检测结果的准确度。将高粱蒸煮后作为模拟基质，并调整其乙醇体积分数、ph值与待测样品一致后，采用与待测酒醅样品完全一致的方法制备标准溶液，再制作标准曲线用于待测样品的计算，可以有效避免基质效应带来的检测误差。
技术实现要素：5.本发明提供一种酒醅中吡嗪类化合物的前处理及检测方法，包括：采用液液微萃取方法进行提取，气相色谱氮磷检测器进行测定，基于内标标准曲线法，计算获得吡嗪类化合物的含量。
6.其中样品的前处理步骤具体包括：将待测酒醅样品用乙醇水溶液混匀，加入氯化钠至溶液饱和，加入内标使用液后用有机溶剂萃取，振摇并离心后取有机相，得到酒醅样品供试液。
7.本发明针对酒醅中的吡嗪类化合物，采用气相色谱氮磷检测器进行分析检测，具有专属性强、灵敏度高、响应值大、干扰小、快速准确的优点。
8.本发明在样品前处理时采用与吡嗪类化合物结构相似的含氮化合物作为内标物，可以减小检测误差。另外，结合吡嗪类化合物具有一定碱性的理化性质，采用偏酸性的乙醇水溶液对其进行溶解，再加入氯化钠使乙醇水溶液饱和，提高水溶液的极性，促使吡嗪类化合物向提取剂中转移，提高提取效率；而且其中采用了液液微萃取的方法，仅使用很少量的有机溶剂进行提取，大幅降低有机溶剂的使用量，降低成本以及减少对环境的污染。
9.进一步地，所述有机溶剂为无水乙醚。使用无水乙醚的提取效果和上机检测效果都是比较好的，检测结果更准确。
10.进一步地，所述待测酒醅样品、乙醇水溶液、无水乙醚的用量比为4～8g:12～24ml:2～4ml。
11.进一步地，其中标准溶液的配制具体包括：将酿酒高粱煮熟后作为模拟基质，将模拟基质、混合标准储备液、乙醇水溶液、氯化钠、内标使用液混合，用有机溶剂进行提取，得到标准溶液。
12.本发明采用与待测酒醅样品一样的固体基质和前处理方法制备标准溶液，有利于消除基质效应，减小检测误差。
13.进一步地，建立标准曲线时，以所述标准溶液中吡嗪类化合物与内标物的色谱峰面积比为纵坐标，以所述标准溶液中吡嗪类化合物的质量浓度为横坐标。
14.进一步地，所述吡嗪类化合物为2-甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2,6-二乙基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪、2-乙酰基-3,5-二甲基吡嗪中的一种或多种。
15.本发明涉及的酒醅为白酒酿造过程中的过程产物。本发明的方法可以检测酒醅中的一种吡嗪类化合物，也可以同时检测多种吡嗪类化合物。优选地，检测上述8种吡嗪类化合物中的一种或多种时，效果更好，即检测重复性好、灵敏度高、结果更准确。
16.进一步地，其中气相色谱检测条件包括：采用硝基对苯二甲酸改性的聚乙二醇毛细管色谱柱；载气为高纯n2(纯度≥99.999％)，恒流模式，流速为1.0ml/min；升温程序为初温80℃，保持1min，以10℃/min升至210℃，保持1min，后运行温度240℃，保持5min；进样口温度为250℃，分流模式(分流比为10:1)，进样量为1μl；npd检测器，温度为340℃，氢气流速3ml/min，空气流速60ml/min，尾吹气流速8ml/min。
17.在本发明一个优选实施方式中，所述方法具体包括：
18.1)将待测酒醅样品、乙醇水溶液(体积分数为3％～5％，ph＝3～5)、内标物、萃取剂按照4～8g:12～24ml:10～20μl:2～4ml比例混合，得到混合溶液，向其中加入氯化钠使水相至饱和，充分振摇，于冰浴中超声30min，以8000～10000rpm离心5～10min，分离收集有机相层清液，得到样品供试液；
19.2)将蒸煮熟的酿酒高粱作为模拟基质，在模拟基质中添加吡嗪类化合物混合标准储备液，按照上述步骤2)进行处理后得到标准溶液；
20.3)将上述步骤2)得到的样品供试液和上述步骤3)得到的标准溶液分别进行gc-npd检测分析；
21.4)以标准溶液中吡嗪类化合物与内标物的色谱峰面积比为纵坐标，吡嗪类化合物的质量浓度为横坐标，制作标准曲线；
22.5)将测得的样品供试液中吡嗪类化合物与内标物的色谱峰面积比代入标准曲线，计算出所述待测酒醅样品中吡嗪类化合物的质量浓度。
23.本发明的有益效果：
24.本发明采用气相色谱-氮磷检测器测定酒醅中的吡嗪类化合物，以与吡嗪类化合物性质较为接近的含氮化合物作为内标物，制备与酒醅样品一致的固体基质作为模拟基质，并对模拟基质采用与酒醅样品同样的前处理方法进行提取，在同等仪器条件下进行测定，可以消除不同基质效应带来的检测误差，保证检测结果的准确性。本发明的方法能够同时检测酒醅中多种吡嗪类化合物，检出限为4.22μg/kg～15.14μg/kg，具有适用范围广、专
属性高、检测限低、准确度高、结果稳定的优点。
附图说明
25.图1为实施例1中8种吡嗪类化合物混合标准溶液及内标物的色谱图；
26.图2为实施例1中2-甲基吡嗪的标准曲线图；
27.图3为实施例1中2,5-二甲基吡嗪的标准曲线图；
28.图4为实施例1中2,6-二甲基吡嗪的标准曲线图；
29.图5为实施例1中2,3-二甲基吡嗪的标准曲线图；
30.图6为实施例1中2,3,5-三甲基吡嗪的标准曲线图；
31.图7为实施例1中2,6-二乙基吡嗪的标准曲线图；
32.图8为实施例1中2,3,5,6-四甲基吡嗪的标准曲线图；
33.图9为实施例1中2-乙酰基-3,5-二甲基吡嗪的标准曲线图；
34.图10为实施例1中酱香型白酒酒醅样品的色谱图；
35.图11为实施例1中酱香型白酒酒醅样品回收率实验的色谱图；
36.图12为实施例2中清香型白酒酒醅样品的色谱图；
37.图13为实施例3中浓香型白酒酒醅样品的色谱图；
38.图14为对比例1中采用对比方法处理酱香型白酒酒醅样品的色谱图；
39.图15为对比例2中采用对比方法处理酱香型白酒酒醅样品的色谱图。
具体实施方式
40.以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。
41.实施例1
42.本实施例提供一种检测酱香型白酒酒醅中吡嗪类化合物(包括2-甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2,6-二乙基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪、2-乙酰基-3,5-二甲基吡嗪)质量浓度的方法，具体如下：
43.1.试剂
44.无水乙醇、无水乙醚为色谱纯；乳酸、无水na2so4、nacl为分析纯；水为超纯水；乙醇水溶液：吸取3～5ml无水乙醇于100ml容量瓶中，加入约0.1ml的乳酸乙醇溶液(3.0g/l)，用超纯水定容至刻度，使其ph＝3～4。
45.2.待测样品及标准品
46.酱香型白酒酒醅：由贵州茅台镇酒业提供；
47.2-甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2,6-二乙基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪、2-乙酰基-3,5-二甲基吡嗪、n-甲基吡咯烷酮，纯度大于97.8％，购于上海安谱实验科技股份有限公司。
48.3.标准溶液配制
49.3.1吡嗪类化合物混合标准储备液
50.精密称取上述8种吡嗪类化合物标准品适量于10ml容量瓶中，用无水乙醇溶解并
定容至刻度，得到8种吡嗪类化合物混合标准储备液，标识为ss-1,于-20℃避光保存，具体浓度见表1。
51.3.2内标使用液
52.称取0.4g n-甲基吡咯烷酮标准品于10ml容量瓶中，用无水乙醇溶解定容至刻度，得40000mg/l的内标使用液，于-20℃避光保存。
53.表1混合标准储备液中8种吡嗪类化合物的浓度
[0054][0055]
4.样品处理过程
[0056]
精密称取4g酱香型白酒酒醅样品于50ml离心管中，加入12ml乙醇水溶液，加入氯化钠至溶液饱和，涡旋混匀，再加入10μl内标使用液，加入2ml无水乙醚，涡旋振荡提取10min后，于冰浴中超声30min，以10000rpm离心5min，取上层清液于样品瓶中，即得样品溶液，供gc-npd分析。
[0057]
5.样品测定
[0058]
5.1仪器条件
[0059]
安捷伦8890气相色谱仪，带氮磷检测器(npd)；色谱柱固定相为硝基对苯二甲酸改性的聚乙二醇毛细管色谱柱，柱长60m，内径0.25mm，液膜0.25μm或性能相当色谱柱；载气为高纯n2(纯度≥99.999％)，恒流模式，流速为1.0ml/min；升温程序为初温80℃，保持1min，以10℃/min升至210℃，保持1min，后运行温度240℃，保持5min；进样口温度为250℃，分流模式(分流比为10:1)，进样量为1μl；npd检测器，温度为340℃，氢气流速3ml/min，空气流速60ml/min，尾吹气流速8ml/min。
[0060]
5.2标准曲线的制作
[0061]
称取4g蒸煮熟冷藏贮存的酿酒高粱于50ml离心管中，共6份，分别加入“3.1”中吡嗪类化合物混合标准储备液(ss-1)10μl、20μl、30μl、40μl、50μl、60μl，涡旋混匀，分别加入上述步骤“1”中乙醇水溶液12ml，加入氯化钠至溶液饱和，涡旋混匀，再加入n-甲基吡咯烷酮内标使用液10μl，加入无水乙醚2ml，涡旋振荡提取10min后，于冰浴中超声30min，以10000rpm离心5min，取上层清液于样品瓶中，即得标准溶液，供gc-npd分析。以标准溶液中吡嗪类化合物与内标物的色谱峰面积比为纵坐标，吡嗪类化合物的质量浓度为横坐标制作标准曲线。8种吡嗪类化合物标准曲线参数见表2，8种吡嗪类化合物标准曲线分别如图2～图9所示，图1中1～8号色谱峰依次分别2-甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2,6-二乙基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪、2-乙酰基-3,5-二甲基吡嗪，9号色谱峰为n-甲基吡咯烷酮(内标)。
[0062]
表2 8种吡嗪类化合物标准曲线参数
[0063][0064]
5.3样品测定
[0065]
将样品溶液与标准溶液在同一检测条件下进行测定，将8种吡嗪类化合物的峰面积ai与内标物的峰面积af代入标准曲线，计算试样中相应吡嗪类化合物的质量浓度xi。待测酒醅样品的色谱图如图10所示。
[0066]
5.4计算
[0067]
待测酒醅样品中8种吡嗪类化合物含量按下式计算
[0068]
式中：
[0069]cs
‑‑‑‑‑‑
酒醅样品中吡嗪类化合物的质量浓度，单位为微克每千克(μg/kg)；
[0070]as
‑‑‑‑‑‑
酒醅试样中吡嗪类化合物的峰面积；
[0071]ai
‑‑‑‑‑‑
内标物的峰面积；
[0072]b‑‑‑‑‑‑
标准曲线的截距值；
[0073]k‑‑‑‑‑‑
标准曲线的斜率。
[0074]
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留至小数点后2位。
[0075]
6.重复性实验
[0076]
精密称取待测酒醅样品4g于50ml离心管中，共6份，标记为s-1～s-6，按上述方法处理样品溶液，测定吡嗪类化合物含量，并计算8种吡嗪类化合物测定结果的重复性，rsd值均小于10％，表明方法重复性良好，具体结果如表3所示。
[0077]
表3 8种吡嗪类化合物重复性实验数据结果
[0078][0079]
7.方法检出限(lod)和定量限(loq)
[0080]
检出限(lod)为信号强度/基线噪声(s/n)＝3:1时对应的样品质量浓度；定量限(loq)为信号强度/基线噪声(s/n)＝10:1时对应的样品质量浓度。
[0081]
本实施例中8种吡嗪类化合物检出限(lod)为4.22μg/kg～15.14μg/kg，定量限(loq)为14.07μg/kg～50.45μg/kg，具体计算结果如表4所示。
[0082]
表4 8种吡嗪类化合物检出限(lod)和定量限(loq)计算结果
[0083][0084]
8.准确度实验
[0085]
精密称取待测酒醅样品4g于50ml离心管中，分为a、b、c共3组，每组2份，共6份，分别标记为a组(r1-1和r1-2)、b组(r2-1和r2-2)、c组(r3-1和r3-2)；取“3.1”中8种吡嗪类化合物混合标准储备液(ss-1)，分别向a组中加入10μlss-1，向b组中加入20μlss-1，向c组中加入30μlss-1；分别加入12ml乙醇水溶液，加入氯化钠至溶液饱和，涡旋混匀，再加入10μl内标使用液，加入2ml无水乙醚，涡旋振荡提取10min后，于冰浴中超声30min，以10000rpm离心5min，取上层清液于样品瓶中，即得样品溶液，供gc-npd分析。待测酒醅样品准确度实验的色谱图如图11所示。
[0086]
将吡嗪类化合物与内标物的峰面积代入标准曲线，计算各吡嗪类化合物的含量及回收率，8种吡嗪类化合物的回收率均大于85％，rsd值均小于5％，表明本方法准确度良好，具体计算结果如表5所示。
[0087]
表5 8种吡嗪类化合物准确度实验结果
[0088][0089]
实施例2
[0090]
本实施例提供一种检测清香型白酒酒醅中吡嗪类化合物(2-甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2,6-二乙基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪、2-乙酰基-3,5-二甲基吡嗪)含量的方法，具体如下：
[0091]
1.试剂：与实施例1相同。
[0092]
2.待测样品及标准品
[0093]
清香型白酒酒醅：由劲牌有限公司提供；标准品与实施例1相同。
[0094]
3.标准溶液配制：与实施例1相同。
[0095]
4.样品处理过程
[0096]
精密称取4g清香型白酒酒醅样品于50ml离心管中，加入12ml乙醇水溶液，加入氯化钠至溶液饱和，涡旋混匀，再加入10μl内标使用液，加入2ml无水乙醚，涡旋振荡提取10min后，于冰浴中超声30min，以10000rpm离心5min，取上层清液于样品瓶中，即得样品溶液，供gc-npd分析。
[0097]
5.标准曲线的绘制：与实施例1相同。
[0098]
6.样品测定
[0099]
测定条件、方法与实施例1相同，所得清香型白酒酒醅样品的色谱图如图12所示。将吡嗪类化合物与内标物的峰面积代入标准曲线，计算得到清香型白酒酒醅样品中各吡嗪类化合物的含量，本实施例待测样品中8种吡嗪类化合物均为未检出。
[0100]
实施例3
[0101]
本实施例提供一种检测浓香型白酒酒醅中吡嗪类化合物(2-甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2,6-二乙基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪、2-乙酰基-3,5-二甲基吡嗪)含量的方法，具体如下：
[0102]
1.试剂：与实施例1相同。
[0103]
2.待测样品及标准品
[0104]
浓香型白酒酒醅：由宜宾六尺巷酒业提供；标准品与实施例1相同。
[0105]
3.标准溶液配制：与实施例1相同。
[0106]
4.样品处理过程
[0107]
精密称取4g浓香型白酒酒醅样品于50ml离心管中，加入12ml乙醇水溶液，加入氯
化钠至溶液饱和，涡旋混匀，再加入10μl内标使用液，加入2ml无水乙醚，涡旋振荡提取10min后，于冰浴中超声30min，以10000rpm离心5min，取上层清液于样品瓶中，即得样品溶液，供gc-npd分析。
[0108]
5.标准曲线的绘制：同实施例1。
[0109]
6.样品测定
[0110]
测定条件、方法与实施例1相同，所得浓香型白酒酒醅样品的色谱图如图13所示。将吡嗪类化合物与内标物的峰面积代入标准曲线，计算得到浓香型白酒酒醅样品中各吡嗪类化合物的含量，本实施例待测样品中2,3,5-三甲基吡嗪为45.0μg/kg、2,3,5,6-四甲基吡嗪为8.0μg/kg，其它6种吡嗪类化合物均为未检出。
[0111]
对比例1
[0112]
采用顶空固相微萃取结合气相色谱-氮磷检测器联用技术测定酒醅中吡嗪类化合物作为对比方法，具体步骤如下：
[0113]
精密称取2g酱香型白酒酒醅样品于20ml顶空瓶中，加入10％(v/v)乙醇水溶液6ml，加入氯化钠饱和，再加入10μl内标使用液，涡旋混匀，即得样品溶液，盖上瓶盖，插入50μm/30μm二乙烯基苯/carboxentm/聚二甲基硅氧烷(dvb/car/pdms)固相微萃取纤维头，50℃下萃取40min，供gc-npd分析，解吸温度为250℃，解吸时间为5min。
[0114]
本发明和对比方法的对比结果如表6所示。本发明中8种吡嗪类化合物的回收率为89.72％～99.44％，检出限为4.22μg/kg～15.14μg/kg，方法对比中8种吡嗪类化合物的回收率为42.52％～70.05％，检出限为5.23μg/kg～31.33μg/kg，表明本发明提供的方法准确度及检出限均优于对比方法。
[0115]
表6 8种吡嗪类化合物准确度实验对比结果
[0116][0117]
对比例2
[0118]
采用液液微萃取结合气相色谱-氢火焰离子检测器联用技术测定酒醅中吡嗪类化合物作为对比方法，具体步骤如下：
[0119]
精密称取4g酱香型白酒酒醅样品于50ml离心管中，加入10μl内标使用液，加入15ml超纯水，混合均匀，用氢氧化钠溶液(0.01mol/l)调整溶液使其ph值为5，震荡摇匀，加入氯化钠使溶液饱和；再加入5ml乙酸乙酯，振荡萃取15min，以10000rpm离心5min，取上清液于进样瓶中，即得样品溶液，供gc-fid分析。以乙酸乙酯为溶剂稀释实施例1中吡嗪类化
合物混合标准储备液(ss-1)，取1ml于2ml进样瓶中，加入10μl内标使用液，即得标准溶液，供gc-fid分析。
[0120]
本发明和对比方法的对比结果如表8所示。本发明中8种吡嗪类化合物的回收率为89.72％～99.44％，检出限为4.22μg/kg～15.14μg/kg，方法对比中8种吡嗪类化合物的回收率为23.46％～64.60％，检出限为27.53μg/kg～97.13μg/kg，表明本发明提供的方法准确度及检出限均优于对比方法。
[0121]
表8 8种吡嗪类化合物准确度实验对比结果
[0122][0123]
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
技术特征：1.一种酒醅中吡嗪类化合物的前处理及检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1)精密称取2-甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪、2,6-二甲基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪、2,3,5-三甲基吡嗪、2,6-二乙基吡嗪、2,3,5,6-四甲基吡嗪、2-乙酰基-3,5-二甲基吡嗪标准品适量，加无水乙醇进行溶解，得混合标准储备液；2)称取n-甲基吡咯烷酮适量，加无水乙醇溶解，得内标使用液；3)取酿酒高粱采用高压蒸煮熟，冷却至常温后于-4℃贮存，作为模拟基质备用；4)精密称取待测酒醅样品2重量份和所述步骤3)中模拟基质6重量份，向模拟基质中分别加入步骤1)所得的混合标准储备液，所加混合标准储备液体积分别为10μl、20μl、30μl、40μl、50μl、60μl，涡旋混匀；5)向步骤4)待测酒醅样品和模拟基质中加入乙醇水溶液，待测酒醅样品与乙醇水溶液按质量体积比1g:3ml的比例进行混合；加入适量氯化钠，使水溶液达到饱和状态；6)向步骤5)加入步骤2)所得的内标使用液10～20μl，再加入萃取剂，待测样品与萃取剂按2:1的质量体积比进行混合后，于冰浴中超声30min，再离心5～10min，静置30min，使水相和有机相分层；7)取步骤6)中有机相于样品瓶中，向其中加入无水na2so4脱水后，分别得到待测酒醅样品供试液和经模拟基质制备获得的标准溶液；8)将步骤7)得到的待测酒醅样品供试液注入气相色谱仪，通过gc-npd分析，获得吡嗪类化合物与内标物的峰面积；9)将步骤7)得到的经模拟基质制备获得的标准溶液注入气相色谱仪，通过gc-npd分析，获得吡嗪类化合物与内标物的峰面积；以各吡嗪类化合物与内标物的峰面积比为纵坐标，吡嗪类化合物的质量浓度为横坐标制作标准曲线；10)将步骤8)待测酒醅样品供试液中吡嗪类化合物与内标物的峰面积代入步骤9)制作的标准曲线，计算得到待测酒醅样品中吡嗪类化合物的质量浓度。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中吡嗪类化合物混合标准储备液的浓度为7.7～367.0mg/l。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中n-甲基吡咯烷酮内标物的浓度为40000mg/l。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤5)中乙醇水溶液的乙醇体积分数为3％～5％，ph值为3～4。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤6)中萃取剂为乙酸乙酯、无水乙醚、正己烷、二氯甲烷中的一种或两种混合物。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤6)中萃取剂为无水乙醚。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，待测酒醅样品、乙醇水溶液、萃取剂的用量比为4～8g:12～24ml:2～4ml。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤8)和步骤9)中气相色谱仪条件为采用硝基对苯二甲酸改性的聚乙二醇毛细管色谱柱；载气为高纯n2(纯度≥99.999％)，恒流模式，流速为1.0ml/min；升温程序为初温80℃，保持1min，以10℃/min升至210℃，保持1min，后运行温度240℃，保持5min；进样口温度为250℃，分流模式(分流比为10:1)，进样量
为1μl；npd检测器，温度为340℃，氢气流速3ml/min，空气流速60ml/min，尾吹气流速8ml/min。9.根据根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤10)吡嗪类化合物的计算公式为：式中c
s
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酒醅样品中吡嗪类化合物的质量浓度，单位为微克每千克(μg/kg)；a
s
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酒醅试样中吡嗪类化合物的峰面积；a
i
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内标物的峰面积；b
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标准曲线的截距值；k
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标准曲线的斜率。
技术总结本发明公开了一种酒醅中吡嗪类化合物的前处理及检测方法，包括以下步骤：制备酒醅样品溶液，并通过气相色谱-氮磷检测器(GC-NPD)进行测定；将标准溶液通过GC-NPD测定，以吡嗪类化合物与内标物的峰面积比为纵坐标，以吡嗪类化合物的质量浓度为横坐标，制作标准曲线。将样品溶液中各吡嗪类化合物的峰面积代入上述标准曲线，求得酒醅样品中各吡嗪类化合物的质量浓度。本发明通过制备固体模拟基质，采用与酒醅样品同样的前处理方法获得标准溶液，制作标准曲线同时检测酒醅中多种吡嗪类化合物，消除标准溶液与样品基质差异带来的检测误差，具有专属性高、检测限低、准确度高、结果稳定的优点。优点。优点。
技术研发人员：孙细珍 熊亚青 刘家欢 解倩倩
受保护的技术使用者：劲牌有限公司
技术研发日：2022.03.30
技术公布日：2022/7/5
